长江口淞江鲈野生种群的采集及人工繁殖研究

淞江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel 1840)是一种降海洄游性鱼类,如今在上海内河水系已难见踪迹,为查明长江口水域淞江鲈野生种群是否存在,开展了此项研究。2011年5月,采用拖网方式采得淞江鲈鱼苗51尾;采用淞江鲈工厂化养殖管桶系统模式进行驯养、繁殖和成鱼养殖,至5月底存活40尾,成活率为78.4%,平均全长由(2.9±0.3)cm增长至(3.5±0.3)cm,增长率为20.7%;至10月中旬养成29尾,成活率为72.5%,平均全长为(9.1±1.2)cm,增长率为160.0%。这些成鱼有11对培育成熟用于繁殖,成熟率为75.9%。自行有效产卵6窝,产卵率为54.5%,总产卵量为26 616粒,平均窝卵数为(4 436±647)粒;孵出水花鱼苗24 100尾,孵化率达90.5%。该研究结果表明,目前在东海长江口杭州湾水域,仍有淞江鲈野生种群存在,本研究繁殖的后代原种可作为该种群研究和放流之用。

淞江鲈在中国地理分布的历史变迁及其原因

淞江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel)隶属于鲉形目杜父鱼科淞江鲈鱼属,是中国四大淡水名鱼之一。该物种属暖温性底层小型肉食性降海洄游鱼类,曾在中国东南沿海地区较为常见,但近几十年来在许多地区却难以找到其踪迹。为查明其分布区的历史变化,1999年开始,通过查询文献资料和标本馆藏,结合实地考察,比较分析了有记载以来中国境内淞江鲈种群地理分布的历史变迁。结果显示,历史上,淞江鲈广泛分布于环太平洋的渤海、黄海、东海沿岸及与之相通的河流中。文献资料记载的分布区涵盖辽宁、河北、山东、江苏、浙江、福建、台湾7省和天津、上海2市;馆藏标本记录的仅涵盖辽宁、河北、山东、江苏、浙江5省和天津、上海2市;实地调查的现有种群分布区已退缩为辽宁、山东、浙江3省。造成淞江鲈种群分布区减小的原因主要在于人类干扰导致环境污染、洄游通道受阻、产卵场破坏等,致使其生存生境质量显著下降,甚至丧失,以至于其无法完成整个生命周期。基于目前的状况,建议进一步加强对该物种的拯救工作,进一步完善保护措施,使得该物种免遭灭绝之厄运。

关于淞江鲈学名和模式产地以及地理分布之探讨

淞江鲈学名Trachidermus fasciatusHeckel,1840,我国鱼类学文献沿用至今,属名有误,因其阴性Trachiderma早已为其它动物先据而失效。订正后的属名Trachiderm is是有效名称,淞江鲈的学名应写作Trachiderm is fasciatusHeckel,1840。模式产地菲律宾记录有问题,自1840年迄今,菲律宾未见再有该鱼之报道,淞江鲈个体发育水温不宜超过14℃,否则导致胚体畸形和死亡,菲律宾地处热带,气温年平均26.6℃左右,淞江鲈不可能得以繁衍。该鱼为西北太平洋所特有,仅分布于中国、朝鲜半岛和日本南部,我国分布于黄渤海和东海沿岸以及沿岸诸河下游及河口。

不同浓度雌二醇对淞江鲈存活和生长的影响

[目的]探讨不同浓度雌二醇对淞江鲈幼苗存活率和生长的影响。[方法]研究不同浓度雌二醇诱导下淞江鲈的存活率、全长、体重和行为的变化。[结果]30日龄,试验组淞江鲈的存活率、体重与对照组差异不显著(P>0.05);15日龄,试验组淞江鲈的全长与对照组差异不显著(P>0.05),表明雌二醇在早期对淞江鲈的存活率和生长的影响不明显。各试验组淞江鲈的存活率、200μg/L雌二醇组淞江鲈的全长和100μg/L雌二醇组淞江鲈的体重均显著低于对照组(P<0.05)。30~45、75~90日龄淞江鲈存活率的下降速度明显低于其他时期;在30~45日龄淞江鲈全长的增长速度明显快于其他阶段;60日龄后,淞江鲈体重的增长速度明显快于前期(P<0.05)。雌二醇对淞江鲈的摄食几乎没有影响,对争斗和转底栖行为影响明显,对照组争斗严重,转底栖行为持续1个月;400μg/L雌二醇组几乎没有观察到鱼的争斗现象,在15 d内就全部完成转底栖行为。[结论]研究结果可为淞江鲈单性育种奠定基础。

淞江鲈幼鱼自残行为特征分析

为研究淞江鲈幼鱼的自残特征和自残原因,对在淞江鲈繁育过程中收集到的自残鱼进行测量分析,结果发现,其体长和体质量的关系为:y=0.015e0.809 8x,R2=0.824 4;自残吞食鱼与被吞食鱼的体长比为1.28∶1,体质量比为2.56∶1,吞食鱼个体大于被吞食鱼。文章总结了淞江鲈自残行为学特征,提出淞江鲈育苗过程中降低自残率的预防措施。

淞江鲈工厂化养殖模式

淞江鲈,又名松江鲈、四鳃鲈。淞江鲈是一种近海暖温带小型底层肉食洄游性鱼类,是我国国家Ⅱ级水生野生保护动物,也是上海的名贵土著鱼类,具有较高的经济价值。淞江鲈工厂化养殖模式是在其人工繁育技术的基础上,对淞江鲈成鱼养殖过程中所需的关键生态因子进行人工模拟,构建一套适合于其生长发育的模拟自然生境系统,开展工厂化循环水养殖,批量生产出淞江鲈商品鱼。

淞江鲈—南美白对虾池塘接力养殖模式

淞江鲈别名四鳃鲈等,是我国国家二级水生野生保护动物,也是上海的珍稀名贵鱼类,具有较高的经济价值。本试验主要探讨了在上海标准化养殖塘中成功建立淞江鲈、南美白对虾接力养殖模式。接力养殖是同一水体中在不同时期或不同年份轮流养殖不同生物的养殖方式,主要是根据不同养殖生物的时间差异、生态位差异,最大限度地利用太阳能、饵料生物资源等。

淞江鲈鱼种产业化培育技术

阐述了在人工控制的模拟自然生境条件下淞江鲈鱼种的两种产业化培育模式:车间系统产业化培育和车间—池塘接力产业化培育。前者包括模拟自然生境浅海海水生态系统、河口混盐生态系统和河流淡水生态系统的车间系统调控技术,鱼种早期培育、淡化技术和关键生态因子的调控技术等;后者即在鱼种培育的前期,水环境要求海水和半咸水时,在模拟自然生境的车间系统中进行培育,鱼种淡化结束后移至池塘环境中继续培育,该模式的技术要点包括车间培育阶段的鱼种淡化、鱼种驯化,池塘培育阶段的池塘准备、饵料生物培养、鱼种放养、水质调控和鱼种捕捞。

模拟自然生境淞江鲈鱼苗产业化繁育技术

阐述了在人工控制的模拟自然生境条件下,淞江鲈鱼苗的产业化繁殖技术,包括模拟自然生境系统的构建、亲本的采集及培育、产卵与孵化、水花鱼苗采集与培育等。

16S rDNA特异性引物设计优化及其在淞江鲈体表微生物鉴定中的应用

引物与模板的结合特异性是PCR反应成功与否的主要决定因素之一.在进行以16srDNA为目标序列的菌种鉴定或者各种检测应用中,对引物的特异性具有较普遍的要求.需扩增出完整的目标属,实现属内保守,同时避免有效扩增其他属的相应序列即实现属间特异.对此,我们对引物设计进行优化,通过分析所有已知细菌16srDNA序列,针对特定目标属筛选特异和最高效的引物对,并在淞江鲈的体表菌群样品中进行验证实验.结果表明,所设计的引物具有较好的属内保守性和特异性,而且引物在扩增中的效率也有一定的保证,能够很好地应用于菌群的定量PCR分析.

利用高通量测序技术探究淞江鲈体表细菌的分类

微生物引起的皮肤溃烂是淞江鲈（Trachidermus fasciatus Heckel）常见的慢性感染性疾病,也是人工养殖过程中导致其产量下降的重要因素之一。现代微生物群落的主要研究方法不依赖于分离培养,而采用DNA高通量测序技术。高通量测序技术中为了提高测序效率、区分不同样本,引入了“标签序列”（barcode）。本研究探索Illumina MiSeq平台双向测定淞江鲈表皮菌群样本16S rRNA基因的V1～V3区序列的可行性,并且考察barcode长度和测序量对细菌群落结构分析的影响。结果表明：双向测序的拼接成功率达93%,可以成功识别V1～V3区。不同长度的barcode对序列分库有较大影响,建议采用12 bp以上长度的barcode。样本中有效序列的数目对可操作分类单元（OTU）的划分影响很大,在测试的有效序列数范围内,OTU数随有效序列数线性增加。当测序量达到6 000～9 000时属及以上分类数曲线逐渐进入平台期,可覆盖样本中的大部分种属。结合测序和文献结果,可推测黄杆菌属（Flavobacterium）、希瓦氏菌属（Shewanella）、假单胞菌属（Pseudomonas）可能与淞江鲈皮肤溃烂相关。

基于形态框架数据的淞江鲈种群鉴别(英文)

采用形态框架数据阐明了中国3个现存的淞江鲈地理种群的形态差异。每条鱼测量22个形态度量参数,用Burnaby的多变量方法校正形态度量参数,采用聚类和判别分析来区别种群的差异。结果显示:1)3个地理种群可以分成两组,第1组包括青龙河种群和富春江种群,第2组包括鸭绿江种群;2)根据F-remove值,挑选出最大的5个形态参数:D(2-3)、D(7-9)、D(6-5)、D(6-8)、D(2-1),用挑选后的5个形态参数进行判别分析的判别准确率达100%,显示这3个地理种群是形态上可辨别的种群。地理隔离和环境因子也许是淞江鲈种群形态差异的主要影响因素。虽然形态度量对于判别淞江鲈的种群有效,但对于其种群结构的进一步确认研究是必要的。

海水池塘套养淞江鲈试验

探讨了淞江鲈人工繁育苗种的海水池塘套养技术，结果表明：淞江鲈苗种可以不经过溯河洄游至淡水中育肥，而直接在海水池塘生长发育成熟，完成其生活史。但由于海水池塘套养受不同池塘环境因子的影响，其存活率存在较大差异。若选取生态条件适宜的海水池塘，或按照淞江鲈生活习性需求进行建设和改造，可大大提高海水池塘淞江鲈套养成活率。

淞江鲈HSP70基因cDNA部分序列克隆及其组织表达差异

为了研究HSP70(heat shock protein 70)是否可作为淞江鲈(Trachidermus fasciatus Heckel)养殖中的应激监测分子指标,根据鲤鱼热应激蛋白70基因序列(AYl20894)设计并合成引物,以淞江鲈肝脏组织总RNA为模板,获得淞江鲈HSP70基因cDNA部分序列,长度为480bp,GenBank登陆号为KC342053.序列分析结果显示此序列与红笛鲷(Lutjanus sanguineus)等有较高的同源性.同时,应用所获淞江鲈HSP70基因部分序列,以淞江鲈β-actin基因的序列(HM449124)为内参,利用荧光定量PCR技术,检测淞江鲈肌肉、肠、脑、皮肤、性腺、肝脏、心脏、鳃、鳍9个组织的表达差异.结果表明,HSP70在淞江鲈9个组织中普遍表达,其中在鳍中表达量最高,在性腺、鳃、脑、肌肉、肝脏、皮肤、肠中的表达量依次递减,在心脏中表达量最低.在鳍中HSP70的表达量可能成为衡量淞江鲈应激程度的指标.

淞江鲈肝脏组织cDNA文库的构建与部分EST测序

以成年雌性淞江鲈肝脏组织为材料,用TRIzol Reagent试剂提取总RNA.以总RNA为模板,先用逆转录酶合成cDNA第一链,再通过LD-PCR合成cDNA第二链,所得双链DNA分子用SfiⅠ酶切处理后,连接到同样经SfiⅠ酶切处理的改良pUC19载体上,获得重组质粒.将重组质粒导入大肠杆菌DH5α感受态细胞中,建成质粒cDNA文库.经鉴定,该文库库容为1.5×106,重组率为94.5%,平均插入片段长度为1.1kb,插入片段大小分布为0.5~2.0kb.从文库中随机挑选2 200个克隆进行5’端单向测序,剔除不合格序列后,得2 002条高质量表达序列标签（Expressed Sequence Tag,EST）序列,提交dbEST数据库.经筛选,从这些EST序列中共发现471个基因,分别对其进行了KOG功能分类预测（216个蛋白被注释上21种KOG分类）、KEGG注释（186个基因注释上175个KO,139个基因注释上195个pathway）和GO功能分类注释（312个蛋白被注释上GO分类）.

2016年海昌奖获奖者先进事迹(十二)

慈学范,朝鲜族,1960年出生,吉林鸭绿江上游国家级自然保护区管理局资源管理站站长。在保护区一线工作多年,热爱保护区事业,熟悉掌握保护区及周边山山水水。2004年,慈学范辞去水电站安逸的工作,为了保护区的未来,毅然投入到保护区艰苦创业的队伍中。2006年,为保护已达濒危状态的鸭绿江中细鳞鱼种群。