日本血吸虫感染小鼠CD_4^+ T淋巴细胞协同刺激分子表达谱及其在介导Th1/Th2极化中的作用

目的观察日本血吸虫感染小鼠不同病期体内及体外培养后脾CD4+T淋巴细胞表面的协同刺激分子表达谱,探讨协同刺激分子介导Th1/Th2极化的作用。方法收集血吸虫感染后4w、7w、12w、16w和20w小鼠及正常小鼠脾CD4+T淋巴细胞,以及上述不同病期经SEA诱导72h后脾淋巴细胞培养上清,用流式细胞术检测细胞表面协同刺激分子CD80、CD86、ICOS、CD40、OX40、4-1BB及PD1表达水平,用ELISA法检测培养上清中的Th1细胞因子IFN-γ,Th2细胞因子IL-4、IL-5、IL-10、IL-13。结果血吸虫感染后小鼠脾CD4+T淋巴细胞表面CD86、ICOS、CD40和OX40的表达均随感染时间延长而上调,其中ICOS和CD86表达上调最为显著;经SEA诱导培养72h后CD86、ICOS亦显著上调表达;培养上清检测发现IFN-γ在4w时呈高表达,7w开始随感染时间延长呈下调表达;IL-4、IL-5、IL-10和IL-13的表达水平则从7w开始明显升高,IL-5的峰值出现在12w,其余均16w达高峰,致20w仍维持在较高水平。结论日本血吸虫感染小鼠CD4+T淋巴细胞协同刺激分子表达水平与Th1/Th2免疫偏移密切相关,其中ICOS、CD86在介导Th2极化中可能具有重要作用。

特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞协同刺激分子B7的表达

目的 探讨B淋巴细胞表面协同刺激分子B7(B7 1、B7 2 )在特发性血小板减少性紫癜 (ITP)中的变化。方法 用流式细胞术检测 30例初发ITP患者和 15例正常人对照外周血淋巴细胞协同刺激分子B7 1(CD80 + )、B7 2 (CD86 + )表达率。结果 ITP患者外周血淋巴细胞CD86 + 、B细胞表面CD86 (CD1 9+ CD86 + CD1 9+ )表达率明显高于正常人 (P <0 .0 5 ) ,而CD80 + 、CD1 9+ CD80 + CD1 9+ 表达率相对于正常人无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 ITP患者CD86 +

中药狼疮定对狼疮性肾炎患者LN淋巴细胞协同刺激分子表达的影响

目的:观察中药狼疮定对狼疮肾炎(LN)外周血淋巴细胞协同刺激分子表达的影响,探讨其治疗LN的作用机制。方法:筛选30例LN患者,随机分成中西药组和西药组,正常对照组选择同期门诊体检正常者15名。正常对照组于第0周,治疗组于第0周和第24周分别抽肝素抗凝血,采用双色免疫荧光标记及FCM检测分析外周血淋巴细胞(PBLC)CD4+CD28+、CD4+CD40L+、CD4+CTLA-4+、CD19+CD80+、CD19+CD86+、CD19+CD40+细胞百分率,并同时观察LN患者的SLEDAI评分、血补体(C3、C4)、IgG、ESR、血Scr和24hupro。结果:临床活动期LN患者PBLC协同刺激分子的表达明显增加;治疗24周后两组患者各协同刺激分子表达量均较治疗前降低;中西药组CD4+CD40L+细胞、CD4+CTLA-4+细胞、CD19+CD80+细胞、CD19+CD86+细胞仍维持于正常人水平,而西药组则明显下降;两组SLEDAI、24hupro、补体C3、C4、IgG、ESR检测结果均较治疗前降低,而血Scr无明显变化,且中西药组患者24hupro较西药组减少更明显,而两组SLEDAI、C3、C4、IgG、ESR比较无明显差异。结论:泼尼松、环磷酰胺联合狼疮定治疗LN的疗效明显;泼尼松、环磷酰胺联合狼疮定方案改善LN患者尿蛋白的作用较单纯泼尼松、环磷酰胺方案更佳;中药狼疮定可以防止泼尼松、环磷酰胺治疗对LN患者外周血淋巴细胞协同刺激分子的过度抑制,从而可使人体免疫系统功能维持于一种平衡状态。

类风湿关节炎患者淋巴细胞协同刺激分子和活化标志的表达及意义

类风湿关节炎（RA）是以多关节滑膜慢性炎症导致滑膜成纤维母细胞增生、大晕淋巴细胞、巨噬细胞、浆细胞浸润为特征的一种常见自身免疫性疾病。研究发现，淋巴细胞活性及其信息传递异常与RA的发生密切相关。

类风湿关节炎患者淋巴细胞协同刺激分子和活化标志的表达及意义

目的探讨淋巴细胞协同刺激分子、活化分子标志在类风湿关节炎(RA)致病机制中的作用。方法采用流式细胞仪检测RA患者外周血和关节滑膜液淋巴细胞协同刺激分子CD28/B7(CD80,CD86)、CD154(CD40L)/CD40和淋巴细胞活化标志 CD25、HLA-DR表达。结果:RA患者外周血B淋巴细胞CD86表达比正常对照组明显下降(P【0.01),B淋巴细胞CD40表达比正常对照组明显增多(P【0.05),而B淋巴细胞CD80表达,T淋巴细胞CD28、CD154表达及关节滑膜液T、B淋巴细胞协同刺激分子表达与正常对照组无显著性差异(P】0.05);同时RA患者外周血T、B淋巴细胞CD25表达比正常对照组明显增多 (P【0.01),关节滑膜液T、B淋巴细胞HLA-DR表达及B淋巴细胞CD25表达比正常对照组明显增多(P【0.01)。结论RA患者中存在淋巴细胞协同刺激分子和活化标志异常表达,这将为临床诊断治疗RA提供新的思路。

T淋巴细胞协同刺激分子CD_(28)和CD_(152)在重症肺炎发病机制中的作用研究

目的:探讨T淋巴细胞相关协同刺激分子CD28和CD152在重症肺炎发病机制中的作用。方法:选取50例重症肺炎患者(重症肺炎组)和50健康查体者(正常对照组)外周静脉血,采用流式细胞仪对T淋巴细胞协同刺激分子(CD28、CD152)进行检测。结果:重症肺炎组患者CD28/CD152值与正常对照组比较显著减少,比较差异有统计学意义(P<0.05);CD28CD3/CD3、CD152CD3/CD3值与正常对照组比较显著上升,比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:重症肺炎外周血T淋巴细胞相关协同刺激分子CD28、CD152表达异常,并参与了重症肺炎发病的病理生理过程。

抗甲状腺治疗对Graves病患者外周血T、B淋巴细胞亚群及部分协同刺激分子表达的影响

为了研究抗甲状腺药物对Graves病患者外周血T、B淋巴细胞亚群及协同刺激分子的表达影响，探讨其在Graves病免疫病理机制中的作用，运用流式细胞术测定20例初发Graves病患者、11例硫脲类药物治疗的患者及16例正常对照外周血淋巴细胞CD19、CD40、HLA-DR、CD80、CD3、CD4、CD8、CD28等表面分子的表达水平。发现Graves病患者CD19^＋、CD19^＋CD40^＋、CD19^＋HLA—DR^＋、CD80^＋细胞比率高于正常对照组；CD3^＋CD8^＋细胞比率低于正常对照组，CD3^＋CD4^＋／cD3^＋CD8^＋比值升高，CD3^＋HLA-DR^＋细胞比率高于正常对照组。硫脲类药物他巴唑或丙基硫氧嘧啶治疗2～4月后缓解患者CD80^＋细胞恢复正常。与正常对照比较治疗缓解后患者CD3^＋CD8^＋、CD8^＋CD28^＋细胞比率降低，CD3^＋HLA-DR^＋、CD4^＋HLA-DR^＋升高，CD3^＋CD4^＋／CD3^＋CD8^＋比值升高。上述结果提示Graves病患者体液免疫处于较高水平，外周血活化T细胞升高，硫脲类药物可以调节部分免疫指标，其改变同临床症状的改善并非同步。

他克莫司对类风湿关节炎关节滑膜液淋巴细胞协同刺激分子的作用

目的研究他克莫司对类风湿关节炎（RA）患者关节滑膜液淋巴细胞协同刺激分子的作用．并初步探讨其免疫抑制的机制。方法分离培养RA关节滑膜液淋巴细胞，经100nmol/L的他克莫司处理后．用流式细胞仪检测T淋巴细胞协同刺激分子CD28、CD154（CD40L）和B淋巴细胞协同刺激分子CD80、CD86、CD40的表达。同时检测T、B淋巴细胞活化标志CD69、CD25、HLA—DR和CD71的表达．用酶联免疫吸附法（ELISA）检测淋巴细胞培养上清Th1细胞分泌的细胞因子白细胞介素（IL）-2、干扰素（IFN）-γ和Th2细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-10的水平，并设不加他克莫司处理的为对照组。结果经他克莫司处理后。T淋巴细胞的CD154（CD40L）和B淋巴细胞的CD86表达阳性率低于对照组（P〈0．05），而T淋巴细胞的CD28和B淋巴细胞的CD80、CD40表达阳性率与对照组相比差异无统计学意义；T、B淋巴细胞的HLA—DR表达阳性率明显低于对照组（P〈0．01），而CD69、CD25、CD71表达阳性率与对照组相比差异无统计学意义；淋巴细胞培养上清Th1细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ和Th2细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-10的水平与对照组相比均显著下降（P〈0．01）。结论他克莫司能明显抑制RA关节滑膜液淋巴细胞的活化，降低Th1细胞因子和Th2细胞因子的分泌水平，这种作用可能是通过下调淋巴细胞的协同刺激分子的表达而实现。

丙泊酚对肺癌根治术患者T淋巴细胞可诱导协同刺激分子的影响

目的观察丙泊酚复合雷米芬太尼麻醉对肺癌根治术患者T淋巴细胞可诱导协同刺激分子(ICOS)的影响。方法择期行肺叶切除术肺癌患者20例,年龄40～70岁。随机均分为丙泊酚组(P组)和异氟醚组(I组)。于麻醉诱导前即刻(T0)、诱导后10 min(T1)、切皮后1 h(T2)、术后1h(T3)及24 h(T4)采集静脉血,用流式细胞仪测定血浆CD4+ICOS+和CD8+ICOS+表达率,用放射免疫法测定血清白细胞介素(IL)-6、IL-10的浓度。结果与T0时比较,P组T3时CD4+ICOS+、CD8+ICOS+、IL-6浓度升高,T2～T4时IL-10浓度均升高(P<0.05);与I组比较,P组在T4时CD4+ICOS+、CD8+ICOS+升高,T3时IL-10升高(P<0.05)。结论丙泊酚可以促进ICOS的表达,可以增强肺癌根治术患者的细胞免疫功能。

共刺激分子4-1BBL和B7-1对人T淋巴细胞的协同激发作用

目的 :探讨 4 1BBL和B7 1这 2种共刺激分子在人外周血T淋巴细胞活化、增殖中的作用和机制。方法 :采用免疫磁珠阴性选择方法分离纯化人外周血T淋巴细胞 ;单向混合淋巴细胞反应 (MLR)分析共刺激分子对T细胞的激发作用 ;3H TdR掺入法测定细胞增殖 ;免疫荧光标记和流式细胞仪表型分析 ;ELISA检测细胞因子。结果 :经免疫磁珠阴性选择分离获外周血单个核细胞中的T细胞纯度 >90 %;人多发性骨髓瘤细胞株 (XG细胞 )转染 4 1BBL和B7 1cDNA后 ,细胞膜表面能稳定高表达这 2个分子 ,4 1BBL和B7 1转基因细胞也均能使同种异体T细胞发生活化、增殖、存活时间延长和介导细胞因子IL 2的分泌 ,且 2种共刺激分子具有一定的协同效应。结论 :4 1BBL和B7 1分子具有赋予XG细胞对T细胞的体外激发、促增殖和分泌IL 2的作用 ,4 1BBL和B7 1分子能产生协同效应。

三七皂甙对慢性肾炎患者外周血T淋巴细胞亚群及协同刺激分子CD_2CD_(58)表达调节的研究

目的:研究三七皂甙对慢性肾炎患者外周血T细胞亚群、协同刺激分子CD2、CD58表达的影响,探讨三七皂甙对慢性肾炎患者细胞免疫功能的调节机制。方法:将80例慢性肾炎患者随机分成2组,一组以常规法治疗,一组以常规法加三七皂甙治疗。用流式细胞仪检测2组患者治疗前后外周血T细胞亚群CD3、CD4、CD8,协同刺激分子CD2、CD58分子表达。同期设置正常对照组。结果:慢性肾炎患者T细胞亚群明显失衡,表现为CD4减少、CD8增加、CD4/CD8比值显著降低,CD2高表达,CD58低表达P<0.01雪,常规组治疗前后,几项指标无明显改变穴P>0.05雪,三七组治疗后CD4、CD58增高穴P<0.05雪,CD8、CD2降低穴P<0.01雪。结论:慢性肾炎T细胞亚群失衡及T细胞活化所需要的协同刺激分子CD2、CD58异常表达,可能在慢性肾炎发生和病情进展中起重要作用。三七皂甙具有免疫调节剂的作用,能使过高或过低的免疫反应恢复正常,长期服用可以延缓慢性肾炎病情进展。

寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的检测

目的探讨寻常疣和跖疣患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及共刺激分子CD28,CD40的表达情况。方法采用流式细胞仪检测实验组60例(寻常疣、跖疣患者各30例)和健康对照组30例的外周血T淋巴细胞亚群和CD28,CD40分子在淋巴细胞上的表达水平。结果寻常疣组、跖疣组与健康对照组相比:外周血CD4+T淋巴细胞(34.57%,35.39%,42.02%)明显减少,差异有统计学意义(P<0.01);CD4+/CD8+比值(1.38,1.44,1.72)降低,差异有统计学意义(P<0.05);淋巴细胞上CD28的表达(52.80%,51.87%,37.41%)明显增加,差异有统计学意义(P<0.01),CD40的表达(12.88%,11.94%,15.82%)减少,差异有统计学意义(P<0.05)。而寻常疣和跖疣两组间,外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组患者的疣体数量和外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子CD28,CD40的变化均无相关性(P>0.05)。结论寻常疣和跖疣患者体内存在T淋巴细胞亚群改变和共刺激分子CD28,CD40表达异常,可能与其免疫功能紊乱和病程慢性化有关。

共刺激信号分子对免疫性血小板减少症患者B淋巴细胞免疫功能的影响

目的:探讨共刺激信号分子(CD80、CD86)的表达对免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血B淋巴细胞数量及功能的影响。方法:选取初诊ITP患者30例、完全缓解ITP患者25例为研究对象,健康志愿者25例为正常对照者。采用流式细胞术检测CD19^+CD5^+、CD19^+CD80^+、CD19^+CD86^+、CD41a^+Ig G、CD41a^+Ig M及CD19^+B细胞内Ig G和Ig M的表达,并与ITP患者的临床指标进行相关性分析。结果:初诊ITP患者B1(CD19^+CD5^+)细胞数均显著高于完全缓解组和健康对照组(P<0.05)。初诊组ITP患者CD19^+CD80^+细胞数均明显高于完全缓解组和健康对照组(P<0.05)。初诊组ITP患者CD19^+B胞内抗体Ig G和Ig M表达水平均明显高于完全缓解组和健康对照组(P<0.05)。治疗后完全缓解组ITP患者Ig G和Ig M的表达水平均明显低于治疗前水平(P<0.05),难治组ITP患者治疗前后Ig G和Ig M表达水平无统计学差异(P>0.05)。CD19^+CD80^+细胞数与Th1的表达水平及Th1/Th2的比例呈正相关(r=0.502,r=0.471,P<0.05)。CD19^+CD80^+细胞数与Ig G和Ig M表达水平呈正相关(r=0.552,r=0.467,P<0.05),与外周血血小板计数呈负相关(r=^-0.424,P<0.05)。Ig G和Ig M表达水平与血小板计数呈负相关(r=^-0.658,r=^-0.526,P<0.05)。结论:ITP患者外周血CD19^+B细胞共刺激信号增强,导致B淋巴细胞异常活化,介导免疫系统发生紊乱,参与ITP发病。

复发性生殖器疱疹患者外周血T淋巴细胞和共刺激分子的检测

目的检测复发性生殖器疱疹(RGH)患者外周血中T细胞亚群和共刺激分子的表达,探讨其在RGH免疫中的作用。方法用免疫荧光技术和流式细胞仪检测RGH及对照组血中T细胞亚群和共刺激分子(CD28,CD25,Fas,FasL,4-1BB)的水平。结果 RGH组CD3+,CD4+/CD8+,CD4+CD28+细胞百分数(59.48±10.9,0.89±0.20,27.69±7.34)显著低于健康对照组(69.79+5.63,1.14+0.39,33.68±7.32),差异均有统计学意义(P<0.05);CD4+CD28-,CD25+细胞百分数及Fas(6.55±4.46,15.81±8.62,27.58±3.10)显著高于健康对照(1.93±1.36,7.13±5.13,23.11±5.63),差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论 RGH外周血CD3+,CD4+/CD8+下降,CD4+CD28+低表达,及CD25+和Fas高表达,可能是RGH复发的免疫障碍环节之一。

不同免疫状态肝移植受者外周血T淋巴细胞亚群及共刺激分子的表达及意义

目的探讨不同免疫状态肝移植受者外周血T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+)、共刺激分子(CD80、CD86)的表达,及其判断肝移植受者不同免疫状态的价值。方法 52例肝移植受者,分为免疫耐受组28例、急性排斥反应组(排斥组)13例、药物不良反应组(药物反应组)11例。采用流式细胞术测定三组患者外周血CD4+、CD8+及CD80、CD86的表达水平,并计算CD4+/CD8+。结果与免疫耐受组和药物反应组比较,排斥组患者外周血CD8+水平较低,而CD4+、CD4+/CD8+、CD80、CD86均较高(P<0.05～0.01)。与免疫耐受组比较,药物反应组患者外周血CD8+、CD80、CD86水平明显升高(P<0.05～0.01),而CD4+、CD4+/CD8+差异无统计学意义(均为P>0.05)。结论免疫T淋巴细胞亚群(CD4+、CD8+及CD4+/CD8+)、CD80、CD86可作为判断肝移植受者免疫状态的指标。

小干扰RNA特异性抑制淋巴细胞共刺激分子CD28基因表达的研究

目的 :为了探讨体外转录法合成的小干扰RNA(smallinterferingRNA ,siRNA)对人淋巴细胞共刺激分子CD2 8基因表达和功能的影响。方法 :设计并合成 3条siRNA(siRNA 1、siRNA 2、siRNA 3) ,在阳离子脂质体的介导下转染淋巴细胞。于转染后 2 4、4 8、72小时收集细胞 ,用半定量RT PCR方法检测CD2 8mRNA的变化 ;流式细胞仪检测CD2 8表达的变化。结果 :体外合成的 3条siRNA通过脂质体转染淋巴细胞后 ,均能不同程度地抑制共刺激分子CD2 8的表达。转染后 4 8小时的流式细胞仪检测显示siRNA 1、siRNA 2和siRNA 3组的CD2 8表达抑制率分别为 2 2 10 %± 1 6 3%、73 5 0 %± 1 0 2 %和 4 2 90 %± 0 89% ,以siRNA 2的CD2 8抑制作用最强。半定量RT PCR检测显示siRNA 1、siRNA 2、siRNA 3转染后淋巴细胞的CD2 8mRNA均受到不同程度的抑制 ,其中siRNA 2组的抑制作用最明显 (74 10 %± 1 6 5 % )。结论 :siRNA可特异性抑制淋巴细胞共刺激分子CD2 8基因的转录和表达 ,从而为进一步研究siRNA在移植免疫耐受及防治GVHD方面的应用提供了理论和实验基础。

特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞共刺激分子的表达及白介素18的作用

本研究探讨特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者外周血淋巴细胞共刺激分子CD80、CD86及其配体CD28的表达水平及白介素18的作用。应用免疫荧光标记和流式细胞技术检测34例ITP患者和34名正常人外周血淋巴细胞共刺激分子CD80、CD86及其配体CD28的表达,酶联免疫(ELISA)法测定血浆IL-18。结果表明:ITP患者外周血淋巴细胞CD80、CD86表达率(4.21±2.27%,7.19±5.16%)均明显高于正常对照组(2.34±0.87%,4.08±1.96%,P<0.01)。ITP组血浆IL-18含量为(538.31±111.33)pg/ml,正常对照组血浆IL-18含量为(489.44±49.07)pg/ml。IL-18含量与血小板数量呈显著性负相关(r=-0.395,P<0.05)。结论:ITP患者CD80和CD86共刺激分子过度表达,患者血浆中IL-18水平比正常对照组明显升高(P<0.05),共刺激分子CD80、CD86与ITP发病密切相关,IL-18在ITP发病机理中起重要作用。

ITP患者外周血淋巴细胞共刺激分子表达及意义

目的 研究共刺激分子在特发性血小板减少性紫癜 (ITP)外周血淋巴细胞的表达 ,并探讨其发病机制。方法 应用流式细胞术检测 2 8例 ITP患者及 15例正常对照者的外周血淋巴细胞 CD80 、CD2 8、CD86 表达 ,用酶联免疫吸附法检测血小板相关抗体 (PAIg G)水平 ;并与患者的临床资料进行相关性分析。结果 1ITP组外周血淋巴细胞 CD2 8表达率降低 ,CD80 表达率略增加 ,与对照组均无统计学差异 ;CD86 表达率明显高于对照组 (P<0 .0 1)。 2 ITP组 2 1例 PAIg G水平升高 ,均值为 (197.39± 6 7.81) ng/ 10 7PA。 3ITP组外周血淋巴细胞 CD86 表达率与其巨核细胞数值呈正相关 (P<0 .0 5 )。结论 ITP患者外周血淋巴细胞共刺激分子 CD2 8、CD80 表达无缺陷 ;CD86 表达明显增加。表明 CD86 可能参与 ITP的发病机制 ,应用抗 CD86 单克隆抗体方法可能治疗 ITP。