绍兴黄酒混浊蛋白的分离鉴定及其氨基酸组成、二级结构分析

采用双向电泳及基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱法分析了绍兴黄酒混浊蛋白的主要组成及来源,结果表明:绍兴黄酒混浊中的蛋白质主要包括来源于小麦类燕麦蛋白b1、类燕麦蛋白、二聚-α淀粉酶抑制剂、病程相关蛋白、病程相关蛋白-4、几丁质酶II,以及来源于水稻的类燕麦蛋白和β-淀粉酶。高效液相色谱与傅里叶变换红外线光谱分析法分析绍兴黄酒上清蛋白质和混浊蛋白质的氨基酸组成与二级结构发现,绍兴黄酒混浊蛋白中谷氨酸含量最高,占总氨基酸含量的20.48%,疏水性的氨基酸含量比酒体蛋白高24.2%。高α-螺旋含量、低β-折叠和无规则卷曲是黄酒混浊中蛋白质的主要结构特征。

啤酒冷混浊蛋白的分析及硅胶、PVPP吸附效果比较

利用SDS-PAGE电泳对3种不同品牌的啤酒中的冷混浊蛋白进行分析,结果表明,引起啤酒冷混浊的蛋白分为醇溶性蛋白和水溶性蛋白。其中醇溶性冷混浊蛋白占总含量的70%左右,分子量在43～50 kDa之间,水溶性冷混浊蛋白的分子量在8～14 kDa之间。另外,比较硅胶、PVPP的吸附效果,经二者处理后的样品浊度都有明显的下降,但经硅胶处理后的样品浊度更低一些。比较硅胶吸附前后样品的泡持时间没有很大的变化,而经PVPP处理后的样品泡持时间有一定的改变。因此,在啤酒生产过程中添加硅胶,能够有效地除去啤酒冷混浊蛋白,而且不会影响啤酒的泡持性。

澄清剂对黄酒混浊蛋白去除效果的研究

研究了单宁、硅胶和Polyclar R Brewbrite等澄清剂对黄酒混浊蛋白特异性去除的效果,并通过采用N-三(羟甲基)甘氨酸-十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、基质辅助激光解析电离飞行时间串联质谱,研究了黄酒混浊蛋白及不同澄清剂吸附蛋白的分子量、蛋白质种类及来源,并比较了澄清剂处理前后酒样隆丁区分和非生物稳定性的变化。结果表明:黄酒混浊蛋白的主要成分为类燕麦蛋白和二聚α-淀粉酶抑制剂,主要来源于小麦,几种澄清剂对二聚α-淀粉酶抑制剂都有一定的吸附作用,且处理后的酒样稳定性得到提高,其中以单宁效果最为明显。

黄酒混浊蛋白组成成分及来源分析

采用双向电泳对混浊蛋白进行分离,并结合基质辅助激光解析电离-飞行时间串联质谱法鉴定混浊蛋白的主要种类及来源。结果表明,黄酒混浊蛋白质来源于小麦的有类燕麦蛋白A、类燕麦蛋白B、类燕麦蛋白前体、二聚α-淀粉酶抑制剂和胰蛋白酶前体等,来源于水稻的有假定蛋白OSJ_04535、假定蛋白OSI_17439和蛋白H0313F03.18。通过N-三(羟甲基)甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳,对黄酒酿造原料及黄酒发酵过程中蛋白质的主要组成进行分析,结果表明黄酒混浊蛋白主要来源于大米和麦曲,并且在发酵过程中难以被微生物降解,存在于发酵的整个过程中。

利口葡萄酒混浊物结构及其蛋白组分鉴定分析

为探究利口葡萄酒贮藏期混浊物的形成原因,以白葡萄品种为原料酿制利口葡萄酒,通过扫描电子显微镜、X射线衍射和傅里叶红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy, FT-IR)进行利口葡萄酒混浊物形貌和结构分析,并采用液相色谱-串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)对混浊物蛋白进行鉴定。结果表明,利口葡萄酒混浊物由无数不规则、边缘光滑的小颗粒(非晶态)堆积组成,FT-IR显示混浊物中可能含有蛋白质和酚类物质,由化学方法检测出混浊物中蛋白含量为(114.70±0.51) mg/g,显著高于总酚和总糖含量(P<0.05);经LC-MS/MS鉴定发现,混浊物中几丁质酶、类甜蛋白和非特异性脂质转移蛋白的含量分别占蛋白总量的6.10%、5.06%、0.11%,3类蛋白是利口葡萄酒中的病程相关蛋白,可能是造成利口葡萄酒混浊的主要蛋白。该研究可为探究利口葡萄酒混浊机理和解决利口酒混浊问题提供理论参考。

苹果汁中与混浊有关的活性蛋白质的分离纯化

采用疏水作用色谱PhenylSepharoseCL-4B和固相萃取C18柱分离纯化了浓缩苹果汁和鲜榨苹果汁中与混浊有关的活性蛋白质。经过SDS-PAGE,结果表明浓缩苹果汁和鲜榨苹果汁中的活性蛋白质为同一类蛋白,均为疏水性蛋白质,其分子量为36kDa。

啤酒中的混浊活性蛋白质

啤酒的成分复杂，稳定性不强，易产生混浊沉淀。最常见的啤酒非生物混浊是蛋白质混浊。形成蛋白质混浊的原因在于啤酒中有两种主要成分，即蛋白质和多酚物质。在啤酒中，某些多酚物质（“混浊活性多酚”）可以与蛋白质（“混浊活性蛋白”）结合形成复杂的复合物，且二者存在一定的比例关系，降低其中任一成分的比例，都可有效减少非生物混浊的发生。

高效凝胶过滤色谱法测定啤酒中混浊活性蛋白质的研究及应用

建立了啤酒中混浊活性蛋白质的提取制备方法和基于高效凝胶过滤色谱的蛋白质分析方法,对混浊活性蛋白进行了系统的分子量分布特点及定量分析,并将其应用在了啤酒非生物稳定性及啤酒样品分析领域高效凝胶过滤色谱法解决了混浊活性蛋白分子量及含量难以测定的问题,对啤酒生产蛋白质分子量的控制也具有重要的指导意义结果表明混浊活性蛋白的分布区间为23.4-150.0 kDa、5.7-23.4 kDa、1.0-5.7 kDa和05-1.0kDa啤酒样品中蛋白质含量最高的分子量包括4.8 kDa,2.4 kDa,3.9 kDa和128.8 kDa方法相对标准偏差为0 3％-2.0％,不需混浊活性蛋白提取制备过程中的透析除盐处理,大大简化了操作流程方法简便快速,准确度高,重复性好最后应用该方法对啤酒稳定剂硅胶、酿造单宁和脯氨酸蛋白酶的作用效果进行了分析研究.结果显示硅胶主要去除0.5-1.0 kDa,酿造单宁去除32.0-55.0kDa,而脯氨酸蛋白酶主要去除51.6-150 0kDa部分蛋白质.

标准曲线法测混浊活性蛋白初探

多酚蛋白复合引起的混浊现象是啤酒,果汁需要着重解决的问题之一。本文探讨了标准曲线法测定啤酒,果汁中混浊活性蛋白的可行性。结果表明,PVP的浓度在0.000～0.100g/L范围时,反应产物的浑浊度与PVP浓度成良好的线性关系。

饮料中的蛋白—多酚混浊

了解混浊活性 (HA)蛋白和多酚的性质与相互作用 ,有助于生产出更好的饮料产品 ,使用更好的分析方法及稳定手段。

黄酒蛋白混浊的形成机理探讨和防治

任何一种酒类和饮料都是由多种以上物质组成的复杂溶液,经成品包装后在空气、光线、残留氧等因素的影响下,不断地起着缓慢的物理和化学变化,而随之使溶液的酸碱度(pH)氧化还原势(rH)发生变化,这些复杂的变化有一部分是人们所厌恶的;其中酒类长期贮放会发生的外观失光和混浊现象是令消费者和生产企业都头痛的问题。因此。

啤酒蛋白质混浊的成因及工艺措施

在啤酒非生物混浊中,90%以上是蛋白质混浊。引起蛋白质混浊的主要因素:高分子蛋白质、多酚物质、氧。它们主要来源于麦芽、酒花以及工艺过程。蛋白质混浊分为:真正蛋白质混浊、冷混浊、永久混浊。一、啤酒蛋白质混浊的成因1.真正蛋白质混浊瓶装啤酒在杀菌后出现片状絮状物,它实际上是成品啤酒中含有多量的热凝固蛋白。是由于麦芽溶解差。

啤酒非生物混浊的产生与控制

目前中国的啤酒工业竞争空前激烈。要赢取消费者的青睐,优质的品牌、良好的信誉是必不可少的。啤酒的外观质量(清亮透明、无悬浮物和渣子)同样决定着一个啤酒品牌的市场,失光、浑浊的啤酒是永远无法占领市场的。啤酒的混浊分为生物混浊和非生物混浊。对于生物混浊,可通过严格控制发酵过程的工艺卫生、加强刷洗力度和严格的巴氏杀菌来控制。而非生物混浊则是啤酒自身的非生物稳定性差所引起的。引起啤酒非生物混浊的原因有许多种:如糊精混浊、草酸钙混浊、金属离子混浊(硅酸盐沉淀)β-葡聚糖凝胶沉淀、蛋白质混浊、多酚混浊等。

饮料中蛋白质—多酚混浊的研究进展

对饮料中混浊活性(Haze-active, HA)多酚和混浊活性(Haze-active, HA)蛋白及其相互作用的研究作一阐述,并简要论述了饮料的稳定机理和几种常用澄清剂在饮料澄清中的应用。

不同类型硅胶处理对啤酒中混浊活性蛋白和泡沫活性蛋白影响的研究

以两种水凝胶型硅胶和3种干凝胶型硅胶为研究对象,通过不同水平的硅胶(0、50、300、1000mg/L)处理,做中试试验,比较不同类型硅胶对啤酒中混浊活性蛋白质和泡沫活性蛋白质的影响。试验结果表明,5种硅胶不同水平处理及不同硅胶之间对啤酒中混浊性蛋白存在极显著影响(p<0.01)。其中,干凝胶型硅胶比水凝胶型硅胶能更好地去除啤酒中混浊活性蛋白。在H-16、A-100和X-12使用量较低时,泡沫活性蛋白略有增加;在上述物质使用量高的情况下泡沫活性蛋白降低。在D-300和BG-5处理条件下,泡沫活性蛋白含量降低;除BG-5外,其它4种硅胶处理对泡沫活性蛋白均无显著影响(p<0.05)。用杜肯(Duncan)新复极差法分析中试试验数据,硅胶处理对混浊活性蛋白存在极显著影响(p<0.01),泡沫活性蛋白虽略有下降,但差异不显著。

提高啤酒非生物稳定性的探讨

介绍了啤酒的非生物混浊的几种现象。

啤酒生产过程中溶解氧的控制

氧是造成啤酒各种质量问题和风味不稳定的关键原因,在啤酒生产过程中,氧极易与啤酒中的有机化合物发生氧化反应生成氧化物,氧的溶入,是啤酒中含有巯基的蛋白质和多肽收到氧化形成双硫键促进蛋白质和多肽聚合,引起大、高分子蛋白质混浊,多酚物质受到氧化、聚合产生胶体混浊加深色泽和形成涩味,后苦味、辛辣味,氧的存在使α-乙酰乳酸氧化脱羧形成双乙酰,引起酒花不饱和帖烯化合物氧化生成饱和烃,丧失酒花新鲜香气,