金线莲-苦荞混合提取物对D-半乳糖致衰老小鼠氧化损伤的改善作用

目的:研究金线莲-苦荞混合提取物(Anoectochilus roxburghii-Fagopyrum tataricum Mixed Extracts,AFME)的体外协同抗氧化活性及其抗衰老作用。方法:制备金线莲、苦荞提取物和不同复配比的AFME,通过测定其总黄酮和总酚含量、DPPH和ABTS+自由基清除率,采用等辐射分析法评价金线莲与苦荞的体外协同抗氧化活性;构建D-半乳糖衰老小鼠模型,灌胃给予AFME(1:1)低、中、高剂量(700、1400、2800 mg/kg,63 d)和阳性药(VC,100 mg/kg,63 d),评价AFME对小鼠体质量、脏器指数、肝脏组织形态、血清和肝脏中氧化损伤等方面的作用。结果:AFME具有体外协同抗氧化作用,且AFME(1:1)作用最佳;与对照组相比,模型组小鼠体重、大脑指数、胸腺指数显著降低(P<0.05),肝脏指数显著升高(P<0.01);肝组织切片可见大量肝细胞变性坏死和肝窦扩张等;血清中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活力显著降低(P<0.05),丙二醛(Malondialdehyde,MDA)显著上调(P<0.01);肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxide dismutase,GSH-Px)活力(P<0.01)及还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)显著下调(P<0.05),MDA及晚期糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGEs)显著上调(P<0.01或P<0.05)。AFME(1:1)各剂量均能不同程度地缓解模型组小鼠出现的以上异常调节,且高剂量组可显著增加小鼠体重和大脑及胸腺指数(P<0.05)、降低肝脏指数(P<0.01)、改善肝脏组织病理损伤,可显著上调血清中的SOD活力及下调MDA(P<0.01),可显著上调肝脏中的GSH-Px活力及GSH(P<0.01)和下调AGEs(P<0.05)。结论:AFME具有体外协同抗氧化作用,且AFME(1:1)作用最佳。灌胃给予AFME(1:1)(2800 mg/kg,63 d)可显著改善衰老小鼠表现出的体重、大脑指数、胸腺指数、肝脏指数异常,及肝细胞变性坏死和肝窦扩张等,对血清及肝脏中的异常氧化应激反应也具有显著的改善作用,从而可通过减少衰老小鼠体内的氧化损伤,起到抗衰老的作用。

杜仲叶与香椿叶混合提取物对谷蠹的驱避和毒杀作用研究

以谷蠹为试验对象,对不同溶剂、不同浓度杜仲叶与香椿叶混合提取物的驱避和毒杀作用进行了研究。结果表明,不同溶剂和浓度提取物驱避率显著高于对照,其中,乙醇提取物的驱避效果最好,浓度为500 mg/mL时24h的平均驱避率达71.14%,驱避等级达到Ⅳ级;此外,不同溶剂和浓度提取物也表现出一定的杀虫活性,浓度为500 mg/mL乙醇提取物24h的毒杀校正死亡率达40.19%。杜仲叶与香椿叶混合提取物对谷蠹有较高的驱避活性,且有一定的毒杀作用,具有开发利用的潜力。

葛根绞股蓝混合提取物对乙醇损伤大鼠肝脏的保护作用

目的研究葛根绞股蓝混合提取物对乙醇损伤大鼠肝脏的保护作用。方法乙醇经口灌胃建立大鼠亚急性肝损伤模型,以护肝片作为阳性对照组,受试药葛根绞股蓝混合提取物分为低、中、高(0. 33、0. 66、1. 00 g/kg)剂量组,灌胃30天。观察各组大鼠体重、自然状态情况,测定大鼠血清总胆红素、总胆固醇、低密度脂蛋白含量,测定肝脏中CYP2E1的表达,并对肝脏组织进行病理组织学检查。结果与模型组相比,葛根绞股蓝混合提取物组亚急性肝损伤大鼠的血清中总胆红素、总胆固醇、低密度脂蛋白含量显著降低。肝脏中乙醇诱导的CYP2E1表达降低。病理组织学检查可见葛根绞股蓝混合提取物中、高剂量组肝细胞脂肪变性较模型组均有减小,坏死程度下降。结论葛根绞股蓝混合提取物具有保护肝脏的作用,且其作用强度与护肝片无明显差异。

绞股蓝皂苷联合银杏叶提取物对2型糖尿病合并NAFLD大鼠脂肪肝程度的影响

目的观察绞股蓝皂苷(GPS)和银杏叶提取物(GBE)混合物对2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠脂肪肝程度的影响。方法 40只SPF级雄性SD大鼠随机分为空白组、T2DM合并NAFLD模型组,造模周期8周。将T2DM合并NAFLD模型随机分为模型组(给予同等体积的纯净水灌胃)、对照组[给予GPS 0.5 g/(kg·d)灌胃]、治疗组[给予GPS 0.5 g/(kg·d)加GBE0.1 g/(kg·d)灌胃]。继续予高糖高脂饲料,自由饮水;治疗周期为6周;实验周期14周。检测血糖(BS)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、ALT、AST。检测肝组织TG及肝脏病理学。结果空白组、模型组、治疗组、对照组BS水平分别为(5.50±0.51)mmol/L、(18.76±4.20)mmol/L、(10.78±3.38)mmol/L、(14.62±3.32)mmol/L,治疗组、对照组低于模型组(P<0.01),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组、模型组、治疗组、对照组TG水平分别为(0.81±0.11)mmol/L、(1.29±0.14)mmol/L、(0.90±0.09)mmol/L、(1.09±0.10)mmol/L,治疗组、对照组低于模型组(P<0.01),治疗组低于对照组(P<0.05)。空白组、模型组、治疗组、对照组TC水平分别为(1.39±0.13)mmol/L、(3.69±0.27)mmol/L、(2.59±0.19)mmol/L、(3.11±0.18)mmol/L,治疗组、对照组低于模型组(P均<0.01),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组、模型组、治疗组、对照组ALT水平分别为(35.12±3.34)U/L、(60.68±5.12)U/L、(42.13±4.99)U/L、(50.12±4.68)U/L,治疗组、对照组低于模型组(P均<0.01),治疗组低于对照组(P<0.05)。空白组、模型组、治疗组、对照组AST水平分别为(81.15±7.14)U/L、(168.12±10.49)U/L、(112.23±10.12)U/L、(139.12±11.68)U/L,治疗组、对照组低于模型组(P<0.01),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组、模型组、治疗组、对照组肝组织TG水平分别为(30.26±2.48)mg/G、(228.46±8.48)mg/G、(153.12±9.98)mg/G、(196.24±9.78)mg/G,治疗组、对照组低于模型组(P<0.05),治疗组低于对照组(P<0.01)。空白组为正常肝组织,模型组为重度脂肪肝,治疗组和对照组为中-重度脂肪肝,脂肪肝程度治疗组轻于对照组。结论 GPS和GBE混合物通过调整血糖、脂质代谢,减少肝组织TG沉积,保护肝细胞,达到降低T2DM合并NAFLD大鼠模型脂肪肝程度的目的。

基于转录组测序探讨白花蛇舌草-半枝莲提取物抗结直肠癌作用机制

目的:基于转录组测序探讨白花蛇舌草-半枝莲(HD-SB)提取物对结直肠癌的作用机制。方法:采用不同浓度(0、0.25、0.5、1、2、4 mg/mL)白花蛇舌草(HD)提取物、半枝莲(SB)提取物、HD-SB提取物处理3种不同结直肠癌细胞系(HT-29、HCT-116、SW620)24 h,采用CCK8检测细胞活力。选择未处理的SW620细胞(对照组)和1 mg/mL HD-SB处理24 h的SW620细胞(HD-SB组)进行转录组测序,实时PCR检测靶向无翅型MMTV整合位点家族(WNT)通路5个关键基因[无翅型MMTV整合位点家族成员11(WNT11)、无翅型MMTV整合位点家族成员2B(WNT2B)、卷曲同源物2(FZD2)、低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP6)、磷脂酶C-β4(PLCβ4)]表达。结果:与HD提取物、SB提取物相比,1、2、4 mg/mL这3个浓度HD-SB提取物处理HT-29、SW620细胞后,活力显著下降(P<0.05)。转录组测序发现,与对照组比较,HD-SB组1522个差异基因发生显著变化(P<0.05),其中有203个基因表达显著上调(P<0.05),1319个基因表达显著下调(P<0.05)。GO富集分析显示,mRNA中的差异基因主要与细胞组分、细胞表达调控、免疫反应的调控等功能相关;KEGG分析显示,差异基因参与的通路主要有代谢相关信号通路、癌症相关通路、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路、WNT信号通路等。与对照组比较,HD-SB组WNT通路的WNT11、WNT2B、FZD2、LRP6、PLCβ45个关键基因表达均显著下调(P<0.05)。结论:HD-SB提取物可抑制结直肠癌SW620细胞增殖,其机制可能与抑制WNT通路活化有关。

鱼腥草-金银花滴眼剂体内外抗病毒作用的药效学研究

[目的]了解鱼腥草和金银花混合提取物制备的滴眼剂(HLD)体内外抗I型单纯疱疹病毒(HSV-1)和Ⅲ型腺病毒(ADV-3)的效果。[方法]建立HSV-1感染Vero细胞和ADV-3感染HeLa细胞的模型,以不同数量宿主细胞出现病变效应(CPE)为观察指标,了解不同浓度HLD体外抗病毒效果。建立HSV-1感染家兔眼结膜炎模型,观察不同浓度HLD体内抗病毒效果,病变眼结膜组织进行常规病理学检查。实验中用市售阿昔洛韦滴眼剂(ACV)为对照。[结果]HLD完全抑制HSV-1和ADV-3对宿主细胞CPE的最低浓度分别为32mg/ml和64mg/ml。经HLD治疗后,HSV-1感染的家兔眼结膜病理性炎症反应明显减弱甚至消失。1g/ml、3g/ml和6g/mlHLD治疗实验性家兔眼结膜炎有效率分别为50.0%、83.3%和100%,其中6g/mlHLD与ACV滴眼剂疗效比较无显著性差异。[结论]HLD具有一定的体外抗病毒作用和较强的体内抗病毒效果,具有开发为一种新型防治病毒性眼结膜炎新药的前景。