小儿颅内胶质瘤组织中B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)蛋白和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)检测的临床价值及意义

目的检测小儿颅内胶质瘤组织中B淋巴细胞瘤-2基因(BCL-2)蛋白和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,并分析其临床价值和意义。方法选取96例颅内胶质瘤患儿手术切除标本,采用免疫组织化学染色(SP法)检测胶质瘤组织中BCL-2和GFAP的表达,比较不同临床分期该两个指标表达阳性率的差异;然后根据患儿预后情况分为预后良好组(A组,31例)和预后较差组(B组,65例),比较不同预后情况患儿胶质瘤组织中BCL-2和GFAP的表达,并进一步分析其与患儿预后的相关性。结果星形胶质瘤和胶质母细胞瘤患儿H-SCORE得分显著高于室管膜瘤患儿(P<0.05),而该两组相比差异无统计学意义(P>0.05);Ⅲ~Ⅳ级BCL-2阳性表达率和H-SCORE得分均显著高于Ⅰ~Ⅱ级(P<0.05)。不同组织学分类胶质瘤患儿GFAP表达阳性率无显著差异,但H-SCORE得分则为:胶质母细胞瘤>星形胶质瘤>室管膜瘤患儿,且组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ级GFAP阳性表达率和H-SCORE得分均显著高于Ⅰ~Ⅱ级(P<0.05)。与A组相比,B组BCL-2和GFAP的表达阳性率及H-SCORE得分均显著增高(P<0.05)。结论BCL-2和GFAP的表达与胶质瘤患儿组织学分类、病理分级以及预后情况均密切相关,因此在胶质瘤的发生、分化以及进展的调控方面具有重要作用。

老年前列腺癌患者组织B淋巴细胞瘤-2蛋白、细胞FLICE样抑制蛋白表达水平与临床病理特征及预后的关系

目的研究老年前列腺癌患者组织B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、细胞FLICE样抑制蛋白(cFLIP)表达水平与临床病理特征及预后的关系。方法选取2016年6月至2019年6月庐江县人民医院收治的93例行前列腺癌根治术的老年患者作为研究对象。分别留取其的肿瘤组织、癌旁组织及正常前列腺组织标本,采用免疫组织化学法检测3种组织中Bcl-2、cFLIP蛋白表达水平,结合患者临床病理特征进行分析,采用Kaplan-Meier生存曲线对患者24个月的生存情况进行比较。结果肿瘤组织中Bcl-2、cFLIP阳性表达率分别为73.12%和68.82%,与癌旁组织和正常前列腺组织比较,差异具有统计学意义(P<0.05);肿瘤组织Bcl-2、cFLIP阳性率与患者年龄、术前前列腺特异抗原水平无相关性(P>0.05),但与患者Gleason评分、肿瘤TNM分期,以及淋巴结转移、骨转移相关(P<0.05);前列腺癌组织Bcl-2及cFLIP蛋白阳性表达患者24个月生存率明显低于阴性表达患者(P<0.05)。结论Bcl-2、cFLIP蛋白在老年前列腺癌患者组织中高表达,且与患者临床病理特征和预后相关,可能作为老年前列腺癌的治疗靶点。

甘石青黛膏对大鼠亚急性湿疹模型皮损淋巴细胞和角质形成细胞Bcl-2与Bax蛋白表达变化的影响

目的观察甘石青黛膏对大鼠亚急性湿疹模型皮损淋巴细胞和角质形成细胞B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白与Bax蛋白表达变化的影响,探究中药外治湿疹的分子生物学依据。方法造模前取大鼠正常皮肤组织,制作成石蜡切片备用,造模成功后分为治疗组和模型组,治疗组采用中药甘石青黛膏干预,模型组无干预,检测三组大鼠Bcl-2与Bax蛋白表达情况。结果造模前大鼠Bcl-2与Bax蛋白表达均呈阳性,且Bcl-2/Bax比率接近于1;治疗组Bcl-2蛋白表达呈弱阳性,模型组Bcl-2蛋白表达呈强阳性,两者相比具有显著统计学差异(P<0.001);治疗组Bax蛋白表达呈阳性,模型组Bax蛋白表达呈弱阳性,两者相比具有显著统计学差异(P<0.001);治疗组与模型组Bcl-2/Bax比率相比具有显著统计学差异(P<0.001),后者明显高于前者;治疗组与健康组Bcl-2/Bax比率相比无统计学差(P>0.05)。结论甘石青黛膏具有抑制Bcl-2蛋白表达,促进Bax蛋白表达,使细胞凋亡调控系统趋于平衡的作用。

妇科再造丸含药血清对人子宫肌瘤细胞Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨妇科再造丸(FKW)含药血清对体外培养人子宫肌瘤细胞凋亡相关蛋白Bax和B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达的影响。方法:对人子宫肌瘤细胞进行原代培养、传代并进行鉴定;60只SD雌性大鼠随机均分为空白组(无药血清组),FKW高、中、低剂量组和桂枝茯苓胶囊(GZFL)组,利用各组大鼠制备无药血清和含药血清分别作用于子宫肌瘤细胞72h时,采用WesternBlot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果:培养的细胞经鉴定证实为人子宫肌瘤细胞;与无药血清组比较,FKW含药血清各剂量组均能增加Bax蛋白相对表达量,降低Bcl-2蛋白相对表达量(P<0.05或P<0.01),且作用随剂量的增加而有增强的趋势(P<0.05或P<0.01)。结论:FKW含药血清可影响人子宫肌瘤细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达,这可能是FKW临床应用时缓解子宫肌瘤症状的机制之一。

血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2/Bax与颈动脉粥样硬化斑块破裂所致脑梗死的关系及联合检测价值

目的 探讨血清沉默信息调节蛋白1 (SIRT1)、衰老关键蛋白抗原-5 (Fibulin-5)、B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)/B淋巴细胞瘤基因-2相关X蛋白(Bax)与颈动脉粥样硬化(CAS)斑块破裂所致脑梗死(ACI)的关系及联合检测价值。方法 选取新疆维吾尔自治区人民医院2021年1月至2023年2月CAS斑块破裂所致ACI患者98例作为研究组,另选取同期CAS斑块未破裂患者98例作为对照组,比较两组血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2、Bax水平,分析各血清指标对CAS斑块破裂所致ACI风险的影响及与病情的关系,并评价各血清学指标单独及联合预测CAS斑块破裂所致ACI的价值。结果 研究组血清SIRT1、Bcl-2水平低于对照组,Fibulin-5、Bax水平高于对照组(P<0.05);大面积梗死(MCI)患者血清SIRT1、Bcl-2水平<小面积梗死患者<腔隙性梗死(LI)患者,Fibulin-5、Bax水平>小面积梗死患者> LI患者(P<0.05);重度神经功能缺损患者血清SIRT1、Bcl-2水平<中度神经功能缺损患者<轻度神经功能缺损患者,Fibulin-5、Bax水平>中度神经功能缺损患者>轻度神经功能缺损患者(P<0.05);血清SIRT1、Bcl-2低水平患者CAS斑块破裂所致ACI风险是高水平患者的2.311倍、2.921倍,Fibulin-5、Bax高水平患者CAS斑块破裂所致ACI风险是低水平患者的3.470倍、3.184倍(P<0.05);血清SIRT1、Bcl-2与梗死面积、神经功能缺损程度呈负相关,Fibulin-5、Bax与梗死面积、神经功能缺损程度呈正相关(P<0.05);血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2、Bax预测CAS斑块破裂所致ACI的AUC分别为0.716 (95%CI:0.648~0.778)、0.796 (95%CI:0.733~0.850)、0.728 (95%CI:0.660~0.789)、0.763 (95%CI:0.698~0.821),联合预测CAS斑块破裂所致ACI的AUC为0.909 (95%CI:0.860~0.945),优于各血清指标单独预测。结论 血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2/Bax与CAS斑块破裂所致ACI及其病情程度密切相关,联合预测价值可靠,对临床开展防治工作具有指导意义。

脂毒性应激对Bcl-2蛋白诱导胰岛β细胞凋亡的调节作用

目的探讨脂毒性应激对B淋巴细胞瘤(Bcl)-2蛋白诱导胰岛β细胞凋亡的调节作用。方法利用C57BL/6小鼠构建PUMA-/-小鼠,喂食高脂肪饮食72 h后处死并分离胰岛。分别用棕榈酸酯、蛋白酶体抑制剂MG132处理小鼠胰岛瘤MIN6细胞0、2、4、8、24 h,分别用萝卜硫烷(SFN)、棕榈酸酯、SFN+棕榈酸酯处理小鼠胰岛β细胞0、2、4、8、24 h。以用二甲基亚砜处理相同时间的MIN6细胞和β细胞作为对照。检测细胞蛋白酶体活性,活化转录因子4(ATF4)mRNA、重链结合蛋白(Bip)mRNA、C/EBP同源蛋白(Chop)mRNA、p53上调凋亡调控因子(PUMA)mRNA表达量,Bcl-2、Bcl-XL、Mcl-1和Akt蛋白表达量,同时评估细胞活性。结果与0 h比较,采用棕榈酸酯处理MIN6细胞不同时间的蛋白酶体活性均无明显变化(P>0.05);采用MG132处理MIN6细胞8 h的蛋白酶体活性显著降低(P<0.05);MG132处理MIN6细胞24 h的Ub水平显著升高(P<0.05)。棕榈酸酯组和MG132组处理24 h后,MIN6细胞凋亡数显著高于对照组(P<0.05),棕榈酸酯和MG132处理24 h后,MIN6细胞ATF4 mRNA、Bip mRNA、Chop mRNA、PUMA mRNA表达量高于0 h(P<0.05)。棕榈酸酯和MG132处理24 h后,MIN6细胞Bcl-2、Bcl-XL、Akt蛋白水平显著低于0 h(P<0.05);Mcl-1蛋白水平呈先升后降趋势,棕榈酸处理2 h时Mcl-1蛋白水平最高,MG132处理8 h时Mcl-1水平最高。棕榈酸酯组β细胞凋亡率均显著高于SFN组、SFN+棕榈酸酯组和对照组(P<0.05),SFN组、SFN+棕榈酸酯组及对照组之间β细胞凋亡率差异均无统计学意义(P>0.05)。棕榈酸酯组AFT4蛋白、Chop蛋白、Bip蛋白和PUMA mRNA水平均显著高于对照组(P<0.05);而SFN+棕榈酸酯组与对照组之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论靶向泛素-蛋白酶体系统(UPS)和Bcl-2蛋白表达能有效预防胰岛β细胞凋亡。

PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白对缺氧复氧损伤模型大鼠心肌细胞H9C2心肌线粒体功能的影响

目的探讨蛋白质转导结构域4-铜锌超氧化物歧化酶(PTD4-Cu/ZnSOD)融合蛋白对缺氧/复氧损伤心肌线粒体功能的影响。方法 H9C2大鼠心肌细胞采用厌氧培养箱培养(85%N_2,10%H_2,5%CO_2)制作缺氧复氧损伤模型,之后在缺氧复氧损伤细胞培养液中不加任何处理因素作为HRI组,分别加入10μmol/L Cu/ZnSOD作为Cu/ZnSOD组、10μmol/L PTD4-Cu/ZnSOD作为PTD4-Cu/ZnSOD组,且以正常培养心肌细胞作为正常组。采用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,生化测定心肌细胞线粒体三磷酸腺苷(ATP)酶活性、超氧化物歧化酶活性及丙二醛含量,Western blot检测心肌细胞线粒体B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白、Bax蛋白的表达。结果 HRI组线粒体膜电位显著低于正常组;PTD4-Cu/ZnSOD组线粒体膜电位较正常组较低。各处理组心肌细胞凋亡指数均明显高于正常组(P<0.01);PTD4-Cu/ZnSOD组心肌细胞凋亡指数较HRI组明显降低(P<0.01)。PTD4-Cu/ZnSOD组线粒体ATP酶活性明显高于HRI组,且超氧化物歧化酶活性较高,显著降低丙二醛含量(P<0.01)。HRI组Bcl-2蛋白表达低于正常组,Bax蛋白表达高于正常组(P<0.01);与HRI组比较,PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白能显著增加Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达(P<0.01)。结论 PTD4-Cu/ZnSOD融合蛋白可提高线粒体ATP酶活性,减轻线粒体损伤;提高线粒体SOD活性,减轻自由基对线粒体损伤;提高线粒体膜Bcl-2蛋白表达,降低Bax蛋白表达,从而发挥心肌保护作用。

HIF-1α、Bax联合Bcl-2在脑梗死肺部感染患者中的表达水平及其与红细胞免疫、炎症反应的关系

目的分析缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)联合B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)在脑梗死肺部感染患者中的表达水平及其与红细胞免疫、炎症反应的关系。方法选择2021年6月至2022年7月兵器工业五二一医院收治的脑梗死患者98例作为研究对象,根据是否发生肺部感染分为对照组(无肺部感染)和观察组(有肺部感染),每组49例。比较两组患者HIF-1α、Bax、Bcl-2、红细胞免疫指标[包括红细胞C3b花环率(RBC-C3bRR)、红细胞免疫黏附促进率(RIAER)、红细胞免疫黏附抑制率(RFIR)和红细胞免疫复合物花环率(RBC-ICR)]和炎症反应指标[包括白细胞计数(WBC)、降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和血清淀粉样蛋白A(SAA)]水平;应用Pearson相关分析HIF-1α、Bax、Bcl-2水平与红细胞免疫和炎症反应指标水平的相关性。结果观察组患者HIF-1α、Bax、RFIR、RBC-ICR、WBC、PCT、CRP、SAA水平均高于对照组,Bcl-2、RBC-C3bRR、RIAER水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。HIF-1α和Bax水平与RBC-C3bRR和RIAER水平均呈负相关(P<0.05),与RFIR、RBC-ICR、WBC、PCT、CRP和SAA水平均呈正相关(P<0.05);Bcl-2水平与RBC-C3bRR和RIAER水平均呈正相关(P<0.05),与RFIR、RBC-ICR、WBC、PCT、CRP和SAA水平均呈负相关(P<0.05)。结论合并肺部感染的脑梗死患者HIF-1α、Bax水平均升高,Bcl-2水平降低,且HIF-1α、Bax、Bcl-2水平与红细胞免疫和炎症反应密切相关。

多模态磁共振成像 胶原纤维酸性蛋白及B淋巴细胞瘤-2蛋白诊断新生儿缺氧缺血性脑病的价值

目的 分析多模态磁共振成像(MRI)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)及B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)诊断新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)的价值。方法 选取2021年2月—2022年1月在绍兴第二医院医共体总院诊治的64例HIE患儿为观察组,同期出生无脑损伤的30例新生儿为对照组。两组均给予常规MRI扫描、扩散加权成像(DWI)及动脉自旋标记灌注成像(ASL)扫描,采用反射免疫分析法检测Bcl-2水平,采用酶联免疫吸附法检测GFAP水平。分析多模态MRI参数、GFAP、Bcl-2水平与病情严重程度之间的相关性,分析多模态MRI参数、GFAP、Bcl-2对HIE的诊断价值。结果 对照组T_(1)、表观弥散系数(ADC)、脑血流量(CBF)分别为(1 163.25±57.81)ms、(2.07±0.48)×10^(-3)mm~2/s、(16.36±1.23)ml/(100 g·min),观察组T_(1)、ADC、CBF分别为(1 432.96±64.82)ms、(1.19±0.10)×10^(-3)mm~2/s、(27.08±2.94)ml/(100 g·min)。与对照组相比,观察组T_(1)、CBF升高,ADC降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。轻度、中度、重度HIE患儿T_(1)、CBF、ADC、GFAP、Bcl-2水平比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HIE患儿T_(1)、CBF、GFAP、Bcl-2与疾病严重程度均呈正相关(r=0.476,0.473,0.512,0.464,均P<0.05);ADC与疾病严重程度呈负相关(r=-0.483,P<0.05)。T_(1)与GFAP、Bcl-2均呈正相关(r=0.442、0.436,均P<0.05);ADC与GFAP、Bcl-2均呈负相关(r=-0.479、-0.525,均P<0.05);CBF与GFAP、Bcl-2均呈正相关(r=0.497、0.513,均P<0.05)。与多模态MRI、GFAP、Bcl-2单独检测相比,联合检测诊断HIE的灵敏度最高。结论 多模态MRI、GFAP、Bcl-2水平与HIE患儿病情严重程度密切相关,三者联合检测可有效提高HIE的临床诊断准确性。

MAPK通路在红托竹荪多糖诱导人胃癌MKN-45细胞凋亡中的作用机制研究

目的:研究红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖与凋亡的影响,并基于丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号通路探讨其可能的作用机制。方法:体外培养MKN-45细胞,分为对照组,红托竹荪多糖低、中及高剂量组,采用终浓度分别为0、4、6及8 mg/mL的红托竹荪多糖作用于细胞48 h后,采用细胞计数法检测红托竹荪多糖对人胃癌MKN-45细胞增殖的影响;采用倒置显微镜观察不同浓度的红托竹荪多糖作用于人胃癌MKN-45细胞48 h后细胞形态学的变化。设立实验组的红托竹荪多糖终浓度为8 mg/mL,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶双染色流式细胞技术检测细胞的凋亡率;采用流式细胞术检测细胞周期分布;采用蛋白质印迹法检测红托竹荪多糖作用胃癌细胞后p38蛋白激酶(p38)、磷酸化p38蛋白激酶(p-p38)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)、C-JUN氨基末端激酶(JNK)、磷酸化C-JUN氨基末端激酶(p-JNK)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)和活化的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白的表达,即与3-磷酸甘油醛脱氢酶(GADPH)灰度值比值。结果:作用48 h后,不同浓度的红托竹荪多糖(4、6及8 mg/mL)对人胃癌MKN-45细胞增殖的抑制率分别为(8.27±5.99)%、(21.83±5.77)%和(56.95±5.21)%;在检测的浓度范围下,随着浓度的升高,红托竹荪多糖对MKN-45细胞增殖的抑制率逐渐升高。倒置显微镜下显示,经8 mg/mL的红托竹荪多糖作用48 h后,MKN-45细胞密度与对照组相比明显减少。流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,实验组人胃癌MKN-45细胞凋亡率显著升高(P<0.05);细胞周期结果显示,实验组G_(1)期细胞比例明显减少(P<0.05),G_(2)期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,与对照组相比,实验组MKN-45细胞中cleaved Caspase-3的表达有升高趋势(P<0.05),Bcl-2的表达有降低趋势(P<0.05),p-P38/P38比值、p-ERK/ERK比值与p-JNK/JNK比值均低于对照组(P<0.05),上述差异均有统计学意义。结论:红托竹荪多糖在体外能抑制人胃癌MKN-45细胞增殖并诱导细胞凋亡,使肿瘤细胞阻滞在G_(2)/M期,其作用可能通过调控MAPK信号通路实现。

乙酰辅酶A合成酶2低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性观察

目的观察乙酰辅酶A合成酶2(ACSS2)低表达人胃癌细胞株MGC80-3的顺铂敏感性,并进一步探讨其可能作用机制。方法 采用Western blotting法检测人胃癌细胞株MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87以及正常胃黏膜上皮细胞系RGM-1中ACSS2蛋白。对数生长期MGC80-3细胞分为A、B、C、D组,B及D组分别加入10 μL脂质体Lipofectamine 2000+5 μL siRNA-ACSS2转染, C组加入及A组分别加入50 μL无血清纯RPMI1640培养基+5 μL 阴性对照(NC);A组、B组均培养72 h,C组培养48 h时加入5 μg/mL的顺铂(DDP),D组转染48 h时加入5 μg/mL的DDP。培养24 h时,CCK8法检测各组细胞增殖活力,培养48、72 h时流式细胞分析术测算各组细胞早晚期凋亡率,Western blotting法检测各组细胞ACSS2、p65、p-p65、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤-特大型蛋白(Bcl-xL)、凋亡蛋白Bcl-2相关的X蛋白(Bax)。结果 MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87及RGM-1细胞ACSS2蛋白相对表达量分别为0.80± 0.03 、0.62±0.04、0.60±0.04、0.72±0.05、0.41±0.04。与RGM-1细胞比较,MGC80-3、AGS、SGC-7901、NCI-N87细胞ACSS2相对表达量升高( P 均<0.01)。A、B、C、D组细胞增殖活力分别为98.67%±4.89%、92.67%±7.86%、62.67%± 4.05%、34.67%±7.61%,A组与B组相比无明显差异( P >0.05);与A组比较,C组细胞增殖活力下降( P < 0.001 );与B、C组比较,D组细胞增殖活力均下降( P 均< 0.001 )。A、B、C、D组早期细胞凋亡率分别为1.06%±0.02%、1.13%±0.08%、7.62%±0.55%、14.33%±0.21%,晚期细胞凋亡率分别为8.01%± 0.05%、8.13%±0.06%、10.81%±0.43%、15.98±0.18%。与A组比较,C、D组细胞早、晚期凋亡率均升高( P 均<0.05);与B组比较,D组早、晚期凋亡率均升高( P 均<0.05);与C组比较,D组细胞早、晚期凋亡率均升高( P 均< 0.05 )。与A组比较,C组p-p65、Bax蛋白相对表达量升高,Bcl-2、Bcl-xL相对表达量降低( P 均<0.05);与B组比较,D组细胞p65、p-p65、Bcl-2、Bcl-xL相对表达量均降低、Bax相对表达量升高( P 均<0.05)。结论 ACSS2低表达的MGC80-3细胞DDP敏感性升高。ACSS2可能通过调控NF-κB信号通路及Bcl-2、Bcl-xL、Bax蛋白的表达提高MGC80-3细胞的DDP敏感性。

贝伐珠单抗对复发性卵巢癌Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达情况及临床治疗效果的影响

目的观察贝伐珠单抗治疗复发性卵巢癌效果及B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达情况。方法选取2014年2月至2017年10月148例复发性卵巢癌患者,按照奇偶法,将纳入患者分为观察组和对照组(每组74例)。观察组采用贝伐珠单抗联合常规化疗方法、对照组采用常规化疗方法。观察和比较两组患者治疗前后实体瘤大小、血清糖类癌胚抗原125(CA125)、Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达和不良事件及分级。结果按照实体瘤标准,观察组治疗完全缓解率13.51%、总有效率70.27%,均高于对照组的5.41%、52.70%,差异具有统计学意义(P<0.05)。按照CA125标准,观察组治疗完全缓解率17.57%、总有效率85.14%,均高于对照组的9.46%、68.92%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,观察组Bcl-2表达(0.25±0.08)低于对照组的(0.56±0.12),Bax(1.08±0.04)、Caspase-3蛋白表达(1.59±0.10)均高于对照组的(分别为0.58±0.06、1.00±0.07),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组不良反应构成比64.86%,与对照组的62.16%比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论贝伐珠单抗治疗复发性卵巢癌疗效显著、安全可靠,且能有效调节Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达抑制肿瘤发生与发展,丰富了复发性卵巢癌发生与发展机制学说,为临床治疗提供了一定参考依据。

艾盐包热敷对顺产产妇子宫复旧及血清血管内皮因子和B淋巴细胞瘤-2蛋白表达的影响

目的分析艾盐包热敷对顺产产妇子宫复旧及血清血管内皮因子(VEGF)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达的影响,分析其可能的疗效机制。方法选取2018年1月1日-6月30日在该院行阴道顺产的400例产妇为研究对象。按照入组顺序编号,单号设为对照组,双号设为观察组,每组200例。两组产妇均按照顺产临床路径实施分娩前后治疗护理,观察组在对照组治疗护理基础上,再予以产后艾盐包热敷下腹部,两组产妇均连续治疗5 d。出院后随访42 d回院随访。比较两组产妇子宫复旧综合情况(产后初始宫高、完成治疗后宫高、子宫下降指数、子宫复旧不良率、宫缩痛发生率、腹痛率、恶露排出情况)。比较两组产妇分娩后即刻血清VEGF和Bcl-2蛋白表达、血清前列腺素E2(PGE2)水平。结果两组产妇产后初始宫高比较,差异无统计学意义(P>0.05),完成治疗后,两组产妇宫高均较分娩后下降,且观察组低于对照组,观察组子宫下降指数高于对照组(P<0.05);观察组产妇宫缩痛率、腹痛率、子宫复旧不良率均低于对照组产妇,差异均有统计学意义(均P<0.05);观察组恶露持续总时间较对照组短,且观察组恶露持续时间<30 d产妇所占百分比高于对照组,>42 d产妇低于对照组(P<0.05);两组产妇分娩后即刻血清VEGF、PGE2及Bcl-2蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05),完成治疗后,两组产妇血清PGE2及Bcl-2表达均较分娩即刻下降,且观察组低于对照组,血清VEGF均较分娩即刻上升,且观察组高于对照组(P<0.05)。结论艾盐包热敷可有效提升顺产产妇子宫复旧质量、恶露排出效率,降低产妇术后子宫相关并发症发生率,可能与艾盐包热敷可提升产妇血清VEGF水平,降低PGE2、Bcl-2表达,从而降低炎性反应、促进内膜血管新生,提升子宫复旧质量有关。

人参皂苷Rb1通过载脂蛋白M/线粒体凋亡途径对肝癌的影响及机制研究

目的:探究载脂蛋白M(ApoM)/线粒体凋亡在肝癌中的作用,以及人参皂苷Rb1(Rb1)通过ApoM/线粒体凋亡途径对肝癌影响的潜在机制。方法:生物信息学分析筛选ApoM在肝癌中的差异性表达及临床验证;分子对接技术确定Rb1与ApoM的靶向结合,体外培养人肝癌细胞(HepG2),并进行细胞活力检测(CCK-8)筛选Rb1最佳干预浓度,克隆实验用于检测HepG2细胞的增殖情况,划痕实验用于检测HepG2细胞的迁移能力,采用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测ApoM及线粒体凋亡相关基因Bcl2相关X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl2)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)蛋白表达,实时萤光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测ApoM及线粒体凋亡相关基因Bax、Bcl2、Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达水平。结果:生存分析发现ApoM低表达肝癌预后更差,分子对接提示Rb1与ApoM之间具有较高亲和力,克隆及划痕实验提示Rb1有效抑制HepG2细胞增殖,Western Blotting及RT-qPCR验证Rb1可以干预线粒体凋亡相关基因蛋白和mRNA表达。结论:揭示了ApoM/线粒体凋亡在肝癌中发挥重要作用,人参皂苷Rb1可能通过ApoM/线粒体凋亡途径影响肝癌的可能潜在机制。

沉默IL-37表达对骨肉瘤细胞的影响及其作用机制研究

目的探讨IL-37对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法定量逆转录PCR(RT-qPCR)检测人正常成骨细胞(hFOB1.19)和骨肉瘤细胞(U2OS、MG63、Saos-2)中IL-37 mRNA的表达情况;设计沉默IL-37的小干扰RNA(siRNA)序列转染骨肉瘤细胞系,将转染干扰序列siIL-37沉默IL-37表达的细胞作为siIL-37组,转染阴性对照序列作为阴性对照组(siNC组),检测沉默IL-37后骨肉瘤细胞IL-37 mRNA的表达。采用CCK-8法、Transwell法检测沉默IL-37表达对骨肉瘤细胞增殖、侵袭和迁移的影响;流式细胞术检测沉默IL-37表达对骨肉瘤细胞凋亡的影响;蛋白免疫印迹法检测沉默IL-37表达对骨肉瘤细胞中B淋巴细胞瘤(BCL)关联X蛋白(BAX)/BCL-2和Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白表达的影响。结果IL-37 mRNA在U2OS、MG63和Saos-2细胞中均高于其在hFOB1.19细胞中的表达(P均<0.05)。siIL-37组中的IL-37 mRNA相对表达量均低于siNC组(P均<0.05)。与siNC组比较,siIL-37组的细胞增殖比例下降,细胞凋亡率升高,迁移和侵袭细胞数量增多,BAX表达上调而BCL-2表达下调,Wnt/β-catenin信号通路中的关键蛋白c-Myc、β-catenin、转录增强因子1、细胞周期蛋白D1和基质金属蛋白酶-7表达均下调(P均<0.05)。结论IL-37在骨肉瘤细胞中表达升高,沉默IL-37表达可促进骨肉瘤细胞凋亡,并抑制其增殖、迁移和侵袭。IL-37可能通过BAX/BCL-2和Wnt/β-catenin信号通路调控骨肉瘤的发生发展。

血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平与食管鳞癌患者临床预后的相关性

目的:探讨血清转化生长因子-β1(TGF-β1)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)及食管鳞癌组织异黏蛋白(MTDH)表达水平与食管鳞癌患者临床预后的相关性。方法:以我院于2019年4月至2021年4月收治的食管鳞癌患者88例为研究对象。收集患者临床病理特征及血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平,分析不同病理特征患者血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平的差异。随访2年,按是否死亡将患者分为存活组、死亡组,比较两组患者血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平。经Spearson相关分析,分析血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平与临床预后的相关性。经受试者工作曲线(ROC)评估血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平预测食管鳞癌患者预后的价值。结果:Ⅲ+Ⅳ期食管鳞癌患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于Ⅰ+Ⅱ期患者;低分化食管鳞癌患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于中高分化患者;存在淋巴结转移食管鳞癌患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于无淋巴结转移患者(P<0.05)。死亡组患者TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平高于存活组(P<0.05)。Spearson分析结果显示,血清TGF-β1、Bcl-2及组织MTDH表达水平与TNM分期、分化程度、淋巴结转移呈正相关,r值0.264~0.523不等(P<0.05),与预后呈中高强度正相关,r值依次为0.532、0.478、0.636(P<0.05)。ROC结果显示:TGF-β1、Bcl-2、MTDH表达水平评估食管鳞癌预后预测价值较佳,AUC值依次为0.874、0.793、0.893;以MTDH预测价值最佳,灵敏度、特异度分别为93.70%、78.57%,此时最佳截断值为1.45。结论:食管鳞癌患者血清TGF-β1、Bcl-2及食管鳞癌组织MTDH表达水平与临床病理特征及预后均呈正相关,通过监测TGF-β1、Bcl-2及MTDH表达便于及时了解病情进展,且对预后评估具有较好预测价值。

麦粒灸对环磷酰胺小鼠骨髓细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的 观察麦粒灸对于环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)小鼠骨髓造血功能的影响,从凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)/Bcl-2关联X蛋白(Bel-2 associated X,BAX)探讨麦粒灸对缓解骨髓抑制、减少细胞凋亡的保护机制。方法 选45只SPF级CD1(ICR)小鼠,随机分为空白组、模型组、麦粒灸组,每组15只。模型组、麦粒灸组腹腔注射CTX 80mg/kg,每日一次,连续三天,建立小鼠白细胞减少症模型;空白组腹腔注射0.2 mL生理盐水。在造模前和治疗期间进行4次外周血白细胞计数,治疗结束后取小鼠股骨和骨髓,制备骨髓病理切片观察,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫组化法检测Bcl-2/Bax蛋白表达量。结果 (1)治疗结束后,麦粒灸组小鼠外周血白细胞水平明显高于空白组和模型组(P <0.01),模型组仍低于空白组(P <0.05);(2)骨髓病理切片苏木精—伊红染色可见麦粒灸组骨髓组织损害程度较模型组有所减轻,骨髓有核细胞增加;(3)麦粒灸组细胞凋亡率较模型组明显下降(P <0.01),但仍高于空白组(P <0.01)。(4)麦粒灸组Bcl-2蛋白含量较模型组升高(P <0.01),Bax蛋白含量较模型组降低(P <0.01)。结论 麦粒灸可升高CTX小鼠外周血白细胞数,缓解骨髓组织的损害程度,通过提高凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax值,降低骨髓细胞凋亡率,保护骨髓造血功能,缓解骨髓抑制。

子宫内膜异位症患者内膜组织中Livin胱氨酸蛋白酶激活剂B淋巴细胞瘤-2蛋白的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜异位症患者内膜组织中Livin蛋白、第2个线粒体来源的胱氨酸蛋白酶激活剂(Smac)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达及三者与子宫内膜异位症病情发生发展的相关性。方法选择2016年1月—2018年12月在中宁县中医医院接受手术治疗并经病理检测确诊的60例子宫内膜异位症患者,其中增生期31例、分泌期29例,收集所有患者的在位内膜、异位内膜组织,并选择60例正常内膜组织作为对照组。采用免疫组织化学法(SP法)检测不同内膜组织的Livin、Smac及Bcl-2蛋白的表达情况,并比较Livin、Smac及Bcl-2蛋白在不同病情、不同临床分期之间表达差异及三者之间的相关性。结果Livin、Smac及Bcl-2蛋白在异位内膜细胞、在位内膜细胞及正常内膜细胞组织中的表达差异有统计学意义(P<0.05);Livin、Bcl-2蛋白在在位内膜细胞、正常内膜细胞增生期的表达均明显高于分泌期(P<0.05);Livin、Bcl-2蛋白在异位内膜细胞的增生期与分泌期表达无明显差异(P>0.05);Smac在正常内膜细胞分泌期的表达明显高于增生期,差异有统计学意义(P<0.05);异位内膜组织Livin、Smac及Bcl-2蛋白表达与临床分期无明显相关性(P>0.05);在异位内膜组织中,Livin与Smac呈负相关(r=-0.142,P=0.011);Livin与Bcl-2呈正相关(r=0.479,P=0.001);Bcl-2与Smac呈负相关(r=-237,P=0.023)。结论子宫内膜异位症患者内膜组织中Livin、Smac、Bcl-2蛋白的异常表达,使得异位内膜细胞增生及抗凋亡能力加强,三者协调共同作用导致了疾病的发生发展。

B淋巴细胞瘤-2蛋白多位点磷酸化在大鼠脊髓损伤后细胞自噬中的表达研究

目的探讨大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后细胞自噬的变化及其与B淋巴细胞瘤-2(Bcell lymphoma-2,Bcl-2)蛋白多位点磷酸化的关系。方法取40只8周龄雄性SD大鼠,采用改良Allen法制备SCI模型;将造模成功的36只大鼠随机分为SCI组、自噬抑制剂组、自噬促进剂组,每组12只。另取12只大鼠仅切除椎板、不损伤脊髓,作为假手术组。造模结束后,自噬抑制剂组及自噬促进剂组分别于脊髓鞘内注射20μL600 nmol/L 3-甲基腺嘌呤、25 nmol/L雷帕霉素,假手术组及SCI组仅注射20μL生理盐水;每天1次,连续4周。造模后1 d及1、2、4周,采用BBB评分法评价各组大鼠后肢运动功能。末次注射后24 h处死各组大鼠并取脊髓组织,ELISA法检测脊髓组织中过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性及TNF-α、IL-1β水平;HE染色观察脊髓组织形态学变化;透射电镜观察脊髓组织中线粒体超微结构变化;免疫荧光染色检测自噬相关蛋白(Beclin1)、微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)蛋白表达;TUNEL染色观察脊髓组织神经细胞凋亡;免疫荧光双染检测LC3/TUNEL阳性细胞表达;Western blot检测细胞Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、Bcl-2及p-Bcl-2(Ser87)、p-Bcl-2(Ser70)蛋白表达。结果与假手术组相比,SCI组各时间点BBB评分降低,MPO活性、TNF-α、IL-1β水平升高;神经细胞周围间隙增大,细胞肿胀、出现空泡,线粒体中出现自噬小体;Beclin1及LC3蛋白阳性率、神经细胞凋亡率显著升高;LC3、TUNEL阳性细胞增多;Bax、p-Bcl-2(Ser87)、p-Bcl-2(Ser70)蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低;以上指标比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与SCI组相比,自噬抑制剂组各时间点BBB评分降低,MPO活性、TNF-α、IL-1β水平升高;线粒体中出现少量自噬囊泡;Beclin1及LC3蛋白阳性率降低,神经细胞凋亡率显著升高;LC3阳性细胞减少、TUNEL阳性细胞增多;Bax、p-Bcl-2(Ser87)、p-Bcl-2(Ser70)蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低。而自噬促进剂组结果与自噬抑制剂组相反;以上指标组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论大鼠SCI后通过诱导细胞自噬可降低神经细胞凋亡,保护脊髓功能,其机制可能与抑制Bcl-2蛋白多位点磷酸化有关。

上皮性卵巢癌中Gal-3和Bcl-2的表达及临床意义

【目的】检测半乳糖凝集素-3(Gal-3)、B淋巴细胞瘤/白血病蛋白-2(Bcl-2)在上皮性卵巢癌组织中的表达,探究二者与相关临床病理特征及预后关系,检验它们作为预测预后标记物的可能性。【方法】采用免疫组织化学方法,检测98例上皮性卵巢癌组织、10例正常卵巢组织中Gal-3和Bcl-2的表达,分析二者与临床病理特征、预后的关系。【结果】98例上皮性卵巢癌中,Gal-3、Bcl-2均为胞浆表达,Gal-3阳性率为76.5%(75/98),Bcl-2阳性率为51.0%(50/98),正常卵巢上皮不表达Gal-3、Bcl-2蛋白。Gal-3与Bcl-2相关性无统计学意义。Gal-3表达与病理类型、铂敏感性相关(P=0.043,P=0.038),Bcl-2表达与FIGO分期相关(P=0.029)。Cox单因素分析显示上皮性卵巢癌Gal-3表达(P=0.008)、Bcl-2表达(P=0.021)、分期(P<0.001)、铂敏感性(P<0.001)是影响术后生存的因素,而Cox多因素分析中则只有Gal-3表达(P=0.014)、铂敏感性(P=0.021)、分期(P<0.001)才是独立预后因素。【结论】Gal-3、Bcl-2可能参与上皮性卵巢癌的发生发展。Gal-3表达与病理类型、铂敏感性、预后相关,可能成为上皮性卵巢癌预后的独立判定因子。