甲3型、乙型流感病毒在MHL混合细胞中增殖的研究

〔目的〕建立MHL混合细胞瓶分离培养流感病毒的方法 ,为进行流感监测及临床快速诊断打下基础。〔方法〕采用MDCK、HEP -2、LLC混合细胞培养瓶和MDCK单一细胞培养瓶 ,同时分别接种甲 3型和乙型流感病毒标准毒株 ,并设立阴性细胞对照组 ,观察甲 3型和乙型流感病毒毒株在混合细胞瓶和MDCCK细胞瓶中的细胞病变效应 (CPE)、血凝滴度和单克隆抗体荧光染色情况。〔结果〕病毒血凝滴度分别均为 1:160 ,经 1:5稀释的甲 3型和乙型流感病毒接种MHL混合细胞瓶和MDCK细胞瓶经 3 7℃、48h培养后 ,感染甲 3型病毒细胞出现细胞拉网、团聚病变现象 ,感染乙型流感病毒细胞则出现明显细胞固缩、脱落现象 ,MDCK单一细胞培养瓶CPE强于混合细胞培养瓶 :3 7℃、72h培养后 ,检测血凝滴度 ,感染甲 3型流感病毒的MDCK细胞和混合细胞均为l:40。感染乙型流感病毒的MDCK细胞为 1:12 0 ,MHL混合细胞为 1:2 0 ;单克隆荧光抗体检测 ,感染甲 3型和乙型流感病毒的MDCK细胞和混合细胞均呈阳性。〔结论〕应用MDCK、HEP-2 ,LLC混合细胞瓶分离、培养 ,不仅可对甲型流感爆发进行流行病学监测 ,同时还可分离鉴定其它呼吸道病毒 ,利于临床诊断、治疗和预防。

改良的混合细胞因子在诱导树突状细胞中的作用研究

目的:探讨"改良"的混合细胞因子(cytokine cocktail)在诱导树突状细胞(DC)成熟和提高其迁移能力中的作用。方法:采用密度梯度离心法从人外周血干细胞(PBSC)中分离单个核细胞(PBMNC),以GM-CSF和IL-4体外诱导成未成熟DC(imDC),用电穿孔法把A549的总RNA转染入imDC。分别用"金标准"混合细胞因子和"改良"的混合细胞因子刺激DC成熟。用流式细胞术检测各组DC表面标志(CD11c、HLA-DR、CD80、CD83和CD86)和趋化因子受体(CCR5、CCR7和CXCR4)的表达;RT-PCR检测各组DC趋化因子受体(CCR2、CCR5、CCR7、CXCR3和CXCR4)和趋化因子(CCL2、CCL3、CCL5、CCL19、CCL21、CXCL10和CXCL12)mRNA的表达水平。结果:与"金标准"混合细胞因子相比,"改良"的混合细胞因子DC较高水平表达其表面标志(CD11c、HLADR、CD80、CD83和CD86)、趋化因子受体(CXCR4)和趋化因子(CCL2,CCL3、CCL5、CCL19、CCL21、CXCL10和CXCL12)。结论:与"金标准"混合细胞因子诱导相比,"改良"的混合细胞因子诱导能更好地诱导DC的成熟并提高其迁移能力。

急性混合细胞白血病11例临床分析

目的 总结急性混合细胞白血病 (MAL)的免疫表型。 方法 用流式细胞仪对本院 1999年 12月以来住院的 11例MAL病人进行免疫表型分型。 结果 B系和髓系共同表达 8例 ,B、T系与髓系共同表达 2例 ,T系与髓系共同表达 1例。

急性混合细胞白血病诊断及疗效的临床研究

目的探索急性混合细胞白血病(acute mixed lineage leukemia,AMLL)的临床和实验室特征以及疗效和预后。方法根据骨髓细胞形态学、化学染色和免疫表型结果诊断AMLL,评价疗效及影响疗效的有关因素。结果AMLL可有发热、贫血、淋巴结肿大、肝脾肿大等临床表现。半数患者属高白细胞白血病。所有患者骨髓增生明显活跃,原始+幼稚细胞占0.86(0.79～0.96)。8例患者免疫表型均为B-Ly/My+。兼顾粒、淋二系的方案诱导化疗的7例AMLL中,6例首次完全缓解(CR1),1例发生诱导化疗有关死亡,完全缓解后坚持巩固强化治疗的3例患者,已平均无病生存7(5～9)个月。结论AMLL属特殊类型的白血病,其诊断有赖于对细胞形态学、化学染色和免疫分型的综合判断。对AMLL的治疗应予兼顾粒、淋二系的诱导和巩固化疗方案,缓解率较高,但长期疗效的评价还有待进一步观察。

HLA单倍体外周血联合骨髓干细胞移植治疗急性混合细胞白血病的临床观察

目的探索急性混合细胞白血病人类白细胞抗原（HLA）单倍体造血干细胞移植治疗方法及疗效观察。方法对4例急性混合细胞白血病患者进行HLA单倍体外周血造血干细胞联合骨髓移植治疗，观察移植疗效及相关并发症。结果所有患者均成功重建造血。中性粒细胞及血小板恢复中位时间分别为16．5d（14～21d）、16．5d（15～30d）。1例PR患者移植后完全缓解，其余3例持续缓解。2例移植过程中发生急性GVHD，未观察到慢性GVHD的发生。1例患者在移植过程中发生单一的APTT延长。中位随访时间181d（129～337d），1例于移植后190d死于真菌感染，1例CR2和1例PR分别于移植后183d和129d病情复发，另1例无病存活337d。结论HLA单倍体外周血造血干细胞联合骨髓移植治疗急性混合细胞白血病切实可行，但需积累更多的资料以进一步观察疗效。

急性混合细胞白血病临床特点及免疫学表型的研究

本研究目的是分析急性混合细胞白血病(MAL)的临床特点及生物学特征,临床疗效及预后。回顾性分析了48例MAL患者,这些患者均是根据国际白血病欧洲协作组(EGIL)1995年标准而诊断的急性混合细胞白血病;同时,以同期68例急性非淋巴细胞性白血病(AML)和61例急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者作为对照。结果表明:在同期急性白血病500例中MAL发生率为9.6%,细胞形态上往往表现为AML以M1、M2亚型为主,ALL以L2亚型为主;MAL组白细胞中位数明显高于AML组和ALL组,差别有统计学意义(P<0.05),MAL组肝脾淋巴结肿大例数明显高于AML组(P<0.01),而与ALL组相比较差别无统计学意义(P>0.05);MAL组以髓系和B系抗原共表达为主,占70.9%,T系和髓系共同表达的占20.8%,T系、B系和髓系均表达的占8.3%;MAL组CD34阳性率为79.2%,明显高于AML组CD34阳性率(54.4%)和ALL组CD34阳性率(52.5%),差别均有统计学意义(P<0.01),提示MAL可能起源于造血干细胞;MAL组正常核型占32.1%,异常核型占67.9%,其中Ph染色体阳性率(25%)明显高于AML组Ph染色体阳性率(0%),差别有统计学意义(P<0.01),而与ALL组Ph染色体阳性率(16.7%)相比较差别无统计学意义(P>0.05);MAL组完全缓解率(CR率)为38.1%,明显低于AML组CR率(70.8%)和ALL组CR率(72.2%),差别均有统计学意义(P<0.01),MAL组疗效与CD34和Ph染色体的表达呈负相关。结论:MAL以髓系和淋巴系抗原共表达为主,它很可能源于造血干细胞,MAL较少见,常伴有较多的不良预后因素,缓解率低,预后差,因此须进一步探讨合理有效的治疗方案。

尿液混合细胞群检测在肾盂肾炎诊断中的应用

目的检测尿液沉渣涂片中的一种细胞团——尿液混合细胞群(mix cell cluster,MCC),研究其对泌尿系统疾病的意义。方法观察596例泌尿系统疾病患者尿液沉渣,计算MCC出现率,并通过细胞荧光染色和瑞-姬染色的方法阐明与普通白细胞团的区别以及MCC的细胞组成。结果观察发现MCC由多种细胞聚集形成。有、无临床症状的急性肾盂肾炎患者MCC检出率差异无统计学意义,但与肾小球肾炎、膀胱炎、尿道炎等的MCC检出率有统计学意义。诊断肾盂肾炎敏感性和特异性分别为93.1%和98.0%。结论MCC是一群黏附成团的细胞群体,对肾盂肾炎的鉴别诊断有重要价值。

15例急性混合细胞白血病的临床与实验研究

目的 :研究急性混合细胞白血病 (MAL)的临床特征、实验室指标、治疗及预后。方法 :对 15例MAL骨髓标本分别进行光镜细胞形态学及相关细胞化学染色观察 ,以确定其FAB类型 ,应用流式细胞仪做免疫分型检测一系列相关单抗 ,同时采用G显带技术进行核型分析 ;应用PCR基因扩增方法检测TCRδ/IgHCDRⅢ 2基因重排 ;运用急性粒细胞白血病 (AML)、急性淋巴细胞白血病 (ALL)或兼顾二者的治疗方案。结果 :MAL患者的临床表现与AML及ALL患者的差异无显著性意义 ,形态学上MAL表现为AML的多为M2a、M1、M4,表现为ALL的多为ALL L2 ;免疫分型显示MAL患者中以三系共表达者多见。另外 ,CD117、HLA DR在MAL中呈高表达。提示MAL的白血病细胞可能起源于早期造血细胞 ;核型分析可见异常染色体出现 ,但无特异性 ;基因重排显示部分患者TCRδ/IgHCDRⅢ 2为阳性 ;患者对治疗反应差 ,生存期相对较短。结论 :MAL具有独特的临床、实验室检查指标及预后。

脑脊液细胞学呈混合细胞反应的临床意义

目的探讨脑脊液呈混合细胞反应对结核性脑膜炎的诊断价值及与其它疾病鉴别的临床意义。方法回顾548例不同疾病患者脑脊液细胞学检查结果;采用粟氏细胞分类计数法计数患者不同病程时间的脑脊液细胞,并对其中73例呈混合细胞反应的病例进行统计分析。结果 73例脑脊液呈混合细胞反应的病例中结核性脑膜炎55例,阳性率87.3%(55/63),病毒性脑膜炎7例,阳性率3.5%(7/202),隐球菌性脑膜炎3例,阳性率100.0%(3/3),化脓性脑膜炎2例,阳性率4.8%(2/42),脑膜癌2例,阳性率8.7%(2/23),免疫性炎症2例,阳性率2.7%(2/74),其他疾病2例,阳性1.5%(2/131)。病毒性脑膜炎呈混合细胞反应多在发病3 d以内,最长达7 d;隐球菌性脑膜炎呈混合细胞反应持续时间较长;化脓性脑膜炎在早期呈中性粒细胞反应,在短期治疗后才会出现混合细胞反应;非感染性疾病呈混合细胞反应时细胞数和中性粒细胞比例较少,脑膜癌还可找到恶性细胞。结论脑脊液细胞学呈混合细胞反应多见于结核性脑膜炎,但仍需结合病史、病程作出判断,且脑脊液细胞学动态观察的鉴别意义较大。

急性混合细胞性白血病临床观察与分析

目的 :分析急性混合细胞性白血病的生物学特点、临床疗效及预后。方法 :结合细胞化学、免疫学及染色体检查 ,根据EGIL标准诊断急性混合细胞性白血病。结果 :急性混合细胞性白血病的构成比为 2 % ,以T系、髓系抗原共同表达为主 ,异常核型占 40 % ,5例患者治疗完全缓解 3例 ,无病生存期 <10个月 ,易浸润中枢。结论 :急性混合细胞性白血病的诊断以免疫学检查为主 ,治疗效果差 ,生存期短。

儿童急性混合细胞性白血病胞浆抗原检测的意义

为分析儿童急性混合细胞性白血病 (AMLL)免疫表型、胞浆抗原表达特点 ,用间接免疫荧光法对 6 7例儿童急性白血病 (AL)进行免疫分型 ,发现AMLL 7例 ,其中 5例T/BAMLL ,T/髓细胞 (M)及B/MAMLL各 1例。 2例T/BAMLL结合膜抗原胞浆抗原表达诊断。结果表明免疫表型、胞浆抗原检测对儿童AMLL的诊断具有重要意义。

流式细胞术诊断急性混合细胞白血病临床意义研究

目的探讨流式细胞术对混合细胞白血病(MAL)诊断的临床意义。方法采用流式细胞仪和几组三色荧光标记抗体检测208例初发急性白血病患者的免疫表型。结果 208例初发急性白血病患者,混合细胞白血病(MAL)14例,所占比例为6.7%,B/髓系共表达10例(71.4%),T/B共表达3例(21.4%),T/髓共表达1例(7.1%);71例FAB分型诊断为急性淋巴细胞白血病(ALL),纯淋系抗原表达31例,淋系伴髓系抗原表达(My+ALL)40例(56.34%);123例FAB分型诊断为急性髓细胞白血病(AML),纯髓系抗原表达79例,髓系伴淋系抗原表达(Ly+AML)44例(35.77%);14例MAL,CD79a、cCD3及MPO表达比例为100%、100%和81.8%。14例MAL中11例表达CD34(78.6%),2例白血病细胞部分弱表达,1例不表达。11例淋系和髓系混合细胞白血病中,CD117的表达率为81.8%(9/11)。结论对于MAL、My+-ALL、Ly+-AML等,单纯依靠细胞形态学均不能对其进行准确诊断,流式细胞术免疫分型弥补了FAB分型的不足,减少了误诊率,可对白血病细胞进行准确的分型诊断,为临床诊断、选择合理的治疗方案等提供了科学的依据。

混合细胞型肝癌临床特点分析

目的混合细胞型肝癌是原发性肝癌的一种较少见亚型,本文通过对其临床特点的分析与总结以加深对此种疾病的认识.方法回顾分析我院1998年1月～2001年1月经手术治疗的45例混合细胞型肝癌病人的临床资料,并与31例胆管细胞癌和2758例肝细胞癌患者的临床资料进行比较.结果45例混合细胞型肝癌患者的HBsAg和AFP的阳性率及肝硬化合并率分别为76%、56%、71%,与胆管细胞癌患者相及肝细胞癌患者相比,和肝细胞癌患者更为相近,而合并门静脉癌栓的比率为78%,明显高于肝细胞癌和胆管细胞癌患者.混合细胞型肝癌、胆管细胞癌、肝细胞型肝癌的1、3、5年生存率分别为58%、12%、3%,67%、17%、10%,和78%、55%、44%.结论混合细胞癌具有男性发病率、HBsAg阳性率、肝硬化合并率、癌栓发生率、淋巴结转移率高,预后差的特点.

Daratumumab成功治疗急性混合细胞白血病异基因造血干细胞移植后复发1例

复发仍然是高危急性白血病患者造血干细胞移植失败的主要原因。过去几十年,单克隆抗体治疗复发白血病取得了一定进展。Daratumumab作为一个新研发的人源化单克隆抗体,可用于治疗难治复发多发性骨髓瘤,其靶点为骨髓瘤细胞表面CD38抗原。CD38也广泛表达于白血病细胞。本文首次报道了采用Daratumumab成功治疗1例25岁青年男性急性混合细胞白血病异基因造血干细胞移植后复发的案例,为白血病移植后复发提供了一种有效的治疗手段。

混合细胞性白血病诊断、治疗、预后及生物学特点1例报道

目的探讨急性混合细胞白血病AMLL)的临床、治疗、预后及其生物学特点,认识AMLL的诊断和治疗过程。方法通过骨髓形态学、细胞组化染色、流式免疫学分型明确诊断1例在多系间反复转化的急性混合细胞性白血病,结合文献进行分析讨论。结果该病例诊断过程复杂,治疗采用兼顾急性髓细胞白血病(AML)及急性淋巴细胞白血病(ALL)的化疗方案,但患者病情反复,治疗效果差。结论 AMLL具有独特的临床、生物学及预后特征,期望出现新的更加有效治疗方案。

成人急性混合细胞白血病的临床研究

目的 分析成人急性混合细胞白血病 (AMLL)的免疫表型特征、细胞遗传学异常、临床疗效以及预后因素。方法 采用全血单克隆抗体直接免疫荧光标记法及流式细胞术检测细胞表面抗原和胞浆内抗原 ,P170检测采用全血单色间接免疫荧光标记法 ,染色体核型分析采用短期细胞培养胰酶消化G显带技术。结果 ① 10例AMLL中 5例(5 0 % )为B淋巴细胞系和髓系两系抗原共同表达 ,3例 (30 % )为T、B淋巴细胞系和髓系三系抗原共同表达 ,2例 (2 0 % )为T淋巴细胞系和髓系两系抗原共同表达。②本组 8例CD34 阳性 ,占 80 % ;4例进行了P170检测 ,阳性 2例 (5 0 % ) ;6例进行了染色体检查 ,3例无分裂象。在可供染色体核型分析的 3例中 ,正常核型 1例 (33.3% ) ,异常核型 2型(66.7% )。③本组接受化疗的 8例中 ,仅 1例获得完全缓解 (CR) ,CR率为 12 .5 % ,1例 (12 .5 % )获得部分缓解 (PR) ,其余 6例 (75 .0 % )未缓解 (NR) ,总有效率为 2 5 .0 %。 5例发生较严重的感染 ,感染发生率为 62 .5 %。结论 AMLL以B淋巴细胞系和髓系两系抗原共同表达者最多 ,临床治疗CR率低 。

富于肿瘤细胞的混合细胞型霍奇金淋巴瘤1例并文献复习

目的探讨富于肿瘤细胞的混合细胞型霍奇金淋巴瘤(mixed cellularity Hodgkin lymphoma,MCHL)的临床病理学特征、诊断与鉴别诊断。方法对1例13岁患儿颈部肿大淋巴结进行临床病理学、免疫表型分析并复习相关文献。结果镜下见淋巴结结构破坏,背景为淋巴细胞、嗜酸性粒细胞及组织细胞,其间混有大量单核的霍奇金细胞和多核Reed-Sternberg细胞(HRS),可见典型双核的RS细胞。免疫表型:肿瘤细胞表达CD30、CD15、PAX-5、MUM1,不表达CD20、ALK,Ki-67增殖指数较高。CD2、CD3、CD5、CD7阳性的T细胞包绕HRS细胞。原位杂交检测EBER阴性。结论富于肿瘤细胞的MCHL临床罕见,易误诊,提高对该类肿瘤的认识对指导临床治疗具有重要意义。

曲细精管片段培养法和混合细胞共培养法对小鼠生精细胞的增殖分化效应

目的：探讨曲细精管片段培养法和混合细胞共培养法对体外培养生精细胞的增殖、分化效应。方法采用曲细精管片段培养法和生精细胞-支持细胞共培养法对7～8d小鼠生精细胞进行体外培养，通过细胞形态学观察、细胞存活率和精母细胞特异性基因P19、单倍体精子细胞特异性基因TP1检测及染色体倍性分析，比较两种培养法生精细胞的存活、增殖以及分化情况。结果两种培养方法均可见生精细胞增殖，P19／TP1比值呈降低趋势，并可获得少量带鞭毛的精子细胞和长形精子，但共培养法生精细胞增殖速度及存活时间均优于片段法。体外培养各阶段，共培养法所获细胞数和存活率及单倍体精子细胞形成率均显著高于片段培养法（P＜0．05）；P19／TP1比值显著低于组织片段培养法（P＜0．05）。结论生精细胞-支持细胞共培养法的细胞增殖速度、存活率、存活时间及单倍体精子细胞形成率均优于曲细精管片段培养法，是较为理想的小鼠生精细胞体外培养方法。