淋巴细胞特异性酪氨酸蛋白激酶基因多态性与阿尔茨海默病的相关性研究

目的探讨淋巴细胞特并性酪氨酸蛋白激酶（LCK）基因多态性、载脂蛋白E（apoE）基因多态性和阿尔茨海默病（AD）的相关性。方法用TaqMan—PCR法检测单核苷酸多态性（SNP），对380例日本人AD患者[包括327例迟发型AD（LOAD）与53例早发型AD（EOAD）]和380例非痴呆对照纽中。观察LCK基因及apoE基因的多态性分布，并分析其与AD的相关性。结果（1）LCK基因＋6424A/G多态位点的G／G基因型息AD风险为非G／G型的1．41倍（95％CI=1．06～1．87），患LOAD风险为1．37倍（95％CI=1．02～1．85）；（2）apoEε4基因携带者患AD风险为非apoEε4基因携带者的5．11倍（95％CI=3．63～7．19）；（3）排除apoE基因型对AD风险的影响后，G／G基因型患AD风险为非G／G型的1．66倍（95％CI=1．16～2．38），患LOAD风险为1．64倍（95％CI=1．12～2．40），同时风险等位基因G与AD（P〈0．05）和LOAD（P〈0．05）具有相关性。结论LCK基因＋6424A／G多态位点与AD风险的增加呈正性相关性，apoEε4增加了AD的发病风险，LCK是独立于APOE基因的又一新的风险基因。

白细胞介素2对淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶在肾小管上皮细胞中表达的影响

目的:探讨IL-2对肾小管上皮细胞中淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)mRNA及蛋白表达的影响以及Lck在狼疮肾炎中的致病作用。方法:采用BALB/c小鼠及BXSB狼疮小鼠肾小管上皮细胞为实验对象,分别给予IL-2(100U/m l)刺激。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肾小管上皮细胞Lck mRNA的表达,免疫印迹法检测Lck蛋白的表达,比较IL-2刺激前后Lck mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:正常BALB/c小鼠及BXSB狼疮小鼠肾小管上皮细胞中仅有微量Lck mRNA及蛋白表达,经IL-2刺激后二者的Lck mRNA及蛋白表达水平均有增加,以狼疮小鼠肾小管上皮细胞增加更为显著。结论:(1)肾小管上皮细胞中有Lck基因的表达。(2)肾小管上皮细胞经IL-2刺激后Lck mRNA及蛋白表达水平增加,提示IL-2可活化肾小管上皮细胞诱导Lck表达,进而可能通过一系列信号传导作用,发挥生物学作用。相对于BALB/c小鼠,狼疮小鼠肾小管上皮细胞在IL-2刺激后Lck表达更明显,提示狼疮小鼠肾小管上皮细胞可能更易激活。(3)由于Lck在狼疮肾炎小鼠肾小管上皮细胞中异常表达,推测Lck可能作为细胞因子或炎症因子的重要信号分子,促进狼疮肾炎的发生。

淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶与信号转导

淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)是近年来发现的一种非受体型蛋白酪氨酸激酶, 存在于T淋巴细胞及其它一些非T淋巴细胞内,参与细胞的信号转导过程,在多种生理及病理过程中 发挥着重要作用。本文就近年的研究进展进行综述。

IATPD对淋巴细胞膜酪氨酸蛋白激酶的抑制作用

以人工合成的多肽PGAT为底物,鉴定了人外周血淋巴细胞膜TPK。首次发现IATPD对该酶活性有较强的抑制作用,其IC_(50)约为300μmol/L;改变其底物浓度,测定酶活性并应用Lineweaver-Burk双倒数作图法作图,结果表明,IATPD对该酶活性的抑制作用与ATP呈竞争性,与PGAT呈非竞争性。

糖尿病大鼠血蛋白激酶C和骨骼肌Bax/B细胞淋巴瘤-2、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3变化及其意义

目的:探讨糖尿病大鼠血蛋白激酶C(PKC)和骨骼肌Bax/Bcl-2、Caspase3变化及意义。方法:建立糖尿病大鼠模型,16只SD大鼠随机分成正常对照组和糖尿病组,采用ELISA法测定血PKC值,取后肢腓肠肌HE染色后行组织学观察,并用免疫组化方法测定Bax、Bcl2和Caspase3值。结果:糖尿病组大鼠骨骼肌普遍萎缩,肌纤维萎缩变细,纤维变性、水肿,部分区域坏死,纤维断裂,肌丝走行紊乱,核固缩,横纹模糊消失,间质脂肪组织略增生。糖尿病组和正常对照组大鼠的血PKC值分别为110.60±5.94ng·mL-1和74.72±7.19ng·mL-1,骨骼肌Bax值分别为26311±3698.30μm2和16764±6116.10μm2,Bcl2值分别为18573±8529.90μm2和35533±485.52μm2,Caspase3值为32419±3201.50μm2和12123±1919.60μm2。糖尿病大鼠血中PKC值较正常对照组显著升高,糖尿病组肌肉中Caspase3及Bax值显著升高,而Bcl2值明显下降,Bax/Bcl2值升高,两组间比较均有显著差异。结论:氧化应激中的PKC途径及细胞凋亡通路共同参与了糖尿病骨骼肌病变的发生,可能是糖尿病骨骼肌病变的重要发病机制之一。

人血液酪氨酸蛋白激酶的研究(Ⅱ)人外周血淋巴细胞膜酪氨酸蛋白激酶的鉴定与性质

以人工合成的多肽poly(Glu-Ala-Tyr)_(6:3:1)为底物测定了人外周血淋巴细胞膜酪氨酸蛋白激酶的活性,并对其性质进行了初步研究。发现Mg^(2+)对该酶的激活远远大于Mn^(2+),且Mg^(2+)最大激活浓度为50mmol/L左右。在5mg/ml的多肽底物浓度下,TPK达到最大反应速度,其Km值约为2.5mg/ml;对ATP、TPK的Km值大约为19μmol/L。多肽底物磷酸化氨基酸分析表明,仅有酪氨酸残基被磷酸化。

转化淋巴细胞胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶活性及细胞内源性底物的研究

本文对增殖期的淋巴细胞胰岛素依赖性酪氨酸蛋白激酶活性及内源性废物进行了分析研究。在纯化的健康人淋巴细胞中加入适量的植物血凝素(PHA),经过72h培养即成为转化淋巴细胞(增殖期淋巴细胞)。应用^(32)P参入实验,证实转化淋巴细胞胰岛素受体具有胰岛素依赖性的酪氨酸蛋白激酶活性,与未转化的对照组相比其活性增加约9倍。Scatchard分析表明转化后淋巴细胞膜表面胰岛素受体数增加3.5倍。应用抗酪氨酸磷酸酯抗体,对胰岛素作用前后的转化与未转化淋巴细胞内,酪氨酸残基磷酸化的蛋白进行了鉴定,结果表明:除了95kD受体β亚基自身磷酸化外,45kD蛋白质也明显磷酸化,我们命名它为PP45。我们认为PP45可能是淋巴细胞中胰岛素受体酪氨酸蛋白激酶的主要内源性废物,它的磷酸化是胰岛素信息传递过程级联反应的初始步骤。

内质网应激及蛋白激酶R样内质网激酶/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白/门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12信号通路介导的细胞凋亡在糖尿病肾病发病机制中的作用研究进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病微血管并发症,主要表现为血糖升高、蛋白尿、肾功能下降,也是患者后期肾功能衰竭的主要原因。临床上主要通过控制血压和血糖水平来抑制DN的进展,但效果不佳。现有研究发现,内质网应激及其介导的细胞凋亡是引起DN的重要原因,蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)/门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)信号通路在其中发挥关键性作用,其中PERK是内质网应激启动的标志,CHOP是内质网应激由抗凋亡作用开始转为促凋亡作用的重要分子,caspase-12是内质网应激介导细胞凋亡的最终执行分子。本文就内质网应激及相关信号通路介导的细胞凋亡在DN发病机制中的作用进行综述。

急性淋巴细胞白血病患儿化疗前后血清同型半胱氨酸和肿瘤特异性生长因子的测定与意义

目的:分析儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中血浆同型半胱氨酸(p-Hcy),血清超敏C反应蛋白(hs-CRP),血清乳酸脱氢酶(LDH)及肿瘤特异性生长因子(TSGF)水平的测定及临床意义,探讨其在临床中的利用价值。方法:应用循环酶法、免疫射散法、全自动生化分析仪检测和生化法测定82例急性淋巴细胞白血病(ALLgroup)化疗前、缓解后以及同期的46例健康儿童(CONgroup)血液中p-Hcy、hs-CRP、LDH和TSGF水平。结果:儿童急性淋巴细胞白血病初治时p-Hcy、hs-CRP、LDH和TSGF水平显著高于健康对照组(P<0.01),完全缓解后p-Hcy、hs-CRP、LDH和TSGF水平显著低于初治时水平(P<0.05),ALL患儿化疗前后p-Hcy与TSGF成正相关(r=0.723,P<0.05),p-Hcy与LDH成正相关(r=0.818,P<0.01),p-Hcy与hs-CRP成正相关(r=0.822,P<0.01)。结论:p-Hcy、LDH、hs-CRP及TSGF对于儿童急性白血病、病情监测、化疗疗效和预后判断有一定作用,有望成为ALL诊断及治疗的联合应用指标。

重症肌无力合并胸腺病变患者血清乙酰胆碱受体抗体、肌联蛋白抗体和肌肉特异性酪氨酸激酶抗体的检测意义

目的探究对重症肌无力合并胸腺病变的患者血清中乙酰胆碱受体(acetylcholine receptors,AchR)抗体、肌联蛋白(Titin)抗体和肌肉特异性酪氨酸激酶(muscle specific tyrosine kinase,MuSK)抗体的检测意义。方法选取我院收治的80例重症肌无力患者,根据是否存在胸腺病变分为胸腺病变组48例和非胸腺病变组32例,另取80例健康个体作为对照组,通过免疫酶联吸附试验对3组成员血清中AchR抗体、Titin抗体和MuSK抗体进行检测并比较。结果重症肌无力患者血清AchR抗体和Titin抗体阳性率(76.3%,52.5%)均明显高于对照组(11.3%,5.0%)(P<0.05);重症肌无力组及对照组患者血清MuSK抗体阳性率均为0,但前者血清中MuSK抗体水平明显高于后者(P<0.05);AchR,Titin两种抗体联合检测可明显提高检测重症肌无力的灵敏度;AchR和Titin抗体在胸腺病变组中的阳性率明显高于非胸腺病变组(P<0.05);全身型重症肌无力患者的血清AchR抗体和Titin抗体阳性率明显高于眼肌型(P<0.05)。结论 AchR抗体和Titin抗体的阳性率与重症肌无力患者的病情相关,病情严重或合并胸腺病变可明显提高两者的阳性率,此外两者联合检测可提高诊断的灵敏度。而MuSK抗体在我国重症肌无力患者中的阳性率较低。

肌肉特异性酪氨酸激酶抗体阳性重症肌无力的近期研究

重症肌无力（myasthenia gravis．MG）是骨骼肌的自身免疫性疾病．主要是由神经肌肉接头处的乙酰胆碱受体（AChR）的数量缺失和功能异常所引起。自从在血清学反应阴性的MG患者（seronegative MG，SNMG）中发现肌肉特异性酪氨酸激酶抗体（MUSK—Ab），

肌肉特异性酪氨酸激酶抗体与重症肌无力

重症肌无力(MG)是一种主要累及神经肌肉接头突触后膜乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,AChR)的自身免疫性疾病。近来研究发现肌肉特异性酪氨酸激酶(muscle-specific kinase,MuSK)抗体(MuSK Ab)与MG发病机制有关。MuSK Ab阳性MG临床表现和治疗与血清AChR(+)MG存在明显不同。MuSK Ab阳性MG病情重,容易引起漏诊和误诊。

肌肉特异性酪氨酸激酶在重症肌无力中的作用(综述)

约有20%重症肌无力(MG)患者血清中检测不到乙酰胆碱受体抗体(AChRAb),称之为“血清反应阴性MG”(seronegativeMG,SNMG)。有报道71%的SNMG患者血清中存在肌肉特异性酪氨酸激酶(MuSK)抗体(MuSKAb),MuSKAb阳性SNMG患者的流行病学特征、临床特点和治疗效果与由AChRAb介导的MG(seropositiveMG,SPMG)有所不同,存在较大争议。

乙酰胆碱受体抗体及肌肉特异性受体酪氨酸激酶抗体均阳性的重症肌无力1例报告

重症肌无力（MG）是一种累及神经-肌肉接头处乙酰胆碱受体（AchR）的自身免疫性疾病。约80%的MG患者血清AchR-Ab（＋）,但约20%的患者为阴性,称为血清阴性MG（SNMG）[1]。目前国内将肌肉特异性受体酪氨酸激酶抗体（Mu SK-Ab）阳性的MG归类于SNMG,乙酰胆碱受体抗体（AchR-Ab）及Mu SK-Ab同时阳性的重症肌无力尚无报道。

细胞质内微环境直接影响FGFR1酪氨酸激酶介导的SNT1细胞特异性磷酸化(英文)

成纤维细胞生长因子受体(FGFR)介导的SNT1(亦称为FRS2)底物磷酸化具有宿主细胞以及受体特异性。为探明这种宿主细胞特异性的决定因素,我们构建了1个FGFR2Ⅲb/R1嵌合受体。该嵌合受体具有1个FGFR2Ⅲb的胞外片段及1个FGFR1蛋白质酪氨酸激酶片断。当表达在3T3细胞(内源性受体为FGFR1并能强烈响应FGFR1的信号)以及DTE-R1/100细胞时,该嵌合受体能即刻诱导SNT1磷酸化。DTE-R1/100细胞为经长期培养的带有外源性FGFR1的非恶性前列腺肿瘤上皮细胞(DTE)并已获得未转化DTE细胞所不具备的FGFR1信号响应性。与此相反,当表达在非转化DTE细胞或未经长期培养的FGFR1转化细胞(DTE-R1)时,FGFR2Ⅲb/R1嵌合受体则无法诱导SNT1磷酸化。我们曾报导DTE细胞对FGFR1介导的SNT1磷酸化活力及其刺激细胞生长信号的响应性是一种获得性的性质,这种性质的获得与细胞恶化是紧密联系在一起的。在此我们进一步证明FGFR介导的SNT1磷酸化具有宿主细胞特异性。这些结果表明细胞内围绕着激酶的微环境而不是细胞外环境决定了SNT1是否可为FGFR1所磷酸化。而且,长期受外源性FGFR1刺激诱发DTE细胞内微环境的变化,从而使表达在DTE细胞里的FGFR1激酶可强烈地磷酸化SNT1。

血清癌胚抗原联合神经元特异性烯醇化酶可预测晚期肺腺癌患者酪氨酸激酶抑制剂治疗的疗效

目的:探讨血清癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)对晚期肺腺癌患者表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)疗效的评估价值。方法:回顾性分析2013年1月至2016年4月四川省遂宁市中心医院采取EGFR-TKIs治疗的EGFR突变阳性ⅢB期、Ⅳ期肺腺癌患者103例的临床资料,依据治疗后24个月的生存情况将患者分为存活组(36例)和死亡组(67例)。比较2组患者治疗前、后的血清CEA、NSE水平及其降低值;采用Logistic多因素分析血清CEA、NSE降低值对晚期肺腺癌患者EGFR-TKIs疗效的预测。结果:随访24个月,存活组治疗前、后的血清CEA、NSE降低值大于死亡组(P<0.05);Logistic多因素分析显示,治疗前ECOG体力状态评分升高、TNM分期增高、组织学低分化是晚期肺腺癌患者EGFR-TKIs治疗不良预后的独立危险因素(P均<0.05);ROC曲线分析显示,血清CEA降低值联合NSE降低值预测晚期肺腺癌患者24个月生存的灵敏度为91.62%,特异度为78.77%,ROC曲线下面积AUC值为0.916。结论:血清CEA和NSE可联合预测晚期肺腺癌患者EGFR-TKIs疗效,其水平降低越显著,越有利于患者生存。

丝／精氨酸蛋白特异性激酶生理功能及其在肿瘤中的研究进展

丝氨酸／精氨酸（serine／arginine，SR或RS）蛋白激酶是一类能与SR或RS二肽模体特异性结合的酶，而SR蛋白是细胞生长发育过程中的关键因子。

血清乙酰胆碱受体抗体、肌肉特异性酪氨酸激酶抗体浓度与重症肌无力患者临床分型和疾病转归的关系

目的探索血清乙酰胆碱受体抗体(AchR-Ab)、肌肉特异性酪氨酸激酶抗体(MuSK-Ab)浓度与重症肌无力(MG)患者临床分型和疾病转归的关系。方法收集2014年5月-2015年5月在本院神经内科住院治疗的MG患者43例(MG组)和同期在本院健康体检的正常人43例(N组),采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清AChR-Ab、MuSK-Ab浓度,并计算MG组患者治疗前后的肌无力绝对评分,分析不同临床分型的MG患者治疗前的血清AChR-Ab、MuSK-Ab浓度,并对治疗前后肌无力绝对评分和治疗前后血清AChR-Ab、MuSK-Ab浓度变化进行相关性分析。结果 (1)治疗前,MG组和N组的血清AChR-Ab浓度分别为0.786±0.237ng·mL^(-1)、0.298±0.113ng·mL^(-1),差异有统计学意义(均P<0.05),血清Mu SK-Ab浓度分别为0.322±0.128ng·mL^(-1)、0.281±0.123ng·mL^(-1),差异无统计学意义(均P>0.05);(2)血清AChR-Ab和MuSK-Ab在不同临床分型MG患者中的浓度均没有明显差异(均P>0.05);(3)治疗后肌力绝对评分和血清AChR-Ab浓度均显著下降(均P<0.05),而血清MuSK-Ab浓度在治疗前后没有显著变化(P>0.05),并且治疗后的血清AChR-Ab浓度和治疗后的肌无力绝对评分呈正相关(r=0.797,P<0.05)。结论血清AChR-Ab和MuSK-Ab的浓度与MG的临床分型无明显相关性,血清AChR-Ab对疾病的转归有一定的预示作用。

酪氨酸蛋白激酶活性与2型糖尿病关系的研究

目的:探讨酪氨酸蛋白激酶(TPK) 的活性与2 型糖尿病之间的关系,并对影响TPK 活性的因素作初步研究。方法:以Poly(Glu,Tyr)4∶1 为底物,用放射性核素磷(32P)标记的方法来测定正常人及2型糖尿病患者淋巴细胞膜上TPK 的活性。结果:2 型糖尿病患者TPK活性有显著下降,Mn2 + 、Mg2 + 和ATP的加入均能提高正常人TPK活性。结论:2