长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因2对舌鳞癌细胞增殖和侵袭的调控作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因2(DLEU2)在舌鳞癌中的表达及其对癌细胞增殖和侵袭的影响。方法2018年5月至2019年7月收集在邯郸市第三医院进行手术治疗并经病理确诊的22例舌鳞癌组织及对应的癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR检测DLEU2在舌鳞癌组织和细胞中的表达情况。将体外培养的舌鳞癌细胞株CAL27细胞分为对照组(未转染)、空载体组(空载体)和DLEU2组(转染DLEU2),采用实时荧光定量PCR检测细胞中DLEU2表达,MTT法检测细胞增殖,Transwell检测细胞侵袭。结果与癌旁组织(1.00±0.00)相比,舌鳞癌组织中DLEU2表达水平(0.30±0.02)明显降低(P<0.05);3种舌鳞癌SCC-15(0.35±0.04)、SCC-4(0.48±0.04)和CAL-27(0.26±0.03)细胞中DLEU2的表达水平较人正常口腔黏膜HOK细胞(1.00±0.00)均明显降低(P<0.05)。与对照组相比,DLEU2组细胞中DLEU2表达水平明显升高,且细胞增殖和侵袭能力明显减弱(P<0.05)。结论lncRNA DLEU2在舌鳞癌组织和细胞中低表达,上调其表达可抑制舌鳞癌CAL-27细胞增殖和侵袭。

具有特征性免疫表型的KMT2A基因重排婴儿急性淋巴细胞白血病的临床研究

目的 探讨具有特征性免疫表型的赖氨酸甲基转移酶2A(KMT2A)基因重排婴儿急性淋巴细胞白血病的诊断、分子机制及潜在治疗策略。方法 分析1例KMT2A基因重排婴儿急性早B前体淋巴细胞白血病患儿的临床资料及细胞形态学、流式细胞学、细胞遗传学及分子生物学等检查结果。采用“MLL-Rearranged”“KMT2A-Rearranged”“acute lymphoblastic leukemia”“infant”为关键词,对PubMed数据库2020-2023年发表的文献进行文献检索。结果 共检索到文献145篇,最终保留文献27篇。结合病例分析和文献复习,该研究主要从KMT2A基因重排婴儿早B前体淋巴细胞白血病的临床表现、免疫表型、生物学特征角度出发,重点叙述KMT2A基因重排婴儿白血病的发病分子机制以及治疗等研究现状。结论 KMT2A基因重排婴儿白血病的治疗仍具有挑战性,需要不断深入了解潜在的生物学特征,并确定风险分层的预后因素以及更有效的治疗策略。分子靶向治疗和免疫治疗可能是改善结局和降低治疗相关病死率的关键。

血浆外泌体淋巴细胞白血病缺失基因1水平对表皮生长因子受体/间变性淋巴瘤激酶野生型进展期非小细胞肺癌患者免疫治疗反应的预测价值

目的 探讨血浆外泌体淋巴细胞白血病缺失基因1(exoDLEU1)在预测表皮生长因子受体(EGFR)/间变性淋巴瘤激酶(ALK)野生型进展期非小细胞肺癌(NSCLC)患者免疫治疗反应中的临床意义。方法 收集2017年6月至2019年2月于浙江省湖州市第一人民医院接受免疫治疗的91例EGFR/ALK野生型进展期NSCLC患者的血液样本,根据免疫治疗后的反应将其分为反应组(53例)和无反应组(38例)。提取两组治疗前血浆外泌体,通过实时荧光定量PCR检测两组exoDLEU1表达,采用logistic回归分析EGFR/ALK野生型进展期NSCLC患者免疫治疗反应情况的影响因素,绘制受试者操作特征(ROC)曲线评估血浆exoDLEU1水平对患者免疫治疗反应情况的预测价值。结果 透射电镜下可见囊泡具有圆形或椭圆形膜,直径为30~150 nm,原始浓度为6.6×10^(10)个粒子/ml,流式细胞仪检测及蛋白质印迹法结果显示,提取物含有外泌体标志物CD63、CD9、CD81、热休克蛋白70。实时荧光定量PCR结果显示,反应组治疗前血浆exoDLEU1水平低于无反应组,差异有统计学意义(P<0.05)。影响因素分析结果显示,血浆exoDLEU1表达水平是EGFR/ALK野生型进展期NSCLC患者免疫治疗无反应的独立影响因素(OR=6.119,95%CI:2.768~13.526,P<0.05)。ROC曲线分析显示,血浆exoDLEU1表达水平预测EGFR/ALK野生型进展期NSCLC患者免疫治疗反应情况的曲线下面积为0.900 (P<0.05)。结论 EGFR/ALK野生型进展期NSCLC患者免疫治疗前的血浆exoDLEU1水平可作为预测其治疗反应的指标,有助于在临床中筛选出免疫治疗更易获益的患者。

长链非编码RNA淋巴细胞白血病缺失基因1在食管鳞癌中的表达及其对细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的分析长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)淋巴细胞白血病缺失基因1(deleted in lymphocytic leukemia 1,DLEU1)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中的表达及意义,并进一步研究DLEU1对ESCC细胞TE-13增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR检测ESCC组织和癌旁组织中DLEU1的表达。通过CCK-8、划痕试验和Transwell侵袭试验分析DLEU1表达对TE-13增殖、迁移和侵袭的影响。结果DLEU1在ESCC癌组织中的表达较癌旁组织明显升高(P<0.05)。DLEU1的表达与淋巴结转移和TNM分期相关(P<0.05),而与患者的年龄、性别、分化程度和浸润深度均无关(P>0.05)。生存分析示,DLEU1高表达ESCC患者的生存时间较低表达患者明显缩短(P<0.05)。干扰DLEU1表达后TE-13的增殖、迁移和侵袭能力显著受抑。结论DLEU1在ESCC中表达上调,DLEU1的高表达提示预后不良,DLEU1可能对ESCC细胞TE-13的增殖、迁移和侵袭具有调节作用,DLEU1有可能成为ESCC治疗的潜在靶点。

儿童急性淋巴细胞白血病e2a-pbx1融合基因的表达水平与临床特点、早期治疗反应的相关性

为了探讨急性淋巴细胞白血病儿童初诊的e2a-pbx1融合基因表达水平与患儿临床特点和早期治疗反应的关系,采用实时定量聚合酶链反应定量检测45例患儿初诊e2a-pbx1表达水平和23例诱导缓解治疗第33天时微小残留病(minimal residual disease,MRD)水平;分析初诊e2a-pbx1表达水平、MRD水平与临床特点和早期治疗反应的相关性;比较MRD阳性与阴性患儿初诊e2a-pbx1表达水平及临床特点的差异。结果表明:初诊时e2a-pbx1表达水平与初诊时外周血幼稚细胞百分比呈正相关。23例诱导缓解治疗第33天MRD水平与初诊时各临床特点及e2a-pbx1表达水平均缺乏相关性。MRD阳性组初诊时e2a-pbx1表达水平高于阴性组,而患儿年龄显著低于阴性组。外周血白细胞数<25×109/L的患儿,初诊时外周血幼稚细胞百分比显著低于≥25×109/L组,血小板计数显著高于≥25×109/L组。结论:初诊时e2a-pbx1表达水平可以提示患儿初诊时的肿瘤负荷。MRD阳性患儿初诊时e2a-pbx1表达水平高,年龄小。初诊肿瘤负荷高的患儿,外周血血小板数低。

慢性淋巴细胞白血病bcl-2基因表达与重排的研究(英文)

人类恶性肿瘤常伴有非随机性染色体异常,并由于使调控细胞生长的基因表达失控而在肿瘤的发生中发挥十分关键的作用。bcl-2基因由于t(14,18)染色体易位而激活在低恶度的非霍奇金淋巴瘤的发生和演变中的作用已举世公认。类似的重排和非重排引起的bcl-2过度表达也见于慢性淋巴细胞白血病。我们应用免疫组化染色和聚合酶链反应检测了11例慢性淋巴细胞白血病bcl-2基因表达和重排,结果发现所有病例均高度表达Bcl-2蛋白,1例有t(14,18)(q32,q21)染色体易位。结论提示慢性淋巴细胞白血病普遍存在bcl-2基因高表达,bcl-2基因在慢性淋巴细胞白血病的发生和发展中发挥着十分重要的作用。

BIOMED-2引物系统检测T淋巴母细胞性淋巴瘤/急性淋巴细胞白血病中Ig/TCR基因重排

目的探讨BIOMED-2引物系统检测T淋巴母细胞性淋巴瘤(T lymphoblastic lymphoma,T-LBL)/急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患者免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)/T细胞受体基因(T-cell receptor,TCR)重排的敏感性,分析Ig/TCR基因重排方式。方法采用BIOMED-2引物系统扩增35例T-LBL/ALL中Ig/TCR重排基因,核酸分子异源双链凝胶电泳分析基因重排结果。结果 35例T-LBL/ALL中16例检测出TCR基因重排,检出率为45.7%,其中TCRβ单重排6例(37.5%),TCRγ单重排4例(25.0%),TCRβ和TCRγ双重排3例(18.8%),TCRδ单重排2例(12.5%),TCRγ和TCRδ双重排1例(6.3%)。4例患者同时检测出Ig和TCR基因重排,Ig基因检出率为11.4%。28例T-LBL中11例检测出TCR基因重排(39.3%),7例T-ALL中6例检测出TCR基因重排(85.7%)。结论利用BIOMED-2引物系统可检测出部分T-LBL患者的Ig/TCR基因重排,是一种辅助诊断工具。

血管内皮生长因子与Bcl-2基因在急性淋巴细胞白血病的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和抗凋亡基因Bcl-2在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的表达与临床危险分级和早期治疗反应及其预后的关系。方法采用S-P免疫组织化学方法,检测32例ALL骨髓细胞VEGF和Bcl-2基因的表达状况,比较不同危险分级及不同的早期治疗反应的ALL患者之间的表达差别。选择同期住院的非白血病患者15例正常骨髓细胞作为对照组。结果VEGF、Bcl-2在ALL患者中表达均明显高于对照组(t=7.4917,3.2558Pa<0.01;二者呈正相关(r=0.457P<0.01)。VEGF、Bcl-2在高危组(HR)、中危组(MR)、标危组(SR)中的表达化疗前后均有显著性差异(F=11.570,4.558,4.574,3.013Pa<0.05);治疗反应好与反应差化疗前、后组间比较均有显著性差异(t=1.957,2.798,3.565,2.375Pa<0.05);化疗前后组内比较,反应好组有显著性差异(t=1.8038,1.7309Pa<0.05),反应差组均无显著性差异(t=1.3798、1.1875Pa>0.05);二者均低表达者与均高表达者复发率有显著性差异(P<0.05)。结论VEGF和Bcl-2在儿童急性白血病中存在高表达,与临床高危因素分级一致,二者以不同机制参与急性白血病的发生、发展,可作为判断疾病预后的参考指标,联合检测对预后判断优于单一指标检测。

急性T淋巴细胞白血病中SIL-TAL1融合基因与6q缺失的相关性研究

本研究旨在探讨SIL-TAL1融合基因在急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者中的表达情况,分析伴有SILTAL1阳性的T-ALL患者的临床和细胞遗传学特征。运用巢式逆转录聚合酶链反应检测68例T-ALL患者骨髓标本中的SIL-TAL1的表达,以R显带核型分析和微阵列比较基因组杂交检测核型异常。结果表明:在12例T-ALL患者中检测到SIL-TAL1融合基因的表达,儿童检出率明显高于成人(38.5%vs 4.8%,P=0.001),其中50%(6/12)SIL-TAL1阳性患者存在两种转录本;SIL-TAL1阳性组核型异常率为54.5%(6/11),其中4例伴有6号染色体长臂大片段缺失;2例经array-CGH检测到1p32存在约90 kb的缺失,形成SIL-TAL1融合基因;6号染色体长臂共同缺失区域为6q14.1-q16.3,均为杂合性缺失;SIL-TAL1阳性组中位白细胞计数和乳酸脱氢酶水平均高于阴性组(P<0.05)。结论:SIL-TAL1融合基因与6q杂合性缺失有一定相关性(P=0.005),在儿童中SIL-TAL1的检出率明显高于成人,且常伴有白细胞计数升高、乳酸脱氢酶升高等不良预后因素。

中国儿童急性淋巴细胞性白血病染色体6q16.3～21区域候选肿瘤抑制基因的定位与鉴定

为了克隆儿童急性淋巴细胞性白血病(ALL)候选肿瘤抑制基因,首先选取分布于6q16.3～21上的11个多态性微卫星标记,对139例中国儿童ALL标本进行杂合性缺失(LOH)分析.分析显示32%的患者存在至少一个位点的LOH,且高频缺失区位于D6S1709～D6S301之间,大小为2cM.各位点LOH与白细胞总数、病态细胞数有显著性相关(P<0.05),与年龄、性别、形态学分型和免疫学分型无显著相关(P>0.05).进一步在高频缺失区域内,采用定位候选克隆策略、生物信息学技术及RT-PCR技术筛选、鉴定与儿童ALL相关的候选肿瘤抑制基因及其cDNA片段.在D6S1709～D6S301之间筛选到一个在儿童ALL细胞中低表达的EST(GenBank登录号:AA403058),与正常外周血单个核细胞比较,在15例ALL患者中有10例表达下调(P<0.05).采用数字化差异表达分析显示,位于6q16.3～21区域内的AMD1基因、PPIL6基因和WASF1基因在肿瘤组织中的表达丰度要低于正常组织(P<0.05).上述结果为进一步在6q16.3～21区域克隆肿瘤抑制基因提供了线索.

BRD-2基因在急性淋巴细胞白血病中表达的临床研究

目的检测急性淋巴细胞白血病(ALL)患者BRD-2基因的表达情况和预后的关系。方法采用半定量RT-PCR技术检测了78例ALL患者及35名健康对照BRD-2基因的表达。结果 ALL患者BRD-2 mRNA表达阳性率为75.31%,明显高于健康对照组(37.14%,P<0.05)。半定量分析结果示,ALL患者BRD-2 mRNA表达水平为0.912±0.137,也高于健康对照组(0.466±0.209,P<0.05)。结论 BRD-2基因异常表达在ALL的发生、发展中可能起重要作用,检测该基因可作为临床诊断及预后评估指标。

E2A-PBX1融合基因阳性的儿童急性淋巴细胞白血病携带变异型融合转录本

为了研究儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中E2A-PBX1融合基因的表达,采用位于E2A基因不同位置的上游引物与下游PBX1引物,检测了410例儿童ALL,包括362例B细胞ALL和48例T细胞ALL。结果发现:17例患儿携带E2A-PBX1融合基因,检出率4.1%,且全部为B细胞ALL,而且所有阳性病例均表达一种变异型融合转录本,后者是由E2A基因的第13外显子(159bp)被差异剪切形成的。经BLASTn比对分析,这种转录本保持了原来的开放阅读框,但导致53个氨基酸残基的丢失。这53个氨基酸残基位于活化区2,会导致融合蛋白中部分环-螺旋结构以及全部七聚体亮氨酸重复序列的丢失。结论:携带E2A-PBX1融合基因的儿童ALL表达典型和变异型2种融合转录本,后者是由E2A基因第13外显子被差异剪切而形成的,它将导致融合蛋白中53个氨基酸残基及其所构成的部分环-螺旋结构以及全部七聚体亮氨酸重复序列的丢失。

癌基因MDM2mRNA在儿童急性淋巴细胞白血病的过度表达(附32例报告)

应用逆转录聚合酶链反应方法检测 32例急性淋巴细胞白血病 (AL L )患儿的外周血单个核细胞MDM2 m RNA表达 ,以 β- actin为内参照 ,对结果进行半定量。结果 MDM2 m RNA在儿童 AL L 中过度表达率明显高于正常对照组 ;在不良预后组、高白细胞性白血病组中的表达分别高于一般预后组、非高白细胞白血病组。认为 MDM2过度表达在儿童 AL L 发病中起有重要作用 ,并与儿童 AL L 的不良预后。

外周血幼稚淋巴细胞、染色体、E2A/PBX1、TEL/AML1、MLL融合基因联合检测用于儿童淋巴细胞白血病的早期诊断

目的探讨外周血幼稚淋巴细胞、染色体、E2A/PBX1、TEL/AML1、MLL融合基因联合检测用于儿童淋巴细胞白血病早期诊断的临床意义。方法对我院2012年8月至2017年6月门诊及住院儿童外周血涂片初查异常淋巴细胞的病例进行外周血幼稚淋巴细胞形态学检查,对其中高度怀疑急性淋巴细胞白血病的部分患者抽取静脉血检查染色体及TEL/AML1、E2A/PBX1、MLL融合基因。结果 220例病例中有24例外周血涂片可见特殊类型的"白血病型"幼稚淋巴细胞,这种细胞在外周血细胞中比例范围在1%~38%,其中,比例范围在1%~10%的患者有3例,比例范围在11%~20%的患者有11例,比例范围在21%~38%的患者有10例,这24例患者后经骨髓检查验证除比例在1%~10%有2例为非白血病外,其余22例均为急性淋巴细胞白血病。我们对比例在11%~38%的21例患者抽取静脉血检查染色体及TEL/AML1、E2A/PBX1、MLL融合基因,结果显示有2例染色体核型异常、5例TEL/AML1阳性,2例E2A/PBX1阳性、1例MLL阳性。结论外周血幼稚淋巴细胞、染色体、E2A/PBX1、TEL/AML1、MLL融合基因联合检测对儿童淋巴细胞白血病的早期诊断及提示性诊断有一定的临床意义,这种无创的检查模式相比经典有创的骨髓检查来说值得临床推广借鉴。

CDX2基因在成人急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

目的研究尾型同源盒基因2(caudal homeobox gene,CDX2)在急性淋巴细胞白血病(ALL)患者骨髓和外周静脉血单个核细胞中的表达及与治疗反应、预后的关系。方法通过实时荧光定量PCR方法检测32例ALL患者初发及诱导化疗后骨髓和外周静脉血单个核细胞CDX2基因表达,并检测8名健康人外周静脉血单个核细胞作为对照。结果 32例ALL患者血和骨髓单个核细胞均检测到CDX2基因表达,静脉血中位表达水平794.69(189.05~3480.76),骨髓中位表达水平819.70(221.23~3081.42),血和骨髓CDX2基因表达具有正相关(r=0.506,P=0.001)。以第一个四分位数为界划分低表达组和高表达组,32例ALL患者高表达24例(75.0%)。8名健康人外周静脉血单个核细胞CDX2基因中位表达水平417.49(240.60~519.32),与ALL患者静脉血CDX2基因表达差异有统计学意义(P<0.01)。免疫表型CD34阳性与CD34阴性两组CDX2基因高表达有统计学意义(P=0.002)。CDX2基因高低表达组诱导化疗完全缓解率差异无统计学意义(P>0.05)。23例诱导化疗后患者CDX2基因表达低于化疗前(t=6.320,P<0.01)。9例复发患者CDX2基因表达比首次诱导缓解后水平显著升高(t=-6.343,P<0.01)。结论 CDX2基因表达变化反映患者体内白血病细胞负荷,可能是预后不良指标之一,可能有望作为染色体正常核型组ALL微小残留监测指标。

T细胞型急性淋巴细胞白血病患者HOX11L2基因的表达及其临床意义

目的研究T细胞型急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)患者HOX11L2基因的表达及其临床意义。方法采用回顾性分析方法对50例患者性别、年龄、白细胞数量、FAB分类(L1,L2 and L3)、分子生物学特点以及生存时间进行分析,观察HOX11L2基因表达与临床特点及预后关系。结果50例T细胞型急性淋巴细胞白血病患者中,表达HOX11L2基因患者为12例(24%),其中男性7例(58.3%),女性5例(41.7%),HOX11L2基因表达者在男女性别之间的比较,差异无统计学意义(χ^2=0.119,P=0.730)。表达HOX11L2基因患者年龄在5~10岁间居多,表达率为58.3%,与其它年龄组之间的比较,差异有统计学意义(χ^2=11.577,P=0.018)。HOX11L2基因表达患者中白细胞计数≤50×10^9/L的患者10例(83.3%),白细胞计数>50×10^9/L的患者2例(16.7%),两组比较差异有统计学意义(χ^2=5.469,P=0.019)。FAB分类中,有75%的HOX11L2基因表达患者为L1型,与L2和L3组相比较,差异有统计学意义(χ^2=8.766,P=0.008)。其中34例获得随访资料的患者,HOX11L2基因表达组比非表达组生存时间短(中位生存时间分别为8.0个月和11.0个月),两组差异具有统计学意义(P<0.05)。结论研究结果表明HOX11L2基因主要表达于T-ALL患者,且以L1型儿童T-ALL为主,HOX11L2基因表达者预后不良,生存时间短。临床上通过HOX11L2基因检测结果与常规细胞形态学、遗传学、荧光原位杂交等技术检测结果相结合,将对急性淋巴细胞白血病的鉴别诊断、分型、预后及微小残留病检测等具有十分重要的意义。

急性淋巴细胞白血病IgH和Vδ_2Dδ_3基因重排检测在微小残留病监测中的意义

目的 :探讨急性淋巴细胞白血病 (ALL)IgH和Vδ2 Dδ3基因重排分布频率及定量检测在微小残留病(MRD)监测中的意义。方法 :对初诊ALL患者及ALL完全缓解期 (CR)后不同时期的骨髓标本及脑脊液标本进行IgH和Vδ2 Dδ3基因重排检测及定量计算MRD值。结果 :1 0 2例初诊ALL患者骨髓标本IgH和Vδ2 Dδ3基因重排阳性率分别为 49.0 %和 36 .3 %。诱导缓解期与完全缓解期脑脊液IgH基因重排分别有 7例和 3例 ,Vδ2 Dδ3基因重排分别为 5例和 2例。MRD值 >0 .1 %者 3例 ,复发率为 66 .7%。MRD为 0 .0 0 2 %～ 0 .1 %者 6例 ,复发率为 1 7.0 % ;MRD <0 .0 0 2 %者 9例 ,无复发。复发组MRD明显高于未复发组 (P <0 .0 5)。结论 :动态PCR检测ALL患者脑脊液IgH和Vδ2 Dδ3基因重排比细胞学检测更灵敏。IgH和Vδ2 Dδ3基因重排MRD值增高 ,复发危险率增高。MRD定期定性定量监测对指导化疗药物的选择、疗效观察及判断预后有指导意义。

大鼠马钱子碱中毒心肌细胞B-淋巴细胞／白血病2基因和半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶的表达

目的：研究马钱子碱中毒后不同时间段内心肌细胞B-淋巴细胞/白血病2基因（Bcl-2）和半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶（Caspase-3）表达的病理变化.方法：用20只Wistar大鼠为正常对照组,40只Wistar大鼠复制马钱子碱中毒模型,用免疫组织化学技术检测中毒后大鼠心肌细胞Bcl-2与Caspase-3蛋白的表达,并用图像分析对检测结果进行分析.结果：大鼠在马钱子碱中毒低、中剂量后的1～7d不同时间段内,心肌细胞Bcl-2与Caspase-3蛋白表达均高于正常对照组,差异有统计学意义.结论：Bcl-2和Caspase-3参与了马钱子碱中毒的病理生理过程.

乳香诱导急性非淋巴细胞白血病细胞凋亡中对Bcl-2基因调节

研究乳香诱导急性非淋巴细胞白血病细胞凋亡中对Bcl 2基因蛋白的影响。采用DNA片段百分率及免疫组化法检测 30例急性非淋巴细胞白血病细胞及白血病细胞株HL6 0细胞经 10 0 μg/ml乳香处理前、后Bcl 2基因蛋白表达水平。结果 :乳香具有诱导急性非淋巴细胞白血病细胞及HL6 0细胞凋亡[1] 及下调Bcl 2基因蛋白表达水平。结论 :乳香具有诱导急性非淋巴细胞白血病细胞及HL6 0细胞凋亡作用及下调Bcl 2基因蛋白。Bcl 2基因蛋白表达水平下调可能是乳香提取物诱导急性非淋巴细胞白血病细胞凋亡重要机制之一。

HOX11＋急性T淋巴细胞白血病RUNX2基因启动子区域CpG岛甲基化及其表达的研究

本研究检测RUNX2基因在HOX11+急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)细胞株和T-ALL患者骨髓细胞中的甲基化状态和表达水平,探讨其表达水平与启动子区CpG岛甲基化的关系。以3株急性T淋巴细胞白血病细胞株sil-ALL、DND41和RPMI及38例T-ALL患者、29例治疗后完全缓解T-ALL患者骨髓和8例正常人骨髓为样本,采用RT-PCR检测RUNX2 mRNA表达水平,采用重硫酸盐测序法、甲基化DNA免疫沉淀技术和启动子寡核苷酸微阵列芯片分析基因启动子区CpG岛甲基化状态和基因功能。结果表明,高表达HOX11的T-ALL患者样本中会出现RUNX2基因启动子区域的甲基化。RUNX2基因启动子区域在HOX11+T-ALL的甲基化比率为78.9%,明显高于HOX11-ALL(36.8%),两组差异有统计学意义(P<0.01)。RUNX2在HOX11+的细胞株中的表达明显低于HOX11-的细胞株,RUNX2在HOX11+的T-ALL患者中的表达水平(0.581±0.257)明显低于HOX11-的T-ALL患者(0.835±0.317),并且RUNX2 mRNA的相对表达程度与HOX11 mRNA的相对表达程度成负相关(rs=-0.378,P<0.01)。RUNX2基因在T-ALL中的表达水平与其甲基化呈负相关(rs=-0.419,P<0.01)。结论:HOX11能负调控RUNX2的表达,RUNX2基因启动子甲基化是导致其在T-ALL中表达下调或基因沉默的原因,这种HOX11对RUNX2基因的抑制作用有可能就是临床上HOX11高表达T-ALL患者具有更好的无事件生存率和更长的总生存率的原因。RUNX2基因的表达和甲基化水平对判断T-ALL患者的疗效有一定意义,并有望成为一个诊断T-ALL的分子标志。