使用新型混合模式色谱柱HPLC法测定赖诺普利原料药中的三氟乙酸

目的:使用新型混合模式色谱柱高效液相色谱法测定赖诺普利原料药中的三氟乙酸。方法使用新型混合模式色谱柱(Thermo Acclaim Mixed-Mode WAX-1,250 mm×4.6 mm×5μm);以0.15 mol/L磷酸二氢钠溶液(用6 mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.0)-甲醇-乙腈体积比80∶10∶10为流动相;柱温为30℃;流速为1.0 mL/min;检测波长为210 nm;进样量为50μL。结果:三氟乙酸在2.4985~99.9400μg/mL范围内线性关系良好(r=0.9999);检测限为0.7496μg/mL,定量限为2.4985μg/mL;加标回收率平均值为101.1%(RSD=0.59%,n=9)。结论:该方法准确、快速、方便,适用于赖诺普利原料药中三氟乙酸的测定。

混合模式色谱柱离子色谱法同时测定奶粉中的碘离子和硫氰酸根

碘离子和硫氰酸根的含量是奶粉质量检测的重要项目,但由于奶粉基体复杂,色谱分析中容易产生干扰。本文使用一种带有疏水性烷基链和弱阴离子交换官能团的混合分离模式色谱柱Acclaim Mixed-Mode WAX-1,成功实现了碘离子、硫氰酸根与样品中干扰峰的基线分离,并用紫外检测器进行了检测。实验中将奶粉样品溶于水后,用乙腈沉淀蛋白,并通过OnGuardRP前处理柱除去对色谱柱有污染的有机物质。所用淋洗液为乙腈-100mmol/L磷酸盐缓冲液(pH6)-水(体积比为45:5:50),紫外检测波长为226nm。该方法对碘离子和硫氰酸根的检出限分别为4.6μg/L和13.8μg/L,0.2mg/L标准溶液峰面积的相对标准偏差分别为1.2%(n=6)和1.7%(n=6)。该分析方法准确可靠,线性范围宽,检出限较低,为乳制品质量检测提供了可行方法。

反相/阳离子混合模式色谱柱测定氨甲环酸注射液中有关物质

目的:通过对新型填料色谱柱及流动相的筛选,建立高效液相色谱法检测氨甲环酸注射液中的有关物质,避免现行方法中离子对试剂的使用并降低盐的浓度。方法:采用Thermo Mixed-mode WCX色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以10 mmol·L^(-1)磷酸二氢钠溶液(用氢氧化钠溶液调pH至5.2±0.05)-水-乙腈(50∶5∶45)为流动相,等度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温25℃,检测波长210 nm,进样量20μL。结果:氨甲环酸与4个已知杂质的色谱峰均能良好分离。氨甲环酸、杂质B、杂质C、杂质D和杂质E在一定浓度范围内与相应的峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999);检测限分别为0.34、0.50、0.0056、0.0021、0.12μg·mL^(-1);4个已知杂质的平均加样回收率(n=9)分别为97.4%、100.5%、98.4%和96.6%,RSD分别为3.9%、0.24%、0.52%和1.4%;供试品溶液和对照品溶液在22 h内均稳定。5批样品中其他单杂检出个数及杂质总量均优于2020年版《中华人民共和国药典》方法。结论:本方法专属性强,灵敏度高,仅添加低浓度盐即实现氨甲环酸与4个已知杂质的良好分离,适用于氨甲环酸注射液中有关物质的测定。

混合模式色谱柱全水相测定阿仑膦酸钠片的含量和有关物质

目的建立一种混合模式色谱柱联用电雾式检测器测定阿仑膦酸钠片的含量和有关物质的方法。方法采用Acclaim Trinity P2色谱柱(2.1 mm×100 mm,3μm),柱温35℃,以水(A)-100 mmol·L^(-1)甲酸铵溶液(用甲酸调至pH 3.3,B)为流动相进行梯度洗脱(0~4 min,20%→50%B;4~6 min,50%→40%B;6~8 min,40%→20%B),流速为0.3 mL·min^(-1),进样量为20μL;采用电雾式检测器测定,雾化温度为50℃,采样频率为5 Hz,过滤常数为3.6 s。结果阿仑膦酸钠在0.70~1.40 mg·mL^(-1)内线性良好(r^(2)=0.9992),方法重复性的RSD为0.53%,平均加样回收率(n=9)为99.8%(RSD=1.25%);有关物质测定项下,主成分阿仑膦酸钠,杂质磷酸盐、亚磷酸盐及4-氨基丁酸分别在19.04~76.16,3.95~49.38,3.97~49.69,3.94~49.23μg·mL^(-1)内线性良好(r^(2)>0.998),且各杂质的校正因子为0.67,0.56,0.55,各杂质定量限约为主成分浓度的0.05%,杂质测定方法的平均回收率(n=9)分别为86.2%,85.4%,91.0%,且RSD<2%;3家企业生产的阿仑膦酸钠片剂中阿仑膦酸的标示含量分别为92.0%,91.5%,95.2%,各杂质含量均小于中国药典阿仑膦酸钠项下规定的限度0.5%。结论该方法操作简便,灵敏度和准确性较高,可用于阿仑膦酸钠片的含量测定和有关物质检查。

采用新型混合模式色谱柱HPLC法测定卡格列净中的碘化钾

目的:建立HPLC方法测定卡格列净中碘化钾的含量。方法:采用新型混合模式离子交换柱Thermo Acclaim^(TM)Trinity^(TM)P1(150 mm×3.0 mm,3μm),以10 mmol·L^(-1)乙酸铵缓冲溶液(pH 5.0)-乙腈(40∶60)为流动相,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长为232 nm。结果:碘化钾在0.21~4.13μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,线性回归方程为Y=0.5959X+0.0036(r=0.9996),检测限为0.1033μg·mL^(-1),定量限为0.2065μg·mL^(-1),低、中、高3个浓度下的平均回收率分别为99.2%、93.7%、95.8%,RSD分别为1.7%、1.0%、0.30%。结论:本法准确、可靠、灵敏,可用于卡格列净中碘化钾测定。

HPLC-UV-CAD同时测定卡前列素氨丁三醇注射液中主要成分含量

目的：建立高效液相色谱联用紫外和电喷雾检测器同时检测卡前列素氨丁三醇注射液中卡前列素、氨丁三醇和苯甲醇含量的方法。方法：采用资生堂CAPCELL PAK CR 1∶4混合模式色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以超纯水为流动相A,0.1 mol·L-1醋酸铵缓冲液（p H 6.2）为流动相B,甲醇为流动相C,梯度洗脱;柱温40℃;进样量10μL;流速1.0 m L·min-1;利用电喷雾检测器（charged aerosol detection,CAD）检测卡前列素和氨丁三醇,雾化室温度35℃,采样频率30 Hz;利用UV检测器检测苯甲醇,检测波长258 nm,采样频率5 Hz。结果：卡前列素的线性范围为9.38~56.2μg·m L-1（r=0.997 1,n=6）,最低检测限为0.3μg·m L-1,最低定量限为0.6μg·m L-1,方法平均回收率为104.7%（n=9）;氨丁三醇的线性范围为5.19~23.3μg·m L-1（r=0.999 2,n=6）,最低检测限为1.0μg·m L-1,最低定量限为2.5μg·m L-1,方法平均回收率为95.5%（n=9）;苯甲醇的线性范围为0.297~1.78 mg·m L-1（r=1,n=6）,最低检测限为5.0μg·m L-1,最低定量限为10.0μg·m L-1,方法平均回收率为100.1%（n=9）。实际样品测定结果与采用美国药典标准方法结果一致。结论：该方法不需衍生操作,经济、灵敏、简便、准确性和重现性良好,能够同时准确检测卡前列素氨丁三醇注射液中卡前列素、氨丁三醇和苯甲醇的含量,适用于卡前列素氨丁三醇注射液的质量控制。

Combination of reversed phase liquid chromatography and zwitterion exchange-reversed phase-hydrophilic interaction mixed-mode liquid chromatography coupled with mass spectrometry for the analysis of antibiotics and their impurities

In this study, a system involving two-dimensional, column-switching high-performance liquid chromatography （HPLC） coupled with tandem mass spectrometry （LC-MS/MS） was developed and optimized for the analysis of antibiotics and their related substances. In the first-dimensional chromatography, the analytes were separated on a zwitterion exchange-reversed phase-hydrophitic interaction （ZIC-RP-HILIC） mixed-mode column coupled with tandem mass spectrometry （LC-MS/MS）. A commonly used reversed phase LC column was employed in the second-dimensional chromatography. The mobile phase for the ZIC-RP-HILIC mixed-mode chromatography consisted of a volatile buffer that was compatible with LC-MS/MS, which enhanced the efficiency of ionization for structure elucidation. The antibiotic impurities eluted in the ion-pairing reversed phase chromatography were directly characterized by the ZIC-RP-HILIC-MS system, and the orthogonal separation of ZIC-RP-HILIC mixed-mode chromatography and reversed phase LC provided extra confidence that no impurity was missed. The efficiency of this method was demonstrated in the analysis of penicillin V potassium, oxacillin sodium, ceftriaxone sodium, and their impurities. In addition, this method is convenient for impurity profiling of antibiotics, and may be used for the analysis of other pharmaceutical ingredients.