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刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
1
作者
遇文婧
刘志华
+3 位作者
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
《安徽农业科学》
CAS
2014年第19期6163-6165,共3页
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并...
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。
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关键词
深绿木霉accc30153
刺激植物响应蛋白
毕赤酵母
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职称材料
刺激植物响应蛋白基因TatEpl1的克隆及原核表达载体构建
被引量:
1
2
作者
遇文婧
刘志华
+3 位作者
刁桂萍
黄颖
王金杰
王志英
《北方园艺》
CAS
北大核心
2015年第16期93-97,共5页
以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,采用PCR技术克隆到刺激植物响应蛋白基因TatEpl1,并构建TatEpl1的原核表达载体。结果表明:经测序得到的cDNA和DNA序列长度分别为417bp和487bp,接受号分别为JN695780和JN695781。以c...
以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,采用PCR技术克隆到刺激植物响应蛋白基因TatEpl1,并构建TatEpl1的原核表达载体。结果表明:经测序得到的cDNA和DNA序列长度分别为417bp和487bp,接受号分别为JN695780和JN695781。以cDNA为模板进行PCR获得TatEpl1基因片段,并将目的片段插入原核表达载体pGEX-4T-2的相应位置,获得重组表达载体pGEX-TatEpl1,并将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中获得重组菌株BL21-TatEpl1,经检测均呈阳性。
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关键词
深绿木霉accc30153
刺激植物响应蛋白
原核表达
原文传递
题名
刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
1
作者
遇文婧
刘志华
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
机构
东北林业大学林学院
黑龙江省森林保护研究所
出处
《安徽农业科学》
CAS
2014年第19期6163-6165,共3页
基金
哈尔滨市科技局青年科技创新人才项目(2013RFQXJ02)资助
中央高校基本科研业务费专项资金项目(2572014BA08)
文摘
[目的]构建刺激植物响应蛋白Epl1基因的真核表达载体,筛选多拷贝酵母转化子。[方法]以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153的cDNA为模板进行PCR获得Epl1基因片段,并将目的片段插入表达载体pPIC9K的相应位置,获得重组表达载体,并将pPIC9K-Epl1转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中,并用不同中终浓度的遗传霉素G418筛选多拷贝重组酵母菌株。[结果]对重组载体进行PCR及双酶切检测为阳性;在含有终浓度为2 mg/ml遗传霉素G418的YPD平板上筛选得到7株多拷贝的转化子GS115-Epl1,经PCR鉴定1株转化子呈阳性。[结论]Epl1基因的载体构建及多拷贝酵母转化子筛选为以后大量分离纯化Epl1蛋白并研究其功能奠定基础。
关键词
深绿木霉accc30153
刺激植物响应蛋白
毕赤酵母
Keywords
Trichoderma atroviride
accc
30153
Eliciting plant response protein
P.pastoris
分类号
S763.1 [农业科学—森林保护学]
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职称材料
题名
刺激植物响应蛋白基因TatEpl1的克隆及原核表达载体构建
被引量:
1
2
作者
遇文婧
刘志华
刁桂萍
黄颖
王金杰
王志英
机构
东北林业大学林学院
黑龙江省森林保护研究所
出处
《北方园艺》
CAS
北大核心
2015年第16期93-97,共5页
基金
国家自然科学基金面上资助项目(NSFC:31170601)
黑龙江省青年科学基金资助项目(QC2011C003)
+1 种基金
黑龙江省教育厅科学技术研究资助项目(12513024)
黑龙江省级基本科研业务费资助项目(省财政自拟项目)
文摘
以深绿木霉(Trichoderma atroviride)ACCC30153为试材,采用PCR技术克隆到刺激植物响应蛋白基因TatEpl1,并构建TatEpl1的原核表达载体。结果表明:经测序得到的cDNA和DNA序列长度分别为417bp和487bp,接受号分别为JN695780和JN695781。以cDNA为模板进行PCR获得TatEpl1基因片段,并将目的片段插入原核表达载体pGEX-4T-2的相应位置,获得重组表达载体pGEX-TatEpl1,并将其转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中获得重组菌株BL21-TatEpl1,经检测均呈阳性。
关键词
深绿木霉accc30153
刺激植物响应蛋白
原核表达
Keywords
T.atroviride
accc
30153
eliciting plant response protein
prokaryotic expression
分类号
S763.1 [农业科学—森林保护学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
刺激植物响应蛋白基因Epl1的载体构建及酵母转化
遇文婧
刘志华
王志英
古丽吉米拉米吉提
黄颖
刁桂萍
《安徽农业科学》
CAS
2014
0
下载PDF
职称材料
2
刺激植物响应蛋白基因TatEpl1的克隆及原核表达载体构建
遇文婧
刘志华
刁桂萍
黄颖
王金杰
王志英
《北方园艺》
CAS
北大核心
2015
1
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已选择
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