淫羊藿总黄酮对去势大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b的影响及与骨密度的相关性

目的:探讨淫羊藿总黄酮(TFE)对去势大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)及骨密度的影响。方法:10月龄雌性SD大鼠去卵巢法建立大鼠模型,随机数字表法分为空白对照组(N)、模型对照组(O)、TFE低(T_(L))、中(T_(M))、高(T_(H))剂量组,β-雌二醇(E)组各10只,灌胃干预90d。用抗酒石酸酸性磷酸酶试剂盒测定TRACP-5b含量,用小动物分析软件测定活体全身骨密度。结果:(1)TRACP-5b水平O组明显高于N组,具有显著性差异(P<0.01),T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组TRACP-5b水平明显低于O组,具有显著性差异(P<0.01)。(2)与N组比较,O、T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组腰椎骨密度均下降,唯有O组呈显著性差异(P<0.05);与O组比较,T_(M)、T_(H)组腰椎骨密度升高、呈显著性差异(P<0.05),E组腰椎骨密度升高、具有显著性差异(P<0.01)。(3)与N组比较,O、T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组全身骨密度均下降,唯有O组差异有统计学意义(P<0.05);与O组比较,T_(L)、T_(M)、T_(H)和E组全身骨密度均升高,唯有E组呈显著性差异(P<0.05)。结论:TFE可以降低去势大鼠血清中TRACP-5b的含量,并与去势大鼠腰椎骨密度、全身骨密度呈一定的量效关系。

淫羊藿总黄酮联合黄芪多糖对骨质疏松性骨折模型大鼠骨折愈合的影响

目的探讨淫羊藿总黄酮联合黄芪多糖对骨质疏松骨折模型大鼠骨折愈合、骨痂形成及塑形情况的影响。方法将60只SD大鼠随机分为全处理组(A组)、后处理组(B组)、对照组(C组),各20只。其中,A组和B组分别灌胃淫羊藿总黄酮提取物与黄芪多糖混悬液(1∶1,m/m)690 g/(kg·d)和等量生理盐水,4周后采用双侧卵巢切除术复制大鼠骨质疏松骨折模型,继续灌胃6周;C组大鼠灌胃等量生理盐水4周后造模,连续灌胃等量生理盐水6周。于造模后第10,17,24,30天拍摄患肢股骨正侧位X线摄片,计算矿化骨组织体积(BV)、骨痂总体积(TV)、骨体积分数(BV/TV)、骨矿密度(BMD)。灌胃6周后,处死所有大鼠,每组随机选取10只进行患肢Micro-CT扫描;于腹主动脉取血,测定Ⅰ型胶原N端前肽(PⅠNP)、碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(BGP)水平。结果与本组造模后第10天比较,3组大鼠造模后第17,24,30天的正侧位X线摄片Lane-Sandhu评分均显著升高(P<0.05);与C组比较,A组大鼠造模后第10,30天的正侧位X线摄片Lane-Sandhu评分均显著升高(P<0.05)。与C组比较,A组大鼠的AKP,BGP,PⅠNP,BV,BV/TV,BMD均显著升高(P<0.05),B组大鼠的AKP和BGP均显著升高(P<0.05);与B组比较,A组大鼠的BGP,PⅠNP,BV/TV均显著升高(P<0.05)。结论淫羊藿总黄酮联合黄芪多糖可有效改善骨质疏松性骨折模型大鼠的骨折愈合情况,促进骨痂形成。

基于网络药理学探讨淫羊藿总黄酮防治阿尔兹海默病的机制研究

目的:采用网络药理学的分析方法研究淫羊藿总黄酮治疗阿尔兹海默病的机制。借助网络药理学数据库与分析平台(TCMSP)得到淫羊藿中的有效活性成分,并从中筛选出黄酮类成分。通过Pubchem和Swiss Target Prediction数据库,找到各黄酮类成分的相关靶点;采用Gene Cards数据库获取阿尔兹海默病的相关基因;淫羊藿“黄酮类活性成分-靶点-阿尔兹海默病”相互作用网络利用Cytoscape 3.9.1软件建立;采用Venny2.1.0平台获得总黄酮类成分与阿尔兹海默病的交集靶点,再将交集靶点输入STRING 11.0数据库获取蛋白质之间相互作用的网络图;采用Metascape数据库对GO功能以及KEGG通路进行分析。结果:得到淫羊藿治疗阿尔兹海默病黄酮类的核心成分12个,核心靶点为AKT1、TNF、VEGFA、SRC等10个,包括癌症途径、松弛素信号通路、EGFR酪氨酸激酶抑制剂耐药性等信号通路。结论:构建的“成分-靶点-通路”网络结构图能够揭示淫羊藿黄酮类成分的多成分、多靶点、多通路协同抗阿尔兹海默病的作用,为进一步阐明淫羊藿抗阿尔兹海默病的作用机制提供理论依据。

气相色谱法测定葛根和淫羊藿总黄酮提取物中大孔树脂有机残留物

目的:建立葛根和淫羊藿总黄酮提取物中大孔吸附树脂7种有机残留物的含量测定方法。方法:采用气相色谱法,DB-1毛细管柱(柱长为60 m,内径为0.25 mm,膜厚度为1.0μm),柱温为程序升温,起始温度为40℃,再以4℃/min升温至175℃,保持12 min,用氢火焰离子化检测器检测,检测器温度250℃,进样口温度200℃;载气为氮气,流速为0.8 mL/min,分流比为20∶1,顶空进样,顶空瓶平衡温度为90℃,平衡时间为50 min。结果:7种有机溶剂残留物的峰面积与浓度呈良好线性关系,正己烷、苯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯、1,2-二乙基苯的平均回收率分别为101%、90%、87%、85%、84%、76%、79%。结论:该方法测定准确度高、精密度重复性好。

淫羊藿总黄酮联合骨营养剂抗骨质疏松作用探讨

目的探索淫羊藿总黄酮联合骨营养剂治疗骨质疏松的协同作用,讨论中西药联用的潜在作用机制。方法通过去除卵巢建立绝经后骨质疏松大鼠模型,设置假手术组(Sham)、模型组(OVX)、戊酸雌二醇组(EV)、淫羊藿总黄酮提取物组(T)、淫羊藿总黄酮提取物配伍骨营养剂组(TG),每组7只。给药干预8周后,通过酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清骨代谢标志物和炎症因子的变化,利用Micro-CT和生物力学分析测定骨密度和显微结构、采用苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,H&E)和抗酒石酸酸性磷酸酶染色(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)观察骨病理损伤及破骨细胞数量,使用免疫组化和实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测量大鼠股骨中TLR4、PI3K和AKT的基因转录和表达。结果与OVX组相比,EV组、T组和TG组的骨小梁数目增多,排列整齐,结构较为完整,血清骨代谢指标、血清炎症因子、骨小梁参数、骨生物力学参数和破骨细胞数量显著改善(P<0.05),PI3K、AKT的阳性区域及mRNA表达明显升高(P<0.05),TLR4的阳性区域及mRNA表达明显降低(P<0.05)。与T组相比,TG组的药效作用更显著(P<0.05),TLR4 mRNA表达明显降低(P<0.05),PI3K mRNA表达明显升高(P<0.05)。结论淫羊藿总黄酮联合骨营养剂可在TLR4/PI3K/AKT信号通路中协同发挥药效,缓解大鼠骨质疏松的症状。

淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷抗动脉粥样硬化作用机制研究进展

淫羊藿为传统补益类中药,淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷是淫羊藿主要药效成分,而淫羊藿苷是淫羊藿总黄酮中的重要活性物质之一,具有抗动脉粥样硬化、抗高血压、抗心肌缺血缺氧、抗肿瘤、抗衰老、抗骨质疏松、促进免疫调节等作用。本文以“淫羊藿”“淫羊藿总黄酮”“淫羊藿苷”“动脉粥样硬化”“作用机制”等为关键词,在中国知网、万方数据库等数据库中组合查询2009~2020年发表的相关文献,归纳淫羊藿总黄酮及淫羊藿苷抗动脉粥样硬化作用机制,以期为动脉粥样硬化疾病的治疗及新药研发提供参考。

淫羊藿总黄酮对兔脂肪干细胞向尿路上皮细胞增殖分化的影响

目的:探讨淫羊藿总黄酮对兔脂肪干细胞诱导培养向尿路上皮细胞增殖分化的影响。方法:采用蛋白质印迹法(Western blot)对脂肪干细胞进行鉴定,用MTT法检测增殖活力,然后将以未添加淫羊藿总黄酮的培养基作为对照组,将分别加入0.1μg/mL,1μg/mL,10μg/mL,100μg/mL淫羊藿总黄酮的培养基作为实验组,采用间接共培养对脂肪干细胞进行诱导培养,采用Western blot及实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)鉴定尿路上皮细胞,并对比转化效率。结果:脂肪干细胞呈长梭形,表型鉴定结果显示CD44和Vimentin蛋白阳性表达,且MTT显示细胞活力良好。对兔脂肪干细胞诱导培养成功获得尿路上皮细胞,呈多角形,表型鉴定显示:Up-Ⅰa,Up-Ⅲ,AE1/AE3和CK7蛋白阳性表达,Up-Ⅲ的mRNA阳性表达,且在淫羊藿总黄酮浓度为100μg/mL时表达水平最显著。结论:淫羊藿总黄酮对兔脂肪干细胞向尿路上皮细胞的转化具有促进作用,在一定范围内呈现浓度依赖性,为提高转化效率提供了新的思路。

淫羊藿总黄酮对大鼠实验性骨质疏松生化学指标的影响

目的 探讨淫羊藿总黄酮防治大鼠实验性骨质疏松症过程中骨代谢生化指标的变化及其意义。方法 采用维甲酸灌胃造成大鼠实验性骨质疏松症模型 ,检测灌服高、中、低 3种剂量的淫羊藿总黄酮后大鼠血清生化指标、尿生化指标、骨矿含量及骨密度指标的变化 ,并与模型组、正常对照组和阳性对照组进行比较。结果 3个剂量组的血清E2 、T和BGP水平均高于模型组 ,尿Ca/Cr、DPD和血清PTH水平均低于模型组 ,股骨Ca、P和骨密度与正常对照组接近 ,与模型组差异有显著性。结论 淫羊藿总黄酮对维甲酸造成的大鼠骨质疏松症有明显的防治作用 ,骨代谢生化指标变化情况与骨密度的变化相一致 。

淫羊藿总黄酮通过抑制MAPK/NF-κB信号通路减轻自然衰老大鼠脑组织炎症反应

目的探讨淫羊藿总黄酮(total flavonoids of Epimedium,TFE)对自然衰老大鼠脑组织中MAPK/NF-κB信号通路影响及其抗炎作用。方法 HE染色观察各组大鼠海马CA1、CA3和DG区神经元形态的变化。Western blot法检测各组大鼠海马组织中衰老相关蛋白p21、凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2的表达,核转录因子NF-κB p65及其下游炎症因子TNF-α、IL-1β和COX-2的表达,以及MAPK信号通路相关蛋白的表达。结果 TFE可明显改善自然衰老组大鼠海马神经细胞形态结构,神经细胞排列整齐紧密。同时,TFE可明显下调自然衰老组大鼠海马组织中p21、Bax蛋白表达水平,上调Bcl-2蛋白表达水平及Bcl-2/Bax的比值,且可明显降低NF-κB p65核蛋白及其下游炎症因子TNF-α、IL-1β和COX-2的表达,以及MAPK信号通路相关蛋白(p-ERK1/2、p-JNK、p-p38 MAPK)的表达。结论 TFE对自然衰老大鼠炎症反应具有保护作用,其作用机制可能是通过抑制MAPK信号通路的激活,从而抑制NF-κB的核易位及其下游炎症细胞因子表达,进而延缓脑衰老。

淫羊藿总黄酮抗大鼠实验性骨质疏松作用研究

目的 研究淫羊藿总黄酮对维甲酸所致大鼠骨质疏松的防治作用并探讨其主要作用机理。方法 用70mg·kg-1·d-1维甲酸连续灌胃 14d ,诱发大鼠骨质疏松模型 ,用高、中、低 3种剂量的淫羊藿总黄酮进行治疗 ,观测大鼠器官指数、骨计量学指标及骨组织形态计量学的变化。结果 淫羊藿总黄酮各剂量组前列腺和睾丸指数均明显增大并恢复到正常对照组水平 ,脾脏和肾上腺的代偿性肥大消失 ,股骨的干重、灰重、骨钙、骨磷和骨密度等均明显高于模型组 ,胫骨近端的骨小梁面积百分比、骨小梁厚度、骨小梁间隙以及胫骨中段的皮质骨面积百分比等亦较模型组有显著升高 ,第一腰椎中骨小梁指数的变化与胫骨松质骨近似。结论 淫羊藿总黄酮可通过保护性腺、抑制骨吸收和促进骨形成等途径 ,使机体骨代谢处于骨形成大于骨吸收的正平衡状态 ,抑制骨量丢失 。

淫羊藿总黄酮对大鼠成骨细胞代谢调控的机制研究

目的:探讨淫羊藿总黄酮对大鼠成骨细胞代谢调控的影响。方法:取新生SD大鼠的颅骨,胶原酶法培养成骨细胞。应用MTT法、对硝基苯磷酸盐法(PNPP)和RT-PCR方法观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的增殖、碱性磷酸酶活性和OPG mRNA,RANKL mRNA表达的影响。结果:淫羊藿总黄酮能刺激成骨细胞增殖,提高碱性磷酸酶活性,增强OPG mRNA的表达(P<0.05或P<0.01)。结论:淫羊藿总黄酮能促进成骨细胞的增殖、分化,增加OPG mRNA的表达,对RANKL的表达无明显影响。

淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的影响

目的 :观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的作用。方法 :取新生 1～ 3d SD大鼠头盖骨用酶消化法分离成骨细胞。第 3代细胞经 MTT法、茜素红染色法观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞增殖、矿化结节形成的影响。结果 :淫羊藿总黄酮 1～ 1 0 μg/ml浓度具有显著的促进成骨细胞增殖及提高矿化结节形成数量的作用。结论

淫羊藿总黄酮对摘除卵巢大鼠骨质疏松症的防治作用

用摘除卵巢法结合低钙饲料建立大鼠骨质疏松模型。淫羊藿总黄酮在 75～ 30 0mg kg剂量范围内连续给药 3个月 ,与模型组大鼠比较 ,能明显提高大鼠股骨表观面密度 (W LD)和骨密度(BMD)而不升高子宫系数及血清雌二醇 (s-E2 )水平 ,并有提高骨Ca、骨P的趋势。高剂量组大鼠血清碱性磷酸酶 (s -ALP)降低 ,股骨骨密度升高。骨形态计量学结果表明 ,高剂量组大鼠骨小梁吸收表面百分率 (TRS % )和形成表面百分率 (TFS % )等参数明显降低 ,骨小梁体积百分率 (TBV % )明显提高。

淫羊藿总黄酮对维A酸诱导大鼠骨质疏松症的防治作用

以 90 mg/ kg维 A酸结合低钙饲料诱导大鼠形成骨质疏松症 ,模型组大鼠血清碱性磷酸酶 (s-AL P)及热不稳定性碱性磷酸酶 (HIS- s- AL P)显著升高 ,股骨、胫骨骨重 (W)下降 ,骨表观线密度 (W/ L)、表观面密度 (W/ L D )、骨灰重 (Wash)、灰分表观线密度 (Wash/ L )及灰分表观面密度 (Wash/ L D )明显降低。淫羊藿总黄酮75、15 0、30 0 mg/ kg连续给药一个月 ,可降低模型大鼠的 s- AL P与 HIS- s- AL P,提高股骨 Ca、P含量。30 0 mg/ kg剂量组可增加血清钙 (s- Ca)含量 ,提高股骨和胫骨 W/ L、W/ L D以及股骨 W和基质表观面密度 (Wmatrix/ L D)

淫羊藿总黄酮含药血清促进骨髓间充质干细胞增殖与成骨性分化

目的 研究淫羊藿总黄酮(Total flavonoid extract of Eimedium sagittatum,TFE)对大鼠骨髓间充质干细胞(Mysenchymal stem cells,MSCs)增殖和成骨性分化的影响。方法将TFE和含淫羊藿总黄酮大鼠血清(Serum of rats administered TFE,SES)分别以不同浓度加入大鼠MSCs培养液中,进行细胞增殖和成骨性分化的分析。细胞增殖分析采用MTT法,成骨性分化则检测碱性磷酸酶、骨钙素、钙盐沉积量等分化指标。结果TFE直接加入培养液对:MSCs增殖无明显影响,SES则强烈刺激细胞增殖,成倍增加碱性磷酸酶染色阳性的克隆数。TFE不影响MSCs的成骨性分化,但SES显著提高碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量和钙盐沉积量。结论 淫羊藿总黄酮活性代谢产物强烈刺激MSCs的增殖和成骨性分化,是淫羊藿总黄酮抗骨质疏松症的重要机制。

淫羊藿总黄酮对成骨细胞中OPG和RANKL mRNA基因表达影响的实验研究

目的:探讨淫羊藿总黄酮对大鼠成骨细胞中骨保护素(OPG)和核因子κB受体激活因子配体(RANKL)mRNA基因表达的影响。方法:体外培养成骨细胞,分别加入含0·1、1、10、100ng/ml淫羊藿总黄酮(HEF)的培养液,48h及96h后分别提取细胞总mRNA,用RT-PCR方法分析OPG/RANKL的mRNA的表达,进行半定量分析。结果:培养48h后,与对照组比较,HEF增强了OPGmRNA的表达,有显著性差异(P<0·05或P<0·01),VOPG/VRANKL比值增大;96h后,HEF明显增强了OPGmRNA的表达,各浓度组与对照组相比,均有显著性差异(P<0·05或P<0·01),各浓度组VOPG/VRANKL比值增大,有显著性差异(P<0·05或P<0·01)。结论:淫羊藿总黄酮可能通过增加成骨细胞OPG的表达来抑制破骨细胞的分化和成熟,从而抑制骨吸收,达到治疗骨质疏松症的目的。

淫羊藿总黄酮对皮质酮诱导免疫功能低下大鼠的保护作用及配伍研究

目的探讨淫羊藿总黄酮、知母总皂苷和甘草次酸及其组合物对皮质酮所致的肾阳虚大鼠肾脏和免疫功能的保护作用。方法采用皮质酮所致的大鼠肾阳虚模型,测定不同配伍方式的淫羊藿总黄酮、知母总皂苷、甘草次酸及其组合物对其肾脏和免疫功能的保护作用。结果淫羊藿总黄酮、知母总皂苷和甘草次酸配伍使用,对皮质酮所致大鼠激素副作用的拮抗效应最佳。结论具有滋阴、温补肾阳作用的中药组合物能够有效保护外源性皮质激素作用下的肾脏和免疫功能,具有开发为新药的潜力和应用价值。

淫羊藿总黄酮对免疫功能低下小鼠的免疫增强作用

淫羊藿总黄酮对大剂量氢化考的松和羟基脲所致免疫功能低下模型小鼠免疫功能有增强作用．淫羊藿总黄酮能显著增强这两种模型的特异性免疫和非特异性免疫功能。

淫羊藿总黄酮延长果蝇寿命及其分子机制

目的在整体动物水平研究淫羊藿总黄酮(EF)延缓衰老的效果和分子机制。方法采用果蝇寿命实验,观察EF延长果蝇寿命的效果;采用果蝇全基因组寡核苷酸芯片研究EF延缓衰老的机制。结果空白对照组、V it E组、EF低剂量组及高剂量组平均寿命分别为(34.90±23.04),(35.25±23.41),(41.48±25.00)和(46.23±26.20)d,高低剂量EF均显著延长果蝇的平均寿命(P<0.01或P<0.05),高剂量EF提高平均寿命32.46%。老年果蝇呼吸链相关酶、蛋白分解酶、促凋亡基因上调2倍以上,而自由基清除酶、抗凋亡基因、内分泌免疫相关基因下调2倍以上。EF能下调老年果蝇呼吸链相关酶而上调自由基清除酶基因,下调蛋白分解酶基因,能上调促进细胞周期、抗凋亡、免疫相关基因。结论老年果蝇存在自由基产生过多而清除减少、凋亡加速、蛋白溶解过度、内分泌免疫功能低下的内在机制,EF通过减少自由基的产生,增加自由基的清除,减少蛋白分解,促进细胞增殖,恢复免疫功能、对抗凋亡而发挥延缓衰老的功效。

从基因表达谱和代谢组学角度探讨淫羊藿总黄酮延缓衰老的效应及机制

目的用系统观点从不同角度揭示淫羊藿总黄酮(EF)延缓衰老的效应及机制方法50只SD大鼠分为4、10、18、24月龄组和EF组共5组,EF组大鼠自21月龄开始灌胃EF至24月龄。摘取大鼠下丘脑、垂体、肾上腺、淋巴细胞等组织,进行基因芯片检测;取血清,利用高效液相和质谱进行代谢组检测;利用专用芯片检测淋巴细胞NF-κB信号通路相关分子基因表达。利用上述数据,建立神经网络模型,评价衰老程度和药物干预的效果。结果199个基因表达具年龄依赖特征,EF能逆转大部分基因表达,神经网络模型输出显示EF使24月龄大鼠基因表达年轻化至8～13月龄;代谢组检测共获得1 885个代谢物谱峰,已鉴定17个代谢物随增龄变化显著,EF干预使代谢物水平年轻化至18月龄;NF-κB信号通路基因表达整体水平随增龄而降低,EF使之上升,神经网络模型显示向10.5月龄靠近。结论不同层面的衰老表型首先表现为均具有年龄依赖关系;EF能逆转不同层面的增龄性变化,具有同步的表现。