RP-HPLC法研究米托蒽醌白蛋白纳米粒在大鼠的体内分布和淋巴结靶向性

目的:建立大鼠血浆及组织(心、肝、脾、肺、肾及淋巴结)中米托蒽醌(MTO)的快速萃取法和 RP-HPLC 检测法,研究米托蒽醌白蛋白纳米粒(MTO-BSA-NP)在大鼠体内的组织分布和淋巴结靶向性。方法:采用甲酸为酸化剂、甲醇为润湿剂、20%三氯乙酸为蛋白沉淀剂、氯仿为油脂溶解剂一步沉淀萃取 MTO。RP-HPLC 法检测 MTO,色谱柱为 C_(18)(300mm×6mm,5μm),流动相为甲醇-0.16mol·L^(-1)甲酸铵缓冲液(pH2.7)(48:52),进样量10μL,流速1.0mL·min,检测波长658nm,外标法峰面积定量。结果:MTO 与内源性物质分离良好。血浆及心、肺、肾和淋巴结匀浆中,MTO 浓度在50～2997ng·mL^(-1)范围内;肝和脾匀浆中,MTO 浓度在100～2997ng·mL^(-1)范围内,峰面积与 MTO 浓度线性关系良好(r>0.999)。MTO 从血浆中萃取同收率为98.5%,组织中的萃取回收率均在52.0%以上。方法回收率高,日内和日间精密度均小于10%,样品稳定性良好。测定结果表明 MTO-BSA-NP 在淋巴结的摄取率是米托蒽醌注射液(MTO-Soln)的3.36倍,但在其他组织的分布无显著性差异。结论:本文建立的一步沉淀萃取法和 RP-HPLC 法,简便、快速、可靠,可用于 MTO-BSA-NP 在大鼠的体内分布和淋巴结靶向性研究。MTO-BSA-NP 较 MTO-Soln 淋巴结靶向性显著。