反应性淋巴细胞分类计数在传染性单核细胞增多症的诊断价值

探讨在诊断传染性单核细胞增多症时血涂片检测反应性淋巴细胞分类计数的临床价值。方法:选取2018年2月到2021年2月我院收治的传染性单核细胞增多症患者,共计45例,将其设入研究组,同时选取同期来院体检的健康受检者45例,将其设入对照组,所有受检者均进行仪器检验与血涂片分类计数反应性淋巴细胞,对比两组受检者白细胞计数检测结果及反应性淋巴细胞阳性率。结果:研究组患者WBC、L%、M%及反应性淋巴细胞%指标均高于对照组受检者;研究组患者仪器检验与血涂片分类计数反应性淋巴细胞阳性率明显高于对照组,传染性单核细胞增多症确诊率与对照组相比明显提高,对比差异具有统计学意义,P<0.05。结论:在诊断传染性单核细胞增多症时做血涂片反应性淋巴细胞分类计数可快速并准确筛查出传染性单核细胞增多症,值得推广应用。

模拟常压失事潜艇环境对人体淋巴细胞分类的影响

目的探讨在失事潜艇固壳未破损的环境下机体淋巴细胞分类计数改变情况,从而进一步探讨机体免疫功能的变化。方法4名健康男性受试者,利用500 m饱和潜水系统模拟失事潜艇固壳未破损的环境条件,控制氧浓度(18±1)％,二氧化碳浓度(2±0．5)％,气温10～18℃,应急照明,应急营养供给。分别于试验前,暴露第2天、第4天、第8天早晨空腹抽血,流式细胞分析术检测淋巴细胞分类。结果在试验开始后T细胞百分比升高,但随后逐渐下降,趋近正常值;B细胞百分比下降,在第8天有显著降低;NK细胞在暴露第2天显著下降,随后有恢复趋势;Tc下降,与试验前相比有显著差异; Th升高,但不显著。结论失事潜艇固壳未破损的环境条件对人体血液淋巴细胞分类有一定的影响,机体免疫细胞分类计数变化提示免疫功能下降。

基于流式细胞术的淋巴细胞亚群分类试验条件比较

目的比较不同抗体稀释度和多聚甲醛浓度对流式细胞术测定淋巴细胞亚群分类结果的影响。方法取猴抗凝全血经浓度为 1%或 4%的多聚甲醛固定后连续 4 d 上机测定淋巴细胞荧光强度及 CD3+、CD4+、CD8+、CD20+百分率及 CD4+/CD8+比值。取猴抗凝全血 50 μl 分别与 1、3、5 和 10 μl CD8+-FITC、CD4+-PE、CD3+-PerCP 抗体混合后连续 7 d 上机测定 CD4+和 CD8+荧光强度及 CD4+与 CD8+百分率和 CD4+/CD8+比值。结果经 1%多聚甲醛固定至第 4 天检测雄性动物 CD4+、CD8+、CD3-CD20+百分率和雌性动物 CD8+百分率与样本制备当天相比存在显著性差异(P < 0.05,P < 0.01),且存在时间依赖性。样本保存至第 4 天时以 1%多聚甲醛保存的样本 CD4+、CD8+、CD3^-CD20+百分率与 4%多聚甲醛保存的样本相比亦存在显著性降低(P < 0.05,P < 0.01,P < 0.001)。50 μl 抗凝全血中添加 1 μl 抗体时,自制备后第 4 天起 CD4+平均荧光强度即显著降低(P < 0.01)。所有样本至第 4 天起,CD4+及 CD8+平均荧光强度显著性衰减(P < 0.01)。结论不同多聚甲醛使用浓度、抗体用量及保存时间均对样本的状态和试验结果产生一定影响。如流式样本当天无法测定,样本可于 4%浓度的多聚甲醛中稳定保存至制备后第 4 天检测;在 50 μl 全血中应添加至少 3 μl 抗体用于检测,以保证流式细胞仪对淋巴细胞表型识别的灵敏度,检测应于样本制备后 3 天内完成。

同种和异种混合淋巴细胞反应及分类混合淋巴细胞反应的比较

目的:对比体外人外周血淋巴细胞对于异种小鼠细胞和同种异体细胞混合淋巴细胞反应. 方法:建立异种-同种混合淋巴细胞反应模型,进行分类细胞反应试验. 结果:人外周血淋巴细胞对于异种小鼠细胞的反应明显低于对于同种异体细胞的反应(P<0.05).细胞分类研究显示:在异种混合淋巴细胞反应中,主要是CD4+T细胞通过间接途径受小鼠抗原刺激而增生;在同种混合淋巴细胞反应中,主要是CD4+T细胞通过直接途径受同种异体抗原刺激而增生.在两种混合淋巴细胞反应中,CD8+T细胞也参与. 结论:异种混合淋巴细胞反应弱于同种混合淋巴细胞反应, 异种细胞只通过间接途径刺激T细胞.同种和异种混合淋巴细胞反应均需要抗原提呈细胞参与,CD4+T淋巴细胞是反应的主要细胞.

HBeAg阴、阳性慢乙肝患者细胞免疫状态及HBVDNA水平分析

目的对比HBeAg阴性及HBeAg阳性慢性乙肝患者在细胞免疫状态及HBV DNA水平方面的差别,分析造成这种差别的可能原因。方法应用流式细胞仪进行T淋巴细胞分类检测、荧光定量PCR测量血清中的HBVDNA。结果在HBVDNA水平方面,HBeAg阴性慢性乙肝患者均值为(5.13±1.43)Log,显著低于HBeAg阳性组的(6.29±1.70)Log(P<0.05);在T淋巴细胞分类方面,HBeAg阴性慢性乙肝患者CD8+T显著高于HBeAg阳性患者,分别是:23.25±3.79和20.69±3.30(P<0.05),总T、CD4+T及CD44+/CD8+比值方面两组无明显差别(P>0.05)。结论HBeAg阴性慢性乙肝患者HBV DNA水平低于HBeAg阳性患者,可能与HBeAg阴性慢性乙肝患者具有相对较强的细胞免疫状态有关。

谷氨酸脱羧酶对不同周龄的非肥胖型糖尿病小鼠发生1型糖尿病的影响

目的谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)对不同周龄非肥胖型糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠糖尿病免疫干预效果的影响。方法将3周龄NOD小鼠40只随机分为4组。3周龄组在3周龄时腹腔注射GAD3mU+不完全弗氏佐剂(IFA)50μl,8周龄组在8周龄时腹腔注射GAD3mU+IFA50μl,12周龄组在12周龄时腹腔注射GAD3mU+IFA50μl,PBS为对照组。动态观察血糖、尿糖,并且眼内眦取血分离血清。28周龄时全部处死,取脾、胸腺检测淋巴细胞亚群的变化及胰腺作病理组织学检测。结果3周龄组胰岛个数最多,胰岛炎评分最低。在胸腺和脾脏中,CD8+/CD4+比率最大(P<0.05)。各组小鼠随着周龄增加血清中IL-4水平总趋势增加,在同一时间点各组之间有差异(P<0.05)。在12周和28周时,3周龄组γ-IFN水平比其他组显著降低。结论NOD小鼠在3周龄时腹腔注射GAD可以延缓小鼠1型糖尿病的发生,主要是通过诱导Th2类因子表达,抑制Th1类因子表达,调节CD8+/CD4+比率增加来实现。

激光共聚焦显微镜在肿瘤免疫治疗检测中的应用

目的:通过激光共聚焦显微镜对肿瘤生物治疗后患者的外周血淋巴细胞进行亚群计数,为生物治疗后外周血淋巴细胞无法分群的肿瘤患者提供新的监测免疫功能状态的方法。方法:收集35例肿瘤生物治疗后患者的外周血标本,通过激光共聚焦显微镜和流式细胞仪两种方法分别对患者外周血淋巴细胞亚群进行分类计数。结果:流式细胞仪和激光共聚焦显微镜同时分类计数的患者外周血细胞标本30例,两种方法在检测CD3、CD3^+/CD4^+、CD3^+/CD8^+、CD3-/CD16^+56^+、CD3-/CD19^+细胞时均无统计学差异(P值>0.05);5例流式细胞仪无法将患者外周血淋巴细胞分群的样本,通过激光共聚焦显微镜可以进行分类计数。结论:激光共聚焦显微镜亦可以用于外周血淋巴细胞的分类计数。