深低温贮存实验犬红细胞适宜甘油浓度的选择

目的探讨深低温贮存实验犬红细胞适宜的甘油浓度。方法 16只比格犬应用戊巴比妥钠(35 mg/kg)静脉麻醉后,颈静脉放血3袋/只(200 mL/袋),共600 mL,分别标记为冰冻前组、20%复方甘油溶液组和40%复方甘油溶液组。取标记为20%、40%复方甘油溶液组各2袋犬血,以无菌导管连接器将血袋与200 mL转移袋相连接,离心移除血袋中血浆与血小板;将20%、40%复方甘油溶液160 mL缓慢滴注入只含红细胞的血袋中,轻振荡混匀,在室温中水平静置后离心挤出上清液,并各分装成5袋(25 mL/袋)并标记,分别置于-80℃冰箱贮存。冰冻前组、20%复方甘油溶液组和40%复方甘油溶液组在冰冻后d1、d35、d60、d90、d180各取红细胞解冻,分别加无菌蒸馏水裂解红细胞后,应用全自动生化仪测定犬红细胞裂解液中血钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)、钙(Ca2+)及乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖(Glu)、游离血红蛋白(FHb)、乳酸(LA)变化;应用酶标仪测定2,3二磷酸甘油酸(2,3-DPG)、衰变加速因子(CD55)、反应性溶血膜抑制物(CD59)、Na+-K+-ATP酶和6-磷酸葡萄糖酶(G-6-PD)变化。结果 20%和40%甘油-80℃保存红细胞后各贮存时间组血K+、Na+、Cl-、Ca2+、LDH、Glu、CD55分别与贮存前相互比较有明显变化(P<0.05);而FHb、LD、2,3-DPG、Na+-K+-ATP酶、G-6-PD、CD59分别相互比较无明显改变(P>0.05)。另外,应用20%甘油比40%甘油行深低温贮存红细胞,对血K+、Na+、Cl-及LDH、Glu影响程度较小,2组间分别相互比较有明显差别(P<0.05),而对血Ca2+影响程度较大(P<0.05);但对FHb、LD、2,3-DPG、Na+-K+-ATP酶、G-6-PD、CD55和CD59的影响2组无明显差别(P>0.05)。结论实验犬红细胞甘油深低温(-80℃)贮存的适宜浓度为20%;贮存期≤180 d反映红细胞质量的相关参数变化相对较小。

深低温贮存回植自体颅骨瓣的临床研究

目的:进行深低温贮存回植自体颅骨瓣的临床应用效果研究。方法:将74例患者术后骨瓣深低温(零下80℃)贮存,2~12月后予以原位回植,术中取骨标本病检,随诊1~36月。结果:74例中72例伤口Ⅰ期愈合,颅骨复位良好。病检示回植骨有正常骨细胞,与新鲜颅骨对照无骨母细胞。2例患者回植骨吸收明显,失去支撑作用而再次行修补钛网,2例感染,余下70例患者2~4月后骨缝不同程度增宽1~2 mm,6月后骨缝不再增宽,12~36月后骨缝部分变窄,达骨性愈合,而颅骨钻孔处及颞下骨缝较宽区未见骨性结构,为纤维疤痕愈合。结论:深低温贮存的自体颅骨部分骨细胞能长时间存活,回植后无免疫排异性。回植手术简便,患者容易接受,临床应用效果较好。

兰州市RhD(-)冰冻红细胞库运行情况调查分析

目的了解兰州市RhD(-)冰冻红细胞库建立以来运行情况,以便提高性改进,更好保障临床RhD(-)血型患者用血。方法调查2011—2016年本中心所有RhD(-)血液采供血数据,统计分析RhD(-)血型检出率、RhD(-)RBC临床应用情况及冰冻红细胞库发展动态。结果兰州市2011—2016年无偿献血检验合格的RhD(-)RBC,81.60%入(4±2)℃动态贮存库供应临床日常所需,18.40%制备成冰冻红细胞入RhD(-)冰冻红细胞库,RhD(-)冰冻红细胞入库量呈逐年下降趋势,解冻去甘油红细胞出库量则大幅增长。结论兰州市RhD(-)冰冻红细胞库2011—2013年运行良好,完全可以保障临床RhD(-)血型患者急救用血,2014年开始进入入不敷出的状态,需采取各种措施来保障RhD(-)冰冻红细胞库的健康发展。

冷冻保存后不同直径异体神经移植的实验研究

目的探讨经液态氮冷冻贮存后,不同直径同种异体神经移植的神经再生情况。方法取40只Wistar大鼠,雌雄不限,取10只鼠分别切取正中神经、桡神经及坐骨神经,放于-196℃液态氮贮存3周备用;其余30只鼠随机分为A、B、C 3组,均造成右侧胫神经8 mm的神经缺损模型,分别植入不同直径异体神经。A组:粗直径同种异体神经移植组;B组:等直径同种异体神经移植组;C组:细直径同种异体神经移植组。术后2、4周分别进行大体手术显微镜下观察、病理组织学及电生理学检查。结果电生理学检查:2周时,传导速度(CV)及波幅(Amp)经统计学分析,A、B、C 3组之间无显著性差异(P>0.05);4周时,CV及Amp经统计学分析,3组之间存在显著性差异(P<0.05),并且C组明显优于A组。病理组织学检查:2周时,3组均见明显髓鞘、轴突崩解和空泡变性,基底膜管完整清晰,外周见较多新生血管及巨噬细胞、淋巴细胞浸润;4周时,各组吞噬现象消失,并见较多新生神经轴突,其中C组的再生轴突数量和直径均优于其余2组;结论不同直径同种异体神经移植,对神经再生效果有明显影响,其中细直径移植组神经再生效果最佳。