急性白血病淋系增强子结合因子1的表达及临床意义

淋系增强子结合因子1(lymphoid enhancer-binding factor 1,LEF1)是Wnt/β-catenin信号路径下游效应分子,通过调控下游靶基因的转录,在正常造血干/祖细胞维持、增殖和分化方面发挥着关键调控作用。研究显示,多种淋巴造血肿瘤LEF1表达异常与预后密切相关,但不同类型淋巴造血肿瘤LEF1表达水平与预后关系的研究结果存在较大差异,提示LEF1在不同类型淋巴造血肿瘤发生发展过程中可能具有不同的作用。本文重点就LEF1与正常造血调控的关系,急性白血病细胞LEF1表达情况及其与预后关系方面的研究进展进行综述。

淋巴增强子结合因子1在肾间质纤维化中的作用及机制

目的探讨淋巴增强子结合因子1(lymphoid enhancer binding factor 1,LEF1)在肾间质纤维化中的作用及机制。方法将18只C57BL/6小鼠,采用完全随机设计分为单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)3天组、UUO 7天组和假手术组。苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色及Masson染色观察肾组织病理变化,Western blot法及免疫组化法检测肾组织中LEF1的表达。Western blot法检测10ng/ml及20ng/ml转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)刺激24h后LEF1的蛋白表达。体外培养HK-2细胞,并分为4组,即Ctrl siRNA组、LEF1siRNA组、Ctrl siRNA+TGF-β1组和LEF1siRNA+TGF-β1组。Western blot法检测HK-2中LEF1、纤连蛋白(fibronectin,FN)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、多聚磷酸核糖聚合酶剪切体(cleaved poly ADP-ribose polymerase,cleaved PARP)、半胱氨酸蛋白酶-3剪切体(cleaved caspase-3)等蛋白的相对表达水平,比较4组细胞各蛋白相对表达水平的差异。流式细胞术检测各组细胞的凋亡率。结果UUO组出现小管扩张、炎性细胞浸润及胶原沉积,LEF1表达高于假手术组(P<0.05)。TGF-β1可导致HK-2细胞中LEF1的蛋白表达水平升高(P<0.05)。LEF1siRNA转染HK-2细胞敲低其表达可以减轻细胞的纤维化反应(P<0.05)。敲低LEF1可以延缓上皮间充质转化(epithelial–mesenchymal transition,EMT)进程并减轻HK-2的凋亡(P<0.05)。结论LEF1可以通过促进肾小管上皮细胞发生EMT进而诱导凋亡,最终导致肾间质纤维化。

羟基积雪草苷对KKay小鼠附睾脂肪中蛋白激酶A、叉头转录因子1及转录因子CCAAT增强子结合蛋白β表达的影响

目的观察羟基积雪草苷对KKay小鼠体重的影响。方法将16只10周龄雄性肥胖糖尿病模型小鼠KKay/TaJcl适应性喂养1周后,随机分为模型组8只和羟基积雪草苷组8只(MA组),其中模型组以去离子水灌胃,MA组以羟基积雪草苷40 mg/(kg·d)灌胃,连续干预9周。每天记录每只小鼠的体质量及饮食量,通过HE染色观察KKay小鼠附睾脂肪组织的病理学变化,Western blot法检测附睾脂肪中蛋白激酶A(PKA)、叉头转录因子1(FOXO1)、转录因子CCAAT增强子结合蛋白β(C/EBPβ)的磷酸化表达水平。结果与模型组小鼠比较,MA组可明显抑制小鼠的体质量增加,差异有统计学意义(P<0.05)。附睾脂肪的HE染色结果显示,羟基积雪草苷干预KKay小鼠9周后,与模型组比较,MA组的附睾脂肪组织明显变的紧密,并且细胞大小也明显缩小。与模型组比较,羟基积雪草苷干预9周后可明显促进小鼠附睾脂肪组织中PKA蛋白的磷酸化,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,羟基积雪草苷可明显抑制小鼠附睾脂肪组织中FOXO1蛋白的磷酸化,差异有统计学意义(P<0.01)。与模型组比较,羟基积雪草苷干预9周后,可明显抑制小鼠附睾脂肪中C/EBPβ蛋白磷酸化的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论羟基积雪草苷可以明显抑制小鼠体质量增加,促进PKA蛋白的磷酸化表达,抑制FOXO1、C/EBPβ蛋白的磷酸化表达,对肥胖症具有潜在的治疗效果。

血清SDF-1、α-HBDH水平与老年急性髓系白血病患者中西医结合治疗预后的相关性

目的探讨血清基质细胞衍生因子(SDF)-1、α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)水平与老年急性髓系白血病(AML)患者中西医结合治疗预后的相关性。方法前瞻选择80例拟接受中西医结合治疗的老年AML患者,治疗前检测患者血清SDF-1、α-HBDH水平,随访2年,评价预后情况,比较预后不良和预后良好患者相关资料与血清SDF-1、α-HBDH水平,重点分析血清SDF-1、α-HBDH水平与老年AML患者中西医结合治疗预后的相关性。结果80例老年AML患者经中西医结合治疗后,无效17例,随访时间3~24个月,平均(11.53±2.12)个月,复发22例,合计预后不良39例(48.75%);比较两组资料后,经Logistic回归分析结果显示,血小板低、中性粒细胞比值低、白细胞计数高、SDF-1高、α-HBDH高均可能是老年AML患者中西医结合治疗后预后的影响因子(OR>1,P<0.001);绘制受试者工作特征(ROC)曲线发现,血清SDF-1、α-HBDH水平预测老年AML患者中西医结合治疗预后的曲线下面积(AUC)分别为0.826、0.867,AUC均>0.80,有一定预测价值。结论接受中西医结合治疗的老年AML患者,若治疗前血清SDF-1、α-HBDH水平呈高表达,可能提示治疗无效或缓解后高复发等不良预后,可考虑将二者用于老年AML患者治疗效果及预后风险预测。

血清COX-2、TGF-β1水平与老年急性髓系白血病患者中西医结合治疗预后的相关性

目的分析血清环氧化酶(COX)-2、转化生长因子(TGF)-β1水平与老年急性髓系白血病(AML)患者中西医结合治疗预后的关系。方法前瞻选取接受中西医结合治疗的80例老年AML患者,入院时接受资料调查及血清学指标检测,全部患者接受2个疗程的治疗,依据疗效分组,将完全缓解+部分缓解纳入预后良好组,其他患者纳入预后不良组,记录患者资料,重点分析老年AML患者治疗前血清COX-2、TGF-β1水平与中西医结合治疗预后的关系。结果80例老年AML患者经2个疗程治疗,预后良好41例,预后不良39例;预后不良组治疗前血清COX-2水平显著高于预后良好组,TGF-β1水平显著低于预后良好组(P<0.05);经回归分析结果显示,治疗前血清COX-2、TGF-β1水平与老年AML患者中西医结合治疗预后有关,COX-2高表达、TGF-β1低表达可能是老年AML患者中西医结合治疗预后不良的风险因子(OR>1,P<0.05);绘制受试者工作特征(ROC)曲线,结果显示,治疗前血清COX-2、TGF-β1水平单独及联合预测老年AML患者中西医结合治疗预后不良风险的曲线下面积(AUC)均>0.80,预测价值均较理想,且以联合预测价值最佳;相关性分析结果显示,老年AML患者治疗前血清COX-2水平与TGF-β1水平呈负相关(P<0.05)。结论血清COX-2、TGF-β1水平与老年AML患者中西医结合治疗预后不良有关,可能是患者治疗预后不良的风险因子,对预测患者治疗预后不良风险有一定价值。

沉默长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1对人脐静脉内皮细胞的影响

目的观察长链非编码RNA淋巴增强子结合因子1反义RNA1(LEF1-AS1)基因沉默后对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖、迁移和血管生成能力的影响。方法采用RNA干扰技术,在HUVEC(美国模式培养物集存库)中沉默LEF1-AS1基因的表达,细胞分为对照组与实验组,即NC组和si-LEF1-AS1组,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测转染效果;细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell分别检测细胞增殖和迁移力的变化;体外血管生成实验检测LEF1-AS1对血管生成能力的影响。两组间比较采用独立样本t检验。结果RT-qPCR结果显示,si-LEF1-AS1组LEF1-AS1 mRNA的相对表达量(0.059±0.010)低于NC组(1.000±0.018),差异有统计学意义(t=40.824,P<0.01);CCK-8实验结果显示,HUVECs在处理24 h后si-LEF1-AS1组细胞的吸光度(A)值(0.103±0.004)少于NC组(0.129±0.006),在处理48 h后si-LEF1-AS1组细胞的A值(0.235±0.016)也少于NC组(0.431±0.018),在处理72 h后si-LEF1-AS1组细胞的A值(0.454±0.029)也少于NC组(0.846±0.034);Transwell迁移实验结果显示si-LEF1-AS1组迁移到小室下侧的相对细胞数(0.446±0.025)少于NC组(1.000±0.046),差异有统计学意义(t=17.120,P<0.01);血管形成实验结果显示si-LEF1-AS1组的总成管长度(3152.333±200.959)少于NC组(13263.667±247.823),差异有统计学意义(t=54.891,P<0.01)。结论沉默长链非编码RNA LEF1-AS1抑制HUVEC细胞的增殖、迁移及血管生成能力。

缺氧诱导因子-1在缺氧诱导一氧化氮合成酶基因表达中的作用

目的 研究缺氧诱导因子-1(HIF-1)在一氧化氮合成酶基因缺氧诱导反应中的作用。方法 体外合成具有HIF-1特异结合位点的DNA片段(红细胞生成素3'-增强子片段),借助脂质体,转入培养的鼠主动脉内皮细胞和肺微血管细胞,用半定量RT-PCR方法测定诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)mRNA。结果 (1)大鼠主动脉内皮细胞、肺微血管内皮细胞在常氧下培养,有iNOS基因表达;(2)缺氧能诱导这两种细胞iNOS基因表达增加;(3)野生型EPO3'-增强子片段能阻断缺氧对内皮细胞iNOS基因表达的诱导作用,而突变片段则无此作用。结论 在iNOS基因序列中,可能存在EPO3'-端增强子片段,其参与内皮细胞的缺氧反应。

急性髓系白血病患者转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α基因突变研究

目的探讨髓系转录因子CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)基因突变与急性髓系白血病(AML)发生的关系。方法采用聚合酶链反应单链构象多态性(PCRSSCP)分析联合测序的方法检测48例AML患者骨髓标本,11名正常体检者的外周血标本C/EBPα基因突变情况。结果经PCRSSCP检测,48例AML患者中有5例(10.4%)存在突变。经测序证实有4种重复,1种缺失,均为新的突变类型。结论C/EBPα基因在少数AML患者中存在不同类型的突变,其变异可能与某些AML的发生有关。

转化生长因子β1对肾小管上皮细胞C/EBPα及相关核转录因子表达的影响

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)对CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)核转录因子表达的影响,探讨C/EBPα在TGF-β1致肾间质纤维化过程中的表达及其机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),利用TGF-β1分别在不同质量浓度(5和10 ng/m L)和不同时间点(0、4、12、24 h)刺激HK-2细胞,收集细胞总RNA和蛋白(核蛋白和总蛋白)以及细胞上清液。应用realtime PCR法和Western blotting检测C/EBPα和核转录因子PPARγ以及上皮细胞-间充质转化(EMT)相关蛋白α-SMA、E-cadherin的表达变化;ELISA方法检测细胞上清液中单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的表达水平。结果 TGF-β1(5 ng/m L)刺激HK-2细胞24 h后C/EBPα蛋白与PPARγ变化一致,差异均无统计学意义(P>0.05);E-cadherin表达减少。TGF-β1(10 ng/m L)分别刺激0、4、12、24 h后,核蛋白中C/EBPα在12 h时表达明显降低,PPARγ在4 h表达升高。以TGF-β1 10 ng/m L刺激HK-2细胞12 h后,C/EBPα、PPARγ、E-cadherin mRNA分别降低70%、50%和90%(P<0.05)。以10 ng/m L TGF-β1刺激HK-2细胞后,MCP-1在12、24 h时分别升高6倍和10.67倍。结论 C/EBPα参与TGFβ1诱导的肾间质纤维化过程,并且与间质纤维化过程中的炎症反应和EMT过程相关;且在此过程中,与PPARγ相互作用,促进或抑制肾间质纤维化。

慢性髓系白血病患者SHP-1基因、id4基因甲基化状态及其与疾病进展的关系

目的探究慢性髓系白血病(CML)患者含SH2结构域的磷酸酶1(SHP-1)基因、DNA结合抑制因子4(id4)基因甲基化状态及其与疾病进展的关系。方法选取2015年5月—2019年5月中国人民解放军联勤保障部队第九六四医院血液科收治CML患者78例为研究对象(病例组),选取同期于医院健康体检者42例作为健康对照组。使用甲基化特异性聚合酶链反应(MS-PCR)法对2组受试者骨髓中SHP-1基因、id4基因甲基化表达进行检测,分析CML患者慢性期、加速期及急变期SHP-1基因、id4基因甲基化率。结果SHP-1、id4基因mRNA表达水平比较,健康对照组>慢性期>加速期>急变期,差异均有统计学意义(F=83.813、424.699,P均=0.000)。健康对照组、CML慢性期、加速期及急变期的SHP-1基因甲基化阳性率分别为0%、25.00%、96.67%及100.00%,差异具有统计学意义(χ^2=98.127,P=0.000);而id4基因甲基化阳性率分别为0%、0%、66.67%及70.83%,差异亦具有统计学意义(χ^2=65.490,P=0.000)。结论SHP-1基因、id4基因在健康者中呈非甲基化,在CML慢性期甲基化率较低,在加速期或急变期则呈高甲基化状态,因而其甲基化可作为预测CML疾病进展的标志因子,对CML的诊断及治疗具有积极意义。

LINC01234通过调控IGF2BP1 c-Myc对急性髓系白血病细胞增殖侵袭迁移的影响

目的:探讨LINC01234通过调控胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulin-like growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)/c-Myc对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:分析2019年3月至2021年9月在湖北省恩施州中心医院确诊的31例AML患者和在本院体检的24例健康志愿者的外周血标本。通过实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测分析LINC01234在AML标本和细胞系(MV-4-11、NB4、KG-1、THP-1、HL-60)中的表达模式。HL-60细胞随机记为空白对照(blank control,BC)组、sh-control组、sh-LINC01234组、sh-LINC01234+pcDNA-control组、 sh-LINC01234+pcDNA-c-Myc组。qRT-PCR检测细胞中LINC01234、IGF2BP1和c-Myc的表达。细胞计数试剂盒-8实验、transwell迁移和侵袭实验用于细胞增殖能力、细胞侵袭和迁移功能的研究。通过RNA免疫沉淀和RNA pulldown实验证实LINC01234、IGF2BP1和c-Myc在AML细胞中的调节相关性。结果:与健康志愿者标本和人骨髓基质细胞HS-5相比,LINC01234在AML标本和5种细胞系中表达均升高(P<0.05)。sh-LINC01234下调HL-60细胞中LINC01234水平后,OD值显著降低,侵袭、迁移细胞数目显著减少(P<0.05)。LINC01234结合IGF2BP1,促进IGF2BP1与c-Myc mRNA的相互作用,从而促进c-Myc mRNA的稳定性(P<0.05)。c-Myc过表达逆转了LINC01234沉默对HL-60细胞增殖、转移的阻碍作用(P<0.05)。结论:LINC01234是一种新型AML相关的lncRNA,通过竞争性结合IGF2BP1促进c-Myc mRNA的稳定性,进而促进AML细胞增殖、侵袭和迁移。

多发性骨髓瘤肾功能不全患者血清PCPE1、IGFBP7水平及临床意义研究

目的分析多发性骨髓瘤(MM)肾功能不全患者血清前胶原C端蛋白酶增强子1(PCPE1)、胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)水平的变化,并探讨其临床意义。方法回顾性选取2019年2月至2021年2月苏州大学附属常熟医院收治的MM患者116例,检测患者血清PCPE1、IGFBP7水平和肾功能指标。根据患者肾功能分为肾功能不全组42例和肾功能正常组74例。比较两组患者肾功能指标和血清PCPE1、IGFBP7水平;分析MM肾功能不全患者血清PCPE1、IGFBP7水平与肾功能指标的相关性;分析MM患者肾功能不全的危险因素;分析血清PCPE1、IGFBP7对MM患者肾功能不全的预测效能。结果肾功能不全组患者血肌酐、血尿素氮、血尿酸、胱抑素C及血清PCPE1、IGFBP7水平均高于肾功能正常组(均P<0.05),估计的肾小球滤过率(eGFR)低于肾功能正常组(P<0.05)。MM肾功能不全患者血清PCPE1、IGFBP7水平与eGFR均呈负相关(均P<0.05),与血肌酐、血尿素氮、血尿酸及胱抑素C水平均呈正相关(均P<0.05)。高血清PCPE1水平、高血清IGFBP7水平均是MM患者发生肾功能不全的独立危险因素(均P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清PCPE1、IGFBP7预测MM患者肾功能不全的AUC分别为0.833、0.806,最佳截断值分别为12.69、163.81μg/L,灵敏度分别为0.752、0.664,特异度分别为0.821、0.823,均有较高的预测效能;而血清PCPE1、IGFBP7联合预测MM患者肾功能不全的AUC高于单独指标预测(均P<0.05),预测效能更高。结论MM肾功能不全患者血清PCPE1、IGFBP7水平升高,且与肾功能不全程度有关,两者联合对MM患者肾功能不全有较高的预测效能。

低氧诱导因子和白血病细胞分化(英文)

三氧化二砷(As2O3,ATO)是一种新发现的有效治疗急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)的药物。研究发现,该药物在体外诱导细胞分化的能力不如体内明显。以此为基础,最近我们意外地发现模拟低氧化合物和中度低氧环境能够直接在体外诱导急性髓系白血病细胞分化,也选择性地加强三氧化二砷诱导的APL细胞分化。进一步地,间歇性低氧能够显著延长移植的白血病小鼠生存时间,并且抑制白血病细胞浸润并诱导其分化。以这些工作为基础,我们就低氧诱导白血病细胞分化的分子机制进行了深入研究。本文将就相关工作作一综述, 并讨论有侍进一步研究的问题。

白藜芦醇对小鼠3T3-L1细胞增殖与分化的影响及其机制

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,Res)对小鼠3T3-L1细胞增殖、分化的影响及其机制。方法培养3T3-L1前脂肪细胞,添加不同剂量的白藜芦醇,用WST-1法检测细胞的增殖;用油红O染色后以染色比色法分析脂肪细胞的分化程度;采用RealtimePCR技术检测各组脂联素和瘦素的mRNA表达;采用Westernblot技术检测相关位点,包括沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,Sirt1)、过氧化物酶增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated re-ceptor γ,PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(CCTT Aenhan-cerbinding proteinα,C/EBPα)的蛋白质表达。结果Res明显抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,且呈一定的时间-剂量依赖关系;与对照组比较,Res组脂联素和瘦素的mRNA表达水平下降(P<0.01),Res抑制3T3-L1前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化;添加Res导致脂肪细胞中Sirt1蛋白表达水平上升,PPARγ和C/EBPα蛋白表达水平下降。结论白藜芦醇能抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化,其机制可能是通过增加Sirt1表达,抑制脂肪细胞分化相关蛋白PPARγ、C/EBPα的表达。

p38 MAPK信号途径在高糖诱导的大鼠肾系膜细胞中激活的意义

目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号途径与其下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)、转化生长因子β1(TGF-β1)及细胞外基质表达的关系。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予低糖和/或甘露醇、高糖和/或SB203580(p38 MAPK特异性抑制剂)干预。采用免疫细胞化学法观察p38 MAPK蛋白的表达情况;Western blotting检测p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白(p-p38 MAPK、p-CREB1)的表达;RT-PCR检测TGF-β1和FN mRNA的表达;放免法测定细胞上清液中层黏连接蛋白(LN)和Ⅳ型胶原的含量。结果与低糖组、低糖+甘露醇组相比,高糖刺激可使p38 MAPK蛋白发生核转移,p-p38 MAPK、p-CREB1表达明显上调,TGF-β1和FN mRNA的表达增强,LN和Ⅳ型胶原含量增加。SB203580能明显抑制p38 MAPK蛋白的核转移,降低p38 MAPK和CREB1的磷酸化,并抑制TGF-β1和FN mRNA表达,使LN和Ⅳ型胶原的分泌减少。结论高糖状态激活p38 MAPK信号途径参与了高糖诱导的肾小球系膜细胞TGF-β的表达和细胞外基质的分泌。

左归丸含药血清通过ERK/Smads信号通路干预MC3T3-E1细胞的功能基因表达

目的研究ERK1/2信号通路在左归丸含药血清调控MC3T3-E1细胞基因表达中的作用。方法以倍美力为阳性对照药,对SD♀大鼠灌服高、中、低剂量的左归丸混悬液,d7腹主动脉取血分离含药血清。采用MTT法检测左归丸含药血清和PD98059对MC3T3-E1细胞增殖作用的影响,采用Western blot法检测ERK1/2蛋白的磷酸化水平及TGF-β1、Smad4蛋白表达,采用Real Time RT-PCR法检测Cbfα1、COLⅠmRNA表达。结果左归丸含药血清和倍美力能促进MC3T3-E1细胞增殖,诱导ERK1/2蛋白的磷酸化,促进TGF-β1、Smad4蛋白分泌,上调其Cbfα1、COLⅠmRNA表达;加入PD98059后MC3T3-E1细胞增殖下降、ERK1/2蛋白的磷酸化水平降低、TGF-β1蛋白表达进一步升高、Smad4蛋白表达降低、Cbfα1、COLⅠmRNA表达下调。结论左归丸能有效促进成骨细胞增殖和分化;左归丸可能是通过发挥雌激素样作用调控了ERK/Smads信号通路,从而达到防治骨质疏松的目的。

缬沙坦对高糖培养的肾小球系膜细胞p38MAPK传导通路的影响

目的探讨高糖状态下肾小球系膜细胞中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、其上游因子MAPK激酶3/6(MKK3/6)和下游因子cAMP反应元件结合蛋白1(CREB1)的表达以及血管紧张素受体1拮抗剂(AT1Ra)缬沙坦的影响。方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分别给予高糖和缬沙坦干预,采用Western bolt检测MKK3/6、p38 MAPK和CREB1及其磷酸化蛋白的表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测系膜细胞内TGF-β1和FN mRNA的表达。放免法测定细胞上清液中纤维连接蛋白(FN)和IV型胶原的含量。MTT法检测缬沙坦在不同时间、不同药物浓度对细胞增殖状态的影响。结果①与低糖对照组相比,高糖组系膜细胞p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1表达明显上调,TGF-β1和FN mRNA的表达增加,FN和IV型胶原含量增加。②缬沙坦组p-p38 MAPK、p-MKK3/6和p-CREB1的表达明显下调,TGF-β1和FN mRNA的表达降低,同时FN和IV型胶原的含量减少。③MTT法检测显示不同浓度的缬沙坦对细胞增殖状态都有所抑制,并随药物浓度的增加而作用增强。结论缬沙坦抑制肾小球系膜细胞TGF-β1的表达和细胞外基质的分泌可能部分是通过影响p38 MAPK传导通路的激活来实现的。

披针新月蕨总黄烷对3T3-L1细胞增殖与分化的影响

目的探索披针新月蕨总黄烷对3T3-L1细胞增殖与分化的影响。方法通过检测细胞存活率来评价总黄烷的细胞毒性,通过检测油红O染色程度来评价总黄烷对3T3-L1细胞增殖分化的影响,通过实时定量逆转录多聚链反应(RT-PCR)检测细胞分化相关基因CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα),脂肪型脂肪酸结合蛋白(FABP4)和葡萄糖转运因子4(GLUT-4)mRNA的表达情况。结果披针新月蕨给药组的细胞MTT值未有明显改变,而油红O染色程度显著性下降了,同时披针新月蕨给药明显的抑制了细胞C/EBPα,FABP4和GLUT-4基因的表达。结论披针新月蕨具有抑制3T3-L1细胞增殖与分化的活性。

DHA对C2C12细胞成脂分化过程中相关基因表达的影响

采用胰岛素、地塞米松和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤联合诱导C2C12细胞分化为脂肪细胞,诱导分化后加入100 mmol/L二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)。DHA处理8 d后,收集细胞,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR方法检测脂肪分化相关基因PPARγ、C/EBPα和ADD1转录表达水平。结果表明,C2C12细胞成脂分化时添加DHA能显著上调PPARγ、C/EBPα和ADD1基因的表达,并且联合添加维生素E后效果更显著。