南瓜汁混合酶解工艺研究

研究了南瓜汁混合酶解的最佳生产工艺。在单因素试验的基础上应用响应曲面法得出南瓜汁混合酶解最佳工艺条件:果胶-纤维素酶0.05%,α-淀粉酶0.65%,糖化酶0.81%,酶解温度50℃,酶解时间2 h。此工艺条件下,南瓜汁可溶性固形物含量为5.46%。

酪蛋白双酶复合酶解与混合酶解作用研究

目的:研究木瓜蛋白酶与菠萝蛋白酶复合酶解、混合酶解酪蛋白的作用,比较不同水解方式的作用效果。方法:分别进行两种蛋白酶单因素水解试验,寻找各种酶的最适水解条件;在此基础上进行复合酶解与混合酶解试验,测定水解度。结果:复合酶解水解度与加酶顺序有关,也与加新酶前是否灭活旧酶有关,对于相同组合,灭活酶的水解度比不灭活酶的低。混合酶解的水解度与水解时间有关,最适水解时间与单酶最适水解时间最长的相当;混合酶解水解度高于复合酶解。结论:本试验条件下,不灭活酶组合水解度比灭活酶的高,混合酶解水解度比复合酶解的高。

双酶混合水解玉米皮渣制备阿魏酰低聚糖研究

以玉米皮渣为原料,采用酶解方法制备阿魏酰低聚糖(Feruloyl oligosaccharides,FOs),通过比较不同酶解条件下阿魏酰低聚糖产量的差异及不同酶解方式下玉米皮渣细胞壁结构的变化,确定酶解阿魏酰低聚糖生成的方法,并优化获得玉米皮渣中阿魏酰低聚糖的最佳酶解条件。结果表明:纤维素酶和木聚糖酶混合酶解可使玉米皮渣细胞壁出现溶洞,可有效提高阿魏酰低聚糖产量;经单因素和响应面实验确定双酶混合酶解的最佳条件为混合酶的添加量为15.7 g/L,混合酶中纤维素酶添加比例为70%,酶解1 h,玉米皮渣底物添加量为100 g/L,在此条件下FOs产量最高,为1008.43μmol/L。本研究为双酶混合酶解制备玉米皮渣FOs提供理论依据。

天龙混合酶最佳酶解工艺研究

研究天龙混合酶的最佳酶解工艺,使这一动物类中药得到更好的发展利用。选择"酶解温度、酶解时间、pH值、加酶量"四个因素,设计L_(16)(4)~4正交表进行正交试验,以蛋白质水解度为指标,确定天龙混合酶的酶解最佳条件。正交试验得A_4B_4C_4D_4的蛋白质水解度最高,由正交试验得到45℃下、pH值=8.5、培养时间5 h、加酶量2500U为最佳工艺,并确定影响程度大小:酶解温度>酶解pH值>酶解时间>加酶量。

酶解鸡蛋清小肽混合物对小鼠免疫功能的影响

本研究考察了鸡蛋清经Flourezyme(FL)、Alcalase(AL)、胃蛋白酶(PE)、胰蛋白酶(TR)或木瓜蛋白酶(PA)5种酶水解后制备的5种酶解小肽混合物(MSEE)对小鼠体外免疫功能的影响。采用体外培养,细胞吞噬实验和细胞增殖实验,观察不同种类及不同剂量的MSEE对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力和脾细胞增殖能力的影响。结果发现,不同种类的MSEE均能显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)提高巨噬细胞的吞噬能力,促进淋巴细胞的增殖,且表现出一定的剂量效应关系;1mg/mL不同MSEE的促吞噬能力大小顺序为:FL>PA>AL>PE>TR>对照,促脾淋巴细胞增殖能力大小顺序为:FL>PE=AL>TR>PA>对照(无丝裂原),FL>AL>PA>TR>PE>对照(LPS刺激),FL=AL>PE>PA>对照>TR(ConA刺激)。这些结果表明,5种MSEE均具有免疫增强活性,其中FL的活性最强。

蛋白质酶解混合物的动态修饰毛细管电泳-质谱联用分析

利用羟丙基纤维素溶液动态涂层技术修饰毛细管管壁 ,改善了分离效率 .在不影响质谱检测的条件下 ,将动态涂层毛细管电泳与质谱检测联用 ,有效地提高了对蛋白质的鉴定能力 .将该技术应用于对复杂蛋白质样品的酶解产物的分析鉴定 。

酶解鸡蛋清寡肽混合物对小鼠体外免疫功能的影响

考察了用Alcalase(AL)、Flourezyme(FL)、木瓜蛋白酶(PA)、胃蛋白酶(PE)和胰蛋白酶(TR)酶解鸡蛋清制得的5种酶解鸡蛋清寡肽混合物(MOEE)对小鼠体外免疫功能的影响.采用体外培养,细胞吞噬试验和细胞增殖试验,观察同一MOEE不同剂量以及同一剂量不同MOEE对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和脾细胞增殖能力的影响.结果发现,所有MOEE均能显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,促进小鼠脾淋巴细胞增殖,且表现出一定的剂量效应关系.其中,1.0 mg/mL不同MOEE促进巨噬细胞吞噬能力(PI)大小顺序为:FL1-5>PA1-5>TR1-5>AL1-5>PE-5>对照;促脾淋巴细胞增殖能力(SI)大小顺序为:FL1-5>AL1-5>PA1-5>TR1-5>PE1-5>对照(无丝裂原),FL1-5>PA1-5>TR1-5>AL1-5>PE1-5>对照(LPS刺激),FL1-5>TR1-5>PE1-5>PA1-5>AL1-5>对照(ConA刺激).结果表明,所有MOEE都具有免疫增强活性,且以FL1-5的活性最强.

酶解水牛奶制备抗凝血肽的工艺研究

目的:本文以新鲜水牛奶为原料,研究木瓜蛋白酶、中性蛋白酶及碱性蛋白酶复合酶解、混合酶解水牛奶的作用,比较不同水解方式的作用效果;并采用凝血酶滴定改进法测定水解液抗凝血活性。方法:分别进行三种蛋白酶单因素水解实验,确定各种酶的最适水解条件;在此基础上进行复合酶解与混合酶解实验,测定水解度和抗凝血活性。结果:木瓜蛋白酶的最适水解条件为:水解温度60℃、水解时间2.0 h、p H5.0、料水比1∶2(v/v)、酶用量6000 U/(m L底物);中性蛋白酶的最适条件为:水解温度40℃、水解时间3.0 h、料水比1∶2(v/v)、p H6.0、酶用量6000 U/(m L底物);碱性蛋白酶的最适条件为:水解温度50℃、水解时间4.0 h、料水比1∶2(v/v)、p H8.0、酶用量6000 U/(m L底物)。复合酶解法制备的水解液其抗凝血活性均高于混合酶解,最高抗凝血活性为52.0 ATU/m L。结论:本实验条件下,加酶组合为"中性蛋白酶-木瓜蛋白酶-碱性蛋白酶"的复合酶解制备的水解液具有最高的抗凝血活性,即52.0 ATU/m L。

中药天龙发酵前后与酶解提取物抗肿瘤效果比较研究

目的:比较不同方法处理的天龙水提物对乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用。方法:使用酶解法和甲基噻唑蓝(MTT)法,以蛋白质水解度、对乳腺癌细胞MCF-7的抑制率为指标,评价混合酶对发酵前后天龙粉的水解效果,以天龙粉水提物作为对照组,比较天龙粉酵解物和发酵前、后分别经胰蛋白酶和弹性蛋白酶混合酶解水提物对乳腺癌细胞的抑制作用。结果:混合酶对天龙粉的水解度(52.46%)大于对发酵天龙粉的水解度(10.71%);天龙粉混合酶解水提物对乳腺癌细胞的抑制率为正值,随浓度成正相关,天龙粉与发酵天龙粉酶前、酶后水提物对乳腺癌细胞的抑制率为负值。结论 :天龙粉混合酶解水提物对乳腺癌MCF-7细胞起到抑制作用,天龙粉与发酵天龙粉酶前、酶后水提物对乳腺癌细胞无抑制作用。

酶法制取南瓜汁的工艺研究

为提高南瓜的出汁率和营养物质含量,采用混合酶法制备南瓜汁。首先进行了单因素试验,确定了果胶酶、纤维素酶、糖化酶各自酶添加量、最适pH、温度和时间。然后采用L(934)正交试验,确定了混合酶的最佳配比为果胶酶0.03%、纤维素酶0.7%、糖化酶0.04%;在此基础上,通过L(934)正交试验,得到混合酶解最佳工艺参数为体系pH4.5、温度50℃、时间3h。在此最佳酶解条件下,获得出汁率为88.4%、总糖含量为原料重量的24.13%、可溶性固形物含量为11.48%的南瓜汁。

酶制剂在啤酒糖浆生产上的应用

玉米、大走、大米等原料经过多种酶制剂作用，经脱色、浓缩可生产各种啤酒糖浆未代替辅料和麦芽，以大麦为原料，采用大麦β-淀粉酶为主体的多酶水解，所制得的糖浆质量最优。多酶水解分为三步：采用高温淀粉酶液化，采用大麦β-淀粉酶和蛋白酶混合酶解，最后用液体糖化酶补充糖化，啤酒糖浆能为啤酒增加产量和品种，降低成本，简化操作，是啤酒今后的发展方向之一。

罗非鱼抗凝血口服液的制备及其稳定性的初步研究

采用星点设计-效应面法分别优化风味蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和木瓜蛋白酶水解罗非鱼肉的工艺条件。然后,在每种酶各自最佳条件下对罗非鱼肉进行混合酶水解,以凝血酶滴定改进法测定混合水解液的抗凝血活性。实验结果表明,在胰凝乳蛋白酶的最佳条件下,“风味蛋白酶-胰凝乳蛋白酶-木瓜蛋白酶”混合酶解组合的抗凝血活性最高,其活性为48.0 ATU/mL。通过添加适量的防腐剂和矫味剂将酶解液制备成具一定抗凝血活性和口感风味良好的口服液。口服液的稳定性试验的结果表明:口服液需要在pH值在6.5~7.0之间和4℃的低温环境下储存。

柑橘皮渣超声波辅助酶解工艺的建立及其优化

以柑橘皮渣为原料,首先通过单因素实验研究果胶酶、纤维素酶和淀粉酶等混合酶添加量和配比、酶解时间、温度和pH值以及超声波功率等因素对皮渣中碳源酶解效率的影响。以此为基础,采用响应曲面法中Box-Behnken设计研究不同酶解参数组合(混合酶量—超声波功率—酶解温度—酶解时间组合)对柑橘皮渣酶解后还原糖含量的影响并建立四元二次方程模型以进行参数优化。结果显示,当混合酶量为0.54 mg/g、超声波功率为385 W、酶解温度和时间分别为49.2℃和4.3 h时,柑橘皮渣酶解滤液中还原糖含量最高为58.91 g/L,模型回归系数高(R^2=0.9213)且预测精确(相对误差为2.23%)。因此,此优化结果可为利用柑橘皮渣开发高效发酵型碳源提供数据支撑。

海参肽对成纤维细胞的作用及与其他抗皱成分的比较

皮肤老化问题越来越受到人们的重视,而伴随着蓝色经济的发展,海洋生物资源也得到了开发利用。在前期研究的基础上以混合酶解方法制备海参肽,通过MTT(噻唑蓝)方法研究海参肽对NIH/3T3细胞及胶原蛋白分泌量的作用,并与其他抗皱成分进行比较:其中海参肽质量浓度为200μg/m L时可以显著促进NIH/3T3细胞生长,增殖率为33.9%±13.8%;海参肽质量浓度为800μg/m L时,对NIH/3T3细胞胶原蛋白的分泌有显著的作用,羟脯氨酸含量为(1.96±0.16)μg/m L;燕麦多肽、蜗牛原液、多效亮肤混合液对NIH/3T3细胞的最大增殖率依次为14.2%±8.3%、26.7%±12.0%、26.2%±12.1%;表明海参肽较其他三种成分有更明显的促进NIH/3T3细胞增殖的作用。

苦荞多肽营养饮料的研究

本试验以苦荞麦为原料,采用酶解工艺将碱法浸提得到的苦荞复合蛋白水解为多肽液。并以酶解后多肽浓度和水解度为指标,确定出制备苦荞多肽液的最佳工艺条件。试验表明:通过先后加入Flavourzyme复合风味蛋白酶与AlcalaseFoodGrade水解蛋白酶对苦荞复合蛋白进行混合阶段水解的效果最好;并采用单因素及正交试验确定出苦荞多肽营养饮料的最佳配方。

酪蛋白抗凝血口服液的制备及其活性的初步研究

以酪蛋白为原料,采用木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶对酪蛋白进行混合酶水解,制备酪蛋白酶解液。采用正交试验优化4种酶酶解酪蛋白的生产工艺为:底物浓度为15%,四种酶浓度(g/mL)混合比例为1:1:1:2(V/V),水解温度为50℃,水解时间为4 h、pH为6.5。按照该工艺制备的酶解液抗凝血活性为40 ATU/mL。通过添加适量的防腐剂和矫味剂将酶解液制备成具有一定抗凝血活性和口感风味良好的口服液,进行了口服液的稳定性试验。