改良微量淋巴细胞毒实验在反复自然流产免疫病因方面的实验诊断研究

目的提高反复自然流产(RSA)免疫病因实验诊断水平。方法应用改良微量淋巴细胞毒实验(CDC)检测封闭抗体1591例。结果此实验中台盼蓝染色优于伊红Y,补体是关键成分;封闭抗体缺乏与原发RSA明显相关,与继发RSA有相关性。结论改良微量淋巴细胞毒实验是RSA实验诊断及免疫治疗效果监测重要手段,原发RSA中免疫病因占有重要位置,继发RSA中免疫因素较复杂。

流式细胞术和微量淋巴细胞毒法检测HLA-B27的对比观察和分析

目的 比较流式细胞术（FCM）和微量淋巴细胞毒法（MCLT）检测HLA-B27的结果差异性，评价FCM检测HLA-B27在强直性脊柱炎（AS）诊断中的应用价值。方法 采用FCM和MCLT法同步检测120例患者的HLA-B27的表达。结果 120例患者中89例AS病例FCM法HLA-B27阳性85例，阳性率95．5％；MCLT法HLA-B27阳性70例，阳性率78．7％；19例其他脊柱关节病FCM法阳性8例，阳性率42．1％，MCLT法3例，阳性率15．8％；12例腰腿疼不明疾病两种方法均阴性。经SPSS11．5软件分析，P〈0．05，结果有显著性的意义。结论 FCM法对HLA-B27测定的灵敏度、特异性都明显超过了MCLT法，是目前较为理想的方法。

肾透明细胞癌与HLA抗原关系的初步研究

目的 探索肾透明细胞癌与HLA -A ,B抗原之间的关联。方法 HLA -A ,B抗原分型采用常规NIH标准微量淋巴细胞毒方法。结果 11例肾透明细胞癌患者A2 ,A9和B40等位基因的表达高于正常人。

辐照氟银脐动脉移植的实验研究

目的:观察辐照氟银脐动脉的移植效果。方法:16只家兔随机分为实验组(A组)和对照组(B组),A组移植辐照氟银脐动脉,B组移植自体动脉,术后进行体外微量细胞毒实验来观察移植后宿主的免疫排斥反应,观察移植血管通畅率和组织结构变化。结果:体外微量细胞毒实验显示A组淋巴细胞死亡率与B组无明显差别;两组移植血管通畅率无明显差别;光镜观察辐照氟银脐动脉组术后8周管腔已有完整的内皮层覆盖,12周中膜出现平滑肌细胞。结论:体外淋巴细胞毒实验显示辐照氟银脐动脉移植后抗原性降低,移植后形态学变化显示机体能利用脐动脉的纤维结构逐渐重建正常动脉的组织结构。

特异性血小板抗体检测的实验研究

目的 建立一种简易、特异性强的血小板抗体检测方法。方法 利用磷酸氯喹溶液对血小板进行处理 ,去掉血小板相关抗原 (HLA抗原 ) ,用只含特异性抗原的血小板包被聚乙烯板来捕获血小板抗体。结果 与常用的SEPSA和淋巴细胞毒实验 (LCT)比较 ,该方法只表现血小板特异性抗体反应。结论 本方法能够鉴别血小板相关抗原的抗体和血小板特异性抗原的抗体 ,为临床血小板减少疾病的鉴别诊断。

猪同种异体肾移植术前组织配型方法探讨

同种异体器官移植及建立器官移植模型术前进行严格组织配型有利于减少免疫学因素的影响,使受体和移植物长期存活。由于目前没有成熟的猪组织配型方法及试剂,我们模拟人器官移植方法选择供受体建立猪同种异体肾移植模型。从23头四川白猪中选择ABO血型相同、ABO血交叉配血反应阴性、微量淋巴细胞毒反应(CDC)、阴性单向混合淋巴反应(MLR)相对较低的同胞猪共6对(1例只作供体)为供受体行单肾原位移植,另一侧肾切除。5例组织相容性较低(MLR在2175～3560之间,CDC计分在1～4分之间),其中2例于术后第2d死于手术打击,2例术后第4d分别死于急性肾小管坏死和加速性排斥反应,1例术后1周死于急性肾小管坏死。6例组织相容性较高(MLR在982～1916之间,CDC计分在2～4分),其中1例死于手术麻醉,3例分别于术后2周死于加速排斥和急性排斥,1例术后肾功能良好,另1例术后发生轻微排斥反应,而后肾功能恢复正常。提示模拟人组织配型方法选择供受体可以建立猪同种异体肾移植模型。通过ABO血型、交叉配血、CDC及MLR实验筛选成功地避免了超急性排斥反应的发生。但从本实验数据中很难分析该配型方案在避免加速型排斥反应、急性排斥反应和慢性排斥的作用,进一步的实验仍在研究之中。

LCT配合血小板的输注对HLA抗体的影响

目的了解随机血小板输注无效患者输注淋巴细胞毒实验(Lymphocyte cytotoxicity test,LCT)配合血小板后,其人类组织相容性抗原(Human leukocyte antigen,HLA)抗体的变化,探讨HLA抗体阳性患者的血小板有效输注方式。方法选取5例由于HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效,需长期输注LCT配合血小板的患者,以每输注LCT配合血小板5个治疗量为一间隔期,动态检测患者的HLA抗体强度和特异性。结果随着输入血小板数量的增加,5例患者的HLA抗体强度逐渐减弱,2例患者的HLA抗体特异性发生改变。结论LCT能够解决由于HLA抗体阳性引起的随机血小板输注无效,但随着输入抗原的改变HLA抗体的特异性亦会发生改变,产生新特异性的HLA抗体,建立HLA相合血小板供者库是最有效的解决方法。

脐血HLA-B15组血清学与DNA定型方法的比较研究

目的 探讨血清学方法对脐血HLA B1 5特异性组分型存在的误差 ,及应用PCR SSP方法分型的可行性。方法 分别采用微量淋巴细胞毒实验和PCR SSP方法对 1 37份脐血做分型对比研究。结果 DNA分型成功率 1 0 0 % ,特异性、敏感性好 ,血清学对B1 5组分型总误差 1 5 % ,主要发生在B62、B75、B1 51 1 / 1 50 8/ 4

CDMA和PCR-SSP方法对HLA-B_(27)分型的探讨

目的了解补体依赖性微量淋巴细胞毒实验(CDMA)对人类白细胞抗原B27(HLA-B27)检测结果情况。方法采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)实验作为参考实验,对用CDMA方法检测过的标本用PCR-SSP方法进行复检,比较2种检测结果。结果用2种方法对216例标本进行检测,其中212例标本结果一致,4例标本CDMA为阴性而PCR-SSP为阳性,经统计学分析,差异无统计学意义(χ2=2.25,0.1<P<0.25)。结论CDMA方法能够为临床提供可靠的结果。

五指山小型猪-藏酋猴异种肝移植的术前检测

目的本研究为了减少五指山小型猪-藏酋猴异种肝移植手术的超急性排斥反应(hyperacute rejection,HAR)和急性排斥反应(acute rejection,AR)发生率,进行全面术前检测。方法分别利用PCR技术和植物凝集素细胞染色对供体GGTA1基因敲除类型进行鉴定;30只藏酋猴分别与五指山小型猪进行淋巴细胞毒实验;供受体ABO血型鉴定。结果供体为GGTA1基因敲除猪,GTKO猪外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)植物凝集素细胞染色未检测出荧光,表明GGTA1基因敲除成功,与基因型鉴定结果一致。通过淋巴细胞毒实验选定28#与供体PBMC毒性最小的藏酋猴做为备选受体。血型鉴定显示供受体血型一致。结论通过对GTKO五指山小型猪-藏酋猴异种肝移植的术前检测选定合适的受体,可有效减少异种移植HAR和AR的发生率。

不明原因复发性流产的主动免疫治疗

目的比较不同主动免疫治疗方法对于不明原因复发性自然流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)的有效性,以寻找治疗不明原因RSA的最有效方法。方法选择不明原因RSA50例,分别利用患者丈夫淋巴细胞(A组)、第三者淋巴细胞(B组)和≥2位第三者淋巴细胞(C组)进行主动免疫治疗,再次妊娠前进行抗夫淋巴细胞毒实验(CDC)检测,最后评价妊娠是否成功。结果A、B、C三组间患者的年龄及流产次数均无显著性差异(P>0.05)。经主动免疫治疗后,A组患者CDC阳性率为83.3%,妊娠成功率为75.0%;B组患者CDC阳性率为87.5%,妊娠成功率为81.2%;C组患者CDC阳性率为90.0%,妊娠成功率为80.0%。三组间治疗后CDC阳性率及妊娠成功率均无显著性差异(P>0.05)。结论不同的主动免疫治疗方法对于RSA患者的有效性无显著性差异。利用第三者的淋巴细胞免疫治疗可以获得相对较高的妊娠成功率,但利用丈夫淋巴细胞免疫治疗更易被患者接受和推广。

中国北方汉族人群强直性脊柱炎与HLA-B27亚型关联性研究

强直性脊柱炎（AS）患者131例，根据患者民族、籍贯挑选出北方汉族群体，临床均符合1984年AS纽约修订诊断标准。男女比例2．68：1，年龄5～69岁，平均25岁；采用微量淋巴细胞毒实验，筛选出118例HLA-B27阳性样本；正常对照组，从4202名中国北方汉族群体，主要包括北京、河北、河南、山东、辽宁、黑龙江、山西、陕西等近10个省市造血干细胞供者中，采用流式反向PCR-SSO（One Lambda ，RSSO1B，RSSO281）方法检测出150名HLA-B27阳性样本。采用PCR-SSP方法，以中国北方汉族HLA-B27（＋）的AS患者为研究对象。150例北方汉族HLA-B27（＋）正常健康人为对照，对B27基因亚型与AS关联性进行分析。