培养人淋巴细胞分裂阻滞与常规微核测试法的比较研究——Ⅰ.中低剂量γ-射线的效应

本研究用中低剂量γ射线体外照射4个供血员的全血,系统地比较观察了胞质分裂阻滞与常规微核测试法测得的剂量效应关系,结果表明用常规法检测,低剂量γ-射线(0.1,0.3Gy)可诱发平均MNCF的逐渐增加,和对照组相比,至0.3Gy差异显著(p<0.01);而BC法测得的平均MNCF无上升,相反在0.1Gy时明显下降(p<0.05)。在中剂量区(0.7—3.1Gy),用BC法测得的平均MNCF的增加较常规法明显,至3.1Gy时两者差异显著。

民航飞行人员外周血淋巴细胞的胞质分裂阻滞微核率

[目的 ]用胞质分裂阻滞微核法观察宇宙辐射对民用航空飞行人员外周血淋巴细胞微核率的影响。 [方法 ]采集 15 0名健康飞行人员和 32名地面对照人员的外周静脉血 ,在含植物血凝素 (PHA)的RPMI 16 40培养基中 37℃培养38～ 44h ,加入细胞松弛素 B继续培养至 72h。经低渗、固定、涂片、染色 ,每例观察 5 0 0个双核淋巴细胞中的微核。 [结果 ]飞行人员的双核淋巴细胞微核率 (MNF) ( 16 15‰± 0 33‰ )、微核细胞率 (MNCF) ( 13 6 6‰± 0 2 1‰ )与地面人员的MNF( 11 48‰± 0 5 0‰ )、MNCF( 10 42‰± 0 5 7‰ )相比 ,差异有非常显著意义 (P <0 0 1)。飞行人员的MNF、MNCF与年飞行小时呈线性相关 ,MNF、MNCF随飞行人员的工龄、累积飞行小时和年龄呈反相变化。飞行人员经一个月的休假后 ,MNF、MNCF均低于连续飞行组 ,与连续飞行组比较 ,两组间差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,但近一个月未飞行组的MNF、MNCF仍显著高于地面组。在去除年龄、性别等影响因素后 ,没有发现吸烟增加飞行人员的微核。无论飞行组还是地面组 ,男女性别间微核差异无显著性 (P >0 0 5 )。 [结论 ]宇宙辐射可能引起民航飞行人员染色体损伤。胞质分裂阻滞微核法能够灵敏的反映近期内飞行负荷的差别 。

全血及分离淋巴细胞培养胞质分裂阻断法微核检测方法的变异分析

全血及分离淋巴细胞培养胞质分裂阻断法微核检测方法的变异分析北京医科大学卫生毒理学教研室郝卫东淋巴细胞微核的检测是在受检对象和淋巴细胞群中的两次抽样。在应用该方法进行人群监测研究时，人们更多地注意了检测个体间的变异，对方法学本身的变异研究的很少。本文对...

胞浆分裂阻滞微核法对山东“10·21”辐射事故病人受照射剂量的估算

目的对山东“10·21”辐射事故中2例严重受照射者进行淋巴细胞微核(MN)检测,并估算受照射剂量。方法用胞浆分裂阻滞微核(CBMN)法对2例患者(A和B)的外周血和骨髓样本分别进行MN检测。结果2例患者的外周血培养均未见双核淋巴细胞。患者A的骨髓培养所获双核细胞极少,依据双核淋巴细胞多少粗估剂量>20Gy。患者B的骨髓MN率为2.42个/细胞,剂量估计为8.7(8.0～9.4)Gy,与用染色体畸变分析、物理方法及ESR法所估算剂量接近,与临床表现基本一致。结论MN法简便快速,结果准确,是除染色体畸变分析之外又一种可靠的生物剂量计。

胞质分裂阻滞微核法对AT细胞高辐射敏感性的研究

目的 研究源于毛细血管扩张性共济失调症 (ataxia telangiectasia ,AT)患者皮肤的成纤维细胞系AT5BIVA(AT细胞 )的辐射敏感性。方法 本实验以源于正常人皮肤的成纤维细胞系GM0 63 9(GM细胞 )为对照 ,采用胞质分裂阻滞微核法 (Cytokinesis Blockmicronucleusmethod) ,在AT细胞和GM细胞经60 Coγ射线 0、1、2、3、4Gy照射后 ,观察比较AT细胞和GM细胞之间微核率及微核细胞率的差异 ,并分别进行曲线拟合。结果 在 1、2、3、4Gy剂量照射下 ,AT细胞微核率及微核细胞率均明显高于GM细胞 ,其差异有非常显著性 (P <0 0 1) ,并且两者微核率及微核细胞率均与剂量呈正相关 ,均可拟合成剂量效应直线方程y =a +bx ,微核率及微核细胞率直线回归方程斜率AT细胞明显大于GM细胞 (P <0 0 1)。结论 辐射敏感性AT细胞显著高于GM细胞 ,AT患者AT细胞具有高辐射敏感性。

中国仓鼠肺细胞胞质分裂阻滞法微核试验灵敏性初探

作者测试了断裂剂与非整倍剂对细胞松弛素Ｂ诱发中国仓鼠肺细胞（ＣＨＬ）双核细胞率的影响；对诱变剂诱发常规法单核细胞，胞质分裂阻滞法单、双核细胞微核率进行比较研究。结果显示：丝裂霉素Ｃ对细胞松弛素Ｂ诱发双核细胞率有降低作用，而秋水仙素有增加作用；诱变剂诱发的双核细胞微核率并不显著高于常规法单核细胞微核率。该结果提示胞质分裂阻滞法微核试验不能显著提高微核试验的灵敏性。作者并分析了其影响因素。

胞浆分裂阻滞法研究(60)~Coγ-线剂量率致微核效应

淋巴细胞经培养后微核的检测，作为辐射损伤短期监测染色体损伤的又1种细胞遗传学方法已有不少研究，80年代中期Fenech和Morley，首次使用细胞松驰素B(Cytochalasin B，cyt-B)建立了人淋巴细胞胞浆分裂阻滞微核测试法(Cytokinesis-block Micronucleus Method)，简称CB微核法，此法克服了常规培养微核法的不足，可获得大量易于识别的第1次分裂后的双核细胞．

胞质分裂阻滞细胞的微核检测及方法学初步研究

培养人体外周血淋巴细胞的微核检测,是近年来常用的体外短期检测方法之一,可用来评价被检理化因子对人体细胞的遗传毒性,及监测环境、职业接触等有害因子对人类的潜在致癌作用。为了进一步提高该方法的敏感性。

胞浆分裂阻滞微核法用作辐射生物剂量计的研究进展

胞浆分裂阻滞技术的建立,使人淋巴细胞微核分析成为估价染色体损伤的一个可靠和经济的方法。目前,不少研究已证实该法是除经典染色体畸变分析之外又一个可靠的生物剂量计。该法的简便快速加之其在自动化方面的新进展,将成功地应用于监测受照人群,尤其是在大量受照人员的辐射事故中将发挥其快速为临床提供生物剂量的优势。然而,由于该法建立时间尚短,还存在一些有待探讨和解决的问题,本文针对该法在用于辐射生物剂量计中的有关问题和研究进展作一概述。

微核胞质分裂阻滞细胞(CB-MNT)方法学探讨和比较

目的微核胞质分裂阻滞细胞(CB-MNT)实验方法学探讨,对CB-MNT和常规法微核(C-MNT)两种检测方法进行比较。方法选取85名从事放射作业人员外周血标本,分别采用CB-MNT法和常规法两种方法培养微核细胞。通过制片染片及镜下检查,识别双核淋巴细胞微核和转化的单核淋巴细胞微核;比较两种方法培养出的淋巴细胞的自发微核细胞率,并进行统计分析。结果采用淋巴细胞微核自发率CB法制片的结果是3.85±8.43;采用常规法制片的结果是1.13±1.60。两种方法得到的自发率差异有统计学意义(t=-6.17,P<0.01)。采用CB法制片获得的双核淋巴细胞核完整膨大,胞质清晰,微核易识别。结论胞质分裂阻滞法优于常规培养法;胞质分裂阻滞法对毒性损伤反映更加敏感;微核细胞更易识别;能减少阅片误差,结果准确可靠。建议作为职业健康体检对遗传损伤监护中实验室中的优先检查方法。

宇宙辐射对民航飞行人员淋巴细胞微核率的影响

目的探讨宇宙辐射对民航飞行人员细胞遗传学指标的影响,为辐射防护提供依据。方法用胞质分裂阻滞微核法观察宇宙辐射对外周血淋巴细胞微核率的影响。采集150名健康飞行人员和32名地面对照人员的外周静脉血,在含植物血凝素的RPMI1640培养基中37℃培养38～44h,加入细胞松弛素-B继续培养至72h。经低渗、固定、涂片、染色,每例观察500个双核淋巴细胞中的微核。结果(1)飞行人员双核淋巴细胞微核率(MNF)(16.15±0.33)‰、微核细胞率(MNCF)(13.66±0.21)‰与地面人员MNF(11.48±0.50)‰、MNCF(10.42±0.57)‰相比,差异有显著性(P<0.01);(2)MNF、MNCF与飞行人员的工龄、累积飞行小时和年龄呈反相变化;(3)飞行人员经1个月的休假后,MNF、MNCF均低于连续飞行组,与连续飞行组比较,两组间差异有显著性(P<0.05),但近1个月未飞行组的MNF、MNCF仍显著高于地面组;(4)在去除年龄、性别等影响因素后,未发现吸烟增加飞行人员的微核;(5)无论飞行组还是地面组,男女性别间微核差异无显著性(P>0.05)。结论宇宙辐射能引起民航飞行人员遗传学指标变化;胞质分裂阻滞微核法能够灵敏地反映近期内飞行负荷的差别,可用于监测辐射损伤。

胞浆分裂阻滞微核试验评价接触职业危害的研究进展

微核试验是国际上公认的检测遗传损伤重要技术手段之一,而胞浆分裂阻滞微核试验是近年发展起来的可观察到多种遗传学终点的试验,它能分析染色体断裂、DNA错误修复、基因扩增、坏死、凋亡和细胞分裂抑制等,其在接触职业危害评价中得到大量应用。

胞质分裂阻滞法分析细胞组学研究指标在公共卫生领域的应用现状

近年来利用胞质分裂阻滞法分析微核、核质桥、核芽、核分裂指数、细胞凋亡和细胞坏死等细胞组学指标,成为公共卫生领域探讨不同人群结构、环境、职业暴露等因素对基因组不稳定性、染色体断裂、丢失和细胞增殖能力的影响的常用方法。现将利用胞质分裂阻滞法分析多种细胞组学指标在公共卫生领域的应用现状做以综述。

肿瘤患者放疗前后细胞微核率变化的观察

目的 观察肿瘤患者放射治疗前后外周血淋巴细胞微核率与照射剂量间的关系。方法 采用淋巴细胞胞浆分裂阻滞微核法 ,即CB微核法检测微核率。结果 放疗后 ,患者的微核率 ,微核细胞率与照射累积剂量呈线性正比关系。YMNF=39.2 7+ 0 .71X r =0 .972 0 P <0 .0 1 YMNCF=34.0 5 + 0 .5 8X r =0 .9782 P <0 .0 1。其中10例食管癌患者放疗后 ,疗效较优的 6例的微核率明显高于疗效差的 4例 (P <0 .0 1) ,而且肿瘤患者的自发微核率明显高于正常人 (P <0 .0 1)。结论 CB微核法在检测理化因子对人体的毒性方面是可行的。

低剂量电离辐射对双核CB细胞微核发生的影响

用胞浆阻滞微核法，观察到低剂量Ｘ线照射（０．０７５Ｇｙ）对大剂量Ｘ射线照射（１．５Ｇｙ）及Ｎ－甲基－Ｎ′－硝基－Ｎ－亚硝基胍（ＭＮＮＧ）诱导的双核淋巴细胞微核具有明显的抑制作用，微核细胞率的抑制率分别为４８．６％及２９．８％（Ｐ＜０．０１），微核率的抑制率分别为４６．５％及３３．５％（Ｐ＜０．０１），表明０．０７５ＧｙＸ射线照射能诱导抗大剂量Ｘ线照射及ＭＮＮＧ损伤的适应性反应，该反应可能是由于低剂量照射刺激了某些酶系统，使ＤＮＡ的修复能力增强所致。

CB法检测焦炉工外周血淋巴细胞微核

ＣＢ法检测焦炉工外周血淋巴细胞微核王安莲，史庆华，施荣山，曹多志，吴金贵，李絮洁人外周血淋巴细胞微核（ＭＮ）检测简便、快速、重复性好，已作为检测致突变物的初筛实验的首选。为了提高该方法的敏感性，Ｆｅｎｅｃｈ等首先提出了胞质分裂阻滞微核测试法（ＣＢ法）...

基于胞质分裂阻滞法微核试验的细胞组学进展和应用

微核试验创建于20世纪70年代，根据不同的取材，体内试验、体外试验及不同的培养方法，现已有多种试验种类。外周血淋巴细胞和哺乳动物骨髓嗜多染红细胞是最常用的试验细胞。也有使用上皮组织脱落细胞、人发毛囊细胞、鱼红细胞、软体动物细胞、蚕豆根尖、紫露草等微核试验报道。

中国一般人群外周血淋巴细胞微核率基准值分析：蒙特卡洛模拟法

目的估算中国一般人群外周血淋巴细胞微核率基准值，指导环境或职业化学接触人群的遗传毒性评价和风险分析。方法在中国知网（CNKI）数据库按照全文包含“微核”和“人”，PUBMED数据库中检索“cytokinesis—block micronucleus”和“CBMN”并选取“humans”和“adults”，检索2001至2014年公开发表的使用胞质分裂阻滞法（CBMN）进行微核检测并设立非遗传毒物接触人群对照的国内外研究文献，按照文献提供的微核率、标准差及样本量进行蒙特卡洛模拟，计算一般人群的微核率，并分析性别、吸烟和饮酒对微核率的影响。结果检索出符合条件的文献23篇，微核率均数最小为0．39‰，最大为25．3‰，对照组人数累计1623例（22～178例，平均70．6例），用蒙特卡洛模拟100次得出的微核率众数为0或1‰，P0为0o‰，如为1‰，氏为2‰～3‰，P75为5‰-6‰，氏为14‰～19‰；均数为4．36‰（4．22‰～4．57‰），采用95％单侧范围（x±1．64s）计算得出的参考值上限范围为13．46‰～14．75‰。结论中国一般人群外周血淋巴细胞微核率为4．36‰，四分位数范围为1‰-5‰或1‰～6‰，参考值上限为14．17％，且生活地区、性别、吸烟和饮酒习惯等方面均会对微核率产生影响。