基于网络药理学及实验验证探讨清化祛瘀健脾方治疗溃疡性结肠炎的作用机制

[目的]旨在从网络药理学和实验验证的角度探讨清化祛瘀健脾方治疗溃疡性结肠炎的潜在药理机制。[方法]通过网络数据库筛选清化祛瘀健脾方与溃疡性结肠炎相关基因,进一步遴选出交集基因,对交集基因进行GO功能和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析,确定清化祛瘀健脾方对溃疡性结肠炎的药理作用;同时建立蛋白-蛋白互作网络,并进行功能模块分析。筛选核心基因,通过分子对接,筛选结合最稳定的分子进行实验验证。最后,采用苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色及蛋白质免疫印迹方法验证清化祛瘀健脾方发挥疗效的分子机制。[结果]从清化祛瘀健脾方中筛选出86个活性成分和224个潜在靶点,与疾病靶点取交集获得254个共同靶点。这些共同靶点主要参与炎症反应、DNA转录、蛋白激酶活性、细胞凋亡、细胞增殖调控等过程,表明清化祛瘀健脾方通过影响这些过程来减轻炎症反应。进一步对蛋白-蛋白互作网络进行了核心基因分析及分子对接验证,发现低氧诱导因子-1(HIF1A)、信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)、MYC和丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)可能是清化祛瘀健脾方主要作用靶点。最后,对分子对接预测结合能最稳定的靶标MAPK3进行动物实验验证,发现清化祛瘀健脾方可以明显减轻溃疡性结肠炎模型小鼠结肠炎症反应,促进MAPK3蛋白的表达。[结论]网络药理学及分子对接预测了清化祛瘀健脾方治疗溃疡性结肠炎的功能成分及作用靶点,并通过动物实验证实了该中药复方可能通过激活MAPK信号通路,促进肠黏膜愈合而发挥抗炎作用,为清化祛瘀健脾方等中药复方的深入研究提供了新思路。

基于骨骼肌线粒体动力学探讨健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖小鼠胰岛素敏感性的影响

目的:观察健脾清化方对高脂饮食诱导的肥胖模型小鼠(DIO)胰岛素敏感性的影响,并基于骨骼肌线粒体动力学讨论其作用机制。方法:将30只小鼠随机分为正常组(NOR组,n=6)和模型对照组(n=24),NOR组小鼠予正常饲料喂养。MOD组小鼠利用高脂饲料诱导建立C57BL/6J肥胖模型。将18只造模成功小鼠随机分为模型组(MOD组)、健脾清化方组(JPQH组)、二甲双胍组(MET组),每组6只,分别予生理盐水、健脾清化方(1.3g/mL)、二甲双胍(30 mg/mL)进行干预。干预6周后,称量小鼠体质量,检测空腹胰岛素(FINS)、胰岛素敏感性、葡萄糖耐量,反转录聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测小鼠骨骼肌有丝分裂融合蛋白1(Mfn1)mRNA、有丝分裂融合蛋白2(Mfn2)mRNA、视神经萎缩蛋白1(Opa1)mRNA、动力相关蛋白1(Drp1)mRNA、线粒体分裂蛋白1(Fis1)mRNA表达水平,蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测Mfn1、Mfn2、Opa1、Fis1、Drp1、肌球蛋白重链(MYH)蛋白表达水平。结果:干预1周后,JPQH组小鼠体质量低于MOD组(P<0.05);干预2、3、4、5、6周后,JPQH组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05);干预2、3、4、5、6周后,MET组小鼠体质量低于MOD组(P<0.05);干预1周后,MET组小鼠体质量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠FINS水平低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。IPITT试验中,JPQH组小鼠各时间点血糖水平均低于MOD组(P<0.05);JPQH组小鼠0 min血糖水平高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组曲线下面积AUC低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。OGTT试验中,JPQH组小鼠0 min血糖水平与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05),JPQH组小鼠30、60、90、120 min血糖水平均低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组曲线下AUC低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠Mfn1 mRNA相对表达量低于MOD组(P<0.05),高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Mfn2 mRNA相对表达量高于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Opa1 mRNA相对表达量低于MOD组(P<0.05),高于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Fis1 mRNA相对表达量高于MOD组(P<0.05),低于MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Drp1 mRNA相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。JPQH组小鼠Mfn1、Mfn2蛋白相对表达量高于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Opa1、Fis1蛋白相对表达量低于MOD组、MET组(P<0.05);JPQH组小鼠Drp1蛋白相对表达量与MOD组比较,差异无统计学意义(P>0.05);JPQH组小鼠MYH蛋白相对表达量低于MOD组(P<0.05),与MET组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾清化方可以降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠体质量,改善小鼠的胰岛素敏感性,降低胰岛素抵抗;健脾清化方可能通过影响骨骼肌线粒体动力学进而改善骨骼肌胰岛素抵抗,以稳定血糖。

健脾清化方联合四联疗法治疗幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证的临床观察

目的探讨用自拟健脾清化方联合四联疗法治疗幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证的临床疗效。方法研究对象为安徽中医药大学第一附属医院老年脾胃科收治的脾虚湿热型幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎患者62例,随机分为对照组和观察组,每组31例。对照组采用西药四联疗法治疗,观察组除西药外,加用自拟健脾清化方加减治疗。对比对照组和观察组的总有效率、中医证候积分、Hp转阴率及不良反应。结果观察组总有效率和Hp清除率均高于对照组,中医证候评分低于对照组(P<0.05);2组不良反应率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论自拟健脾清化方联合四联疗法在治疗幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证,能够提高临床疗效、改善临床症状,有效杀灭幽门螺杆菌,且具有较高的安全性,值得临床应用推广。

健脾清化方改善局灶节段性肾小球硬化的效应机制研究

目的:探讨健脾清化方对局灶节段性肾小球硬化(FSGS)小鼠及阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用,并观察其对炎症反应、氧化应激及细胞凋亡的影响。方法:(1)体内实验:实验组balb/c小鼠,采用单次尾静脉注射阿霉素(10.5 mg/kg)的方法建立FSGS动物模型,造模后连续灌胃给药6周。测定24 h尿蛋白(定量)、血肌酐,及肾组织内超氧化物歧酶、丙二醛、过氧化氢酶的水平。并采用H&E、Masson、PAS染色,观察肾组织病理损伤程度。透射电镜观察肾脏超微结构。免疫荧光nephrine/p-JAK2双染观察足细胞上p-JAK2的表达。免疫印迹法检测(western blotting,WB)肾组织中p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、TGF-β1蛋白表达水平。(2)体外实验:实验1:采用CCK-8法检测阿霉素及健脾清化方对细胞活力的影响,并筛选出造模和健脾清化方干预浓度。DCFH-DA荧光探针检测各组足细胞ROS的含量。流式细胞术测定足细胞凋亡情况。WB检测p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、TGF-β1的蛋白表达水平以及RT-qPCR检测STAT3下游凋亡因子BAX、BAD、Caspase3、p21、Blc-2、和炎症因子IL-6、IL-1β、TNF-α的mRNA表达情况。实验2:WB检测JAK2激动剂C-A1对p-JAK2/JAK2,p-STAT3/STAT3蛋白表达的影响。结果:(1)体内实验:与对照组相比,模型组小鼠肾小球硬化,足细胞足突广泛融合,肾组织p-JAK2荧光表达明显增加。24 h尿蛋白定量、血肌酐、MDA升高,SOD、CAT降低(P<0.05)。p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、TGF-β1表达升高。与模型组相比健脾清化方干预后足细胞损伤缓解,肾组织P-JAK2荧光表达降低,24 h尿蛋白定量、血肌酐、MDA降低,SOD、CAT升高。p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、TGF-β1表达降低(P<0.05)。(2)体外实验:实验1:CCK-8法确定阿霉素造模浓度为0.4μg/mL,健脾清化方干预低中高浓度分别为1 mg/mL,2 mg/mL,4 mg/mL。与对照组比较,模型组凋亡细胞数量、ROS含量增多,p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3、TGF-β1蛋白表达升高(P<0.05),BAX、BAD、Caspase3、p21、IL-6、TNF-α、IL-1β的mRNA表达降低,Blc-2 mRNA表达升高(P<0.05),与模型组比较,健脾清化方干预后,凋亡细胞数量、ROS含量减少,JAK2/STAT3、TGF-β1蛋白表达降低,BAX、BAD、Caspase3、p21、IL-6、TNF-α、IL-1β的mRNA表达升高,Blc-2的mRNA表达降低,且成量效关系(P<0.05)。实验2:与对照组相比,C-A1组p-JAK2/JAK2蛋白表达升高(P<0.05),与ADR+H组相比,ADR+H+C-A1组p-STAT3/STAT3蛋白表达升高(P<0.05)。结论:健脾清化方可通过抑制JAK2/STAT3信号通路,调节炎症反应、细胞凋亡、氧化应激从而延缓FSGS足细胞损伤的进展。

基于PI3K/Akt通路探讨健脾清化散瘀饮抑制IGF-1诱导GES-1细胞增殖

目的 基于PI3K/Akt通路探讨健脾清化散瘀饮对胰岛素样生长因子1(IGF-1)诱导人胃黏膜上皮细胞株GES-1细胞增殖的影响。方法 将GES-1细胞分为对照组、模型组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。模型组和低、中、高剂量组给予2.5 ng/mL IGF-1溶液刺激,在此基础上低、中、高剂量组分别给予25、50、100μg/mL健脾清化散瘀饮药液干预,对照组给予0.5μL无菌水干预,分别干预24 h。采用CCK-8检测细胞活力;采用集落形成实验检测细胞存活能力;采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blot检测细胞磷脂酰肌醇激酶3(PI3K)、p-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt蛋白表达量。结果 与对照组比较,模型组细胞活力和集落形成存活率明显提高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt均明显提高(P<0.05)。与模型组比较,高剂量组细胞活力和集落形成存活率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显提高(P<0.05),p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt均明显降低(P<0.05);中剂量组细胞凋亡率明显提高(P<0.05),p-Akt/Akt明显降低(P<0.05)。结论 健脾清化散瘀饮能改善由IGF-1诱导的GES-1细胞异常增殖,其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路活化有关。

基于网络药理学和体外实验探讨健脾疏肝清化方治疗非酒精性脂肪性肝病的机制

目的:运用网络药理学和体外实验寻找健脾疏肝清化方的主要活性成分及其潜在作用靶点和通路,初步探讨其治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的机制。方法:在TCMSP数据库中筛选健脾疏肝清化方中中药的主要成分和靶点,同时在GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选NAFLD相关靶点,两者取交集后得到健脾疏肝清化方治疗NAFLD的潜在靶点,并通过Cytoscape绘制网络图;String数据库获得蛋白交互作用网络网,利用Cytoscape寻找核心基因;同时运用R语言clusterProfiler包进行GO、KEGG富集分析;利用AutoDock Tools进行分子对接模拟靶点蛋白与活性成分的相互作用;运用棕榈酸、油酸构建AML12脂肪变性细胞模型,通过细胞油红O染色、细胞内甘油三脂(TG)测定以及核心靶点的mRNA相对水平验证健脾疏肝清化方治疗NAFLD的疗效及机制。结果:①11种中药通过口服利用度(OB)和类药性(DL)筛选后,有效活性成分共210种,其中槲皮素、山柰酚、木犀草素、异鼠李亭、β-谷甾醇及柚皮素为主要活性成分;②健脾疏肝清化方治疗NAFLD的潜在靶点有119个,其中TNF、AKT1、IL-6、IL-1β、PPARG、TP53为核心靶点;③GO分析显示活性氧代谢过程的调节(GO:2000377)、对脂多糖的反应(GO:0032496)、活性氧代谢过程(GO:0072593)、对细菌来源分子的反应(GO:0002237)、对药物的反应(GO:0042493)起关键作用;KEGG富集分析显示肿瘤坏死因子信号通路、NAFLD、Toll样受体通路、胰岛素抵抗通路等通路可能在治疗中起关键作用;④分子对接显示槲皮素和IL-1β的结合较好。⑤体外细胞实验表明,健脾疏肝清化方可以降低肝细胞油红O红染(脂滴)面积以及细胞内TG水平,同时RT-qPCR表明健脾疏肝清化方能够调控核心靶点的表达。结论:基于网络药理学和体外实验,健脾疏肝清化方治疗NAFLD可能是槲皮素、山柰酚、木犀草素作用于TNF、AKT1、IL-6、IL-1β、PPARG、TP53等靶点,通过TNF信号通路、Toll样受体通路、胰岛素抵抗通路发挥作用,是多组分、多靶点、多通路相互交互的结果。

健脾清化方联合四联疗法治疗幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证的临床观察

探讨幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证疾病的推荐治疗方案。方法 研究病例均出自本院自2022年1月至2023年6月期间确诊的幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证疾病患者,病例数量选定为180例,参照随机化的临床分组模式,设定组别为单一组与联合组,每组病例数量均等,并分别执行不同的药物治疗方案,统计两组的临床疗效及各项临床数据结果。结果 联合组在执行联合用药治疗后,其疗效较单一组显著(P<0.05),同时其各项临床数据均较单一组明显优化发展(P<0.05)。结论 加强对幽门螺杆菌感染慢性非萎缩性胃炎脾虚湿热证患者的联合药物治疗,有助于改善其病情,增强临床药效的显著性,充分发挥联合药物治疗的协同效应,帮助患者减轻病灶的痛苦,可作为临床推荐治疗方案。

健脾清化方对2型糖尿病(气阴两虚型)血糖波动的作用研究

目的:采用随机、对照方法,通过持续动态血糖监测观察健脾清化方对2型糖尿病患者血糖波动的影响。方法:选择上海中医药大学附属曙光医院内分泌科2013年1月—2014年3月的2型糖尿病住院病例共63例。在维持原有降糖方案基础上,随机分为健脾清化方组和对照组。疗程为3个月。观察健脾清化方对治疗前后血糖波动(MBG、高、低血糖时间、SD、MAGE、MODD)、糖化血红蛋白、C肽分泌(空腹、餐后30 min、餐后2 min C肽、CGI)的影响。结果:健脾清化方组治疗后可以减少低血糖时间,并有效降低患者MAGE和MODD(P<0.05),疗效优于对照组(P<0.05)。健脾清化方组治疗后CGI升高,且疗效优于对照组(P<0.05)。结论:健脾清化方能有效减少日间和日内血糖波动,减少低血糖发生的危险性。并能改善胰岛细胞早相分泌功能。

健脾清化方对5/6肾切除大鼠ATⅡ/NADPH氧化应激通路的干预作用

目的:研究中药复方健脾清化方对慢性肾衰竭肾纤维化大鼠ATⅡ/NADPH氧化应激通路的影响,初步探讨其发挥疗效的作用机制。方法:用5/6肾切除(Plat法)建立慢性肾衰竭大鼠模型,分为假手术组、模型组、健脾清化方组和氯沙坦组。治疗60 d后测定血清肌酐、尿素氮水平;测定各组肾组织中SOD和MDA水平;Western印迹检测各组肾组织AT1蛋白表达;RT-PCR检测各组肾组织p47phox mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清肌酐和尿素氮均有明显上升,肾组织匀浆中SOD活性降低,MDA含量升高,肾组织中AT1蛋白表达显著上调,p47phox mRNA表达显著增加,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,健脾清化方组和氯沙坦组血清肌酐和尿素氮含量降低,肾组织匀浆中SOD活性上升,MDA含量下降,肾组织中AT1蛋白表达显著下调,p47phox mRNA表达显著降低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与氯沙坦组比较,健脾清化方组肾组织SOD活性明显升高,(P<0.05),肾组织中AT1蛋白及p47phox mRNA表达下降趋势明显,但差异无统计学意义(P>0.05),血清BUN,SCr水平和肾组织中MDA含量两组间比较差异也无统计学意义(P>0.05)。结论:健脾清化方可通过降低ATⅡ及NADPH氧化酶的表达,从而改善慢性肾衰竭大鼠的氧化应激反应,延缓肾纤维化进程。

健脾清化中药复方对大鼠慢性萎缩性胃炎TLR4-MyD88依赖途径蛋白表达及TNF-α的影响

目的观察健脾清化中药复方对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠TLR4及下游My D88依赖途径相关蛋白表达及炎性因子TNF-α的影响,探讨健脾清化中药复方治疗CAG的分子机制。方法将53只Wistar大鼠随机分为空白组8只和CAG造模组45只,以"氨水+去氧胆酸钠+乙醇"法复制CAG大鼠模型。确认造模成功后,将造模组余下40只CAG大鼠随机分为模型组、维酶素组、中药低、中、高剂量组,各8只。各组给予相应药物灌胃,连续30 d。HE染色观察病理组织学改变,Western blot法检测TLR4、My D88、NF-κB、COX-2的蛋白表达量,ELISA法检测血清中TNF-α含量。结果模型组大鼠TLR4、My D88、NF-κB、COX-2蛋白表达水平明显增高(P<0.01),血清TNF-α含量明显增高(P<0.01)。与模型组比较,健脾清化中药复方低、中、高剂量组胃黏膜病变明显改善,TLR4、My D88、NF-κB、COX-2蛋白表达水平均明显下降(P<0.05或P<0.01),血清TNF-α含量降低(P<0.05或P<0.01)。结论健脾清化中药复方可有效改善CAG大鼠胃黏膜组织病理改变,其治疗机制可能与降低组织中TLR4-My D88依赖途径中相关蛋白表达,以及抑制炎症因子的表达有关。

健脾清化方对糖尿病大鼠血糖波动和胰岛分泌功能的影响

目的观察中药复方健脾清化方干预糖尿病模型大鼠血糖波动及改善胰岛细胞分泌功能的作用。方法小剂量链脲佐菌素联合高脂高糖饲料诱导Wistar大鼠糖尿病模型。随机分为健脾清化方组(JPQ组)、正常组(NOR组)和模型组(CON组)。分别给予生药含量1.3 g/ml健脾清化方10 ml/kg和等剂量蒸馏水灌胃,干预4周。葡萄糖氧化酶法观察健脾清化方对模型大鼠糖代谢(IPGTT)、血糖波动水平[平均血糖波动幅度(Mean amplitude of glycemic excursions,MAGE)、葡萄糖曲线下面积(Area under curve of glucose,AUCg)]、Elisa法检测胰岛细胞功能[I/G、胰岛素原(Proinsulin,PI)、真胰岛素(True insulin,TI)、PI/TI]的影响,并行HE染色光镜下观察胰岛细胞形态变化。结果健脾清化方组大鼠的腹腔糖耐量血糖水平显著降低(P<0.05),MAGE和AUCg降低(P<0.05),健脾清化方组PI显著下降(P<0.05),TI显著上升(P<0.05),PI/TI显著下降(P<0.05),I/G显著上升(P<0.05)。HE染色光镜下可见健脾清化方组胰岛细胞数量增多,形态改善。结论健脾清化方能有效改善糖尿病模型大鼠的糖代谢和血糖波动,并对糖尿病模型大鼠的胰岛素分泌功能和胰岛细胞形态有一定的改善作用。

健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾衰的临床疗效及细胞分子机制研究

目的观察健脾清化方对脾虚湿热型慢性肾衰患者临床疗效及白介素-2(IL-2)、白介素-6(IL-6)、尿转化生长因子(TGF-β)的影响,探讨“脾虚湿热”对加重慢性肾衰进展的机理。方法将106例脾虚湿热型慢性肾衰患者随机分为治疗组和对照组各53例,对照组针对慢性肾衰加重因素等治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用健脾清化方治疗。疗程60天。结果治疗组能明显改善慢性肾衰患者的临床症状,降低血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和IL-6、尿TGF-β,使IL-2有显著的增加。结论早中期慢性肾衰在常规治疗的基础上加用健脾清化方,能改善患者的肾功能,降低蛋白尿“。湿热”作为加重CRF的影响因素,与高度表达的细胞生长因子和代表炎症的白介素对肾组织的损害有关,而“脾虚”与IL-2下降相关。

健脾清化方对CKD2～3期患者慢性微炎症状态的随机对照多中心研究

目的:研究健脾清化方对慢性肾脏疾病(CKD)2～3期脾虚湿热患者慢性微炎症状态的作用。方法:3个中心的随机对照临床研究,随机分成中药组和对照组,并设20例健康体检患者为正常组。对照组予西医常规治疗,中药组在对照组基础上加用健脾清化方。共随访8周,观察治疗前后血肌酐(Scr)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素-17(IL-17)、干扰素-γ(IFN-γ)的变化。结果:最终中药组有74例、对照组有73例完成研究。治疗前两组的hs-CRP、IL-17、IFN-γ比正常组显著升高(P<0.05)。8周的治疗后,中药组的Scr有显著下降(P<0.05)。中药组hs-CRP平均下降了26.4%(P<0.05),而对照组有上升的趋势。中药组IL-17平均下降了73.5%(P<0.05),对照组平均下降了25.6%。中药组IFN-γ平均下降了48.3%(P<0.05),而对照组平均下降了23.3%。结论:CKD2～3期的脾虚湿热患者存在慢性微炎症状态,健脾清化方能明显改善微炎症状态。

健脾清化方对不同饮食喂养的CRF大鼠胃动素、胃泌素的影响

目的观察健脾清化方对不同饮食喂养的慢性肾衰竭(CRF)大鼠胃动素、胃泌素的影响,探讨其改善慢性肾功能衰竭的胃肠道症状,降低血肌酐,延缓肾功能衰竭进展的机制。方法将80只SD雄性大鼠随机分为正常组8只,造模组72只,应用Platte法切除大鼠肾组织制作慢性肾功能衰竭动物模型,按不同饮食喂养分为7组,喂养8周后处死并采集标本,测定血肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量、胃动素、胃泌素等指标,进行分析。结果各造模组血肌酐、尿素氮和24h尿蛋白定量均显著高于正常组(P<0.05),其中高脂饲料模型组和持续高脂饲料模型组的胃动素、胃泌素明显高于正常组(P<0.05,P<0.01)。健脾清化方不仅具有显著降低持续高脂饮食饲料模型组的血肌酐、尿素氮及24h尿蛋白定量的作用(P<0.01),同时能明显抑制胃动素、胃泌素的分泌(P<0.05)。结论健脾清化方具有明显抑制胃动素、胃泌素,改善慢性肾功能衰竭的胃肠道症状和延缓肾功能衰竭进展的作用。

健脾清化方改善代谢综合征患者内皮功能的临床研究

目的评价健脾清化方对代谢综合征患者血管内皮功能的作用及可能途径。方法采用随机双盲平行安慰剂对照的方法,治疗组和对照组各观察28例,通过8周临床治疗,比较治疗前后内皮依赖性血管舒张功能(高分辨血管外彩色多普勒测定肱动脉反应性充血后血管内径的最大变化率)、血管内皮相关因子(NO、ET-1)、胰岛素抵抗(HOMA2-IR)的变化。结果干预后治疗组的肱动脉内径最大变化率高于对照组(P<0.05),治疗组血清NO浓度高于对照组(P<0.05),治疗组血浆ET-1浓度下降(P<0.05),对照组治疗前后无明显变化(P>0.05),治疗组HOMA2-IR下降(P<0.05),对照组治疗前后无明显变化(P>0.05)。结论健脾清化方能改善代谢综合征患者血管内皮功能,其作用途径可能是降低血浆ET-1浓度、升高血清NO浓度和减轻胰岛素抵抗。

健脾清化方在肾小球硬化大鼠中抗肾纤维化的作用及其机制

目的观察健脾清化方对肾切除联合阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化模型大鼠总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)及肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨该方抗肾纤维化的机制。方法将56只雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、模型组、健脾清化方组、益气健脾组、清热化湿组和尿毒清组,每组8只。后5组行单侧肾切除合并阿霉素(3 mg/kg)尾静脉注射建立大鼠肾硬化模型,分别给予健脾清化方、健脾清化方拆方(益气健脾方及清热化湿方)、尿毒清颗粒干预8周。测定用药后各组血清TC、TG、LDL、VLDL及肾组织TNF-α水平。结果模型组与正常组及假手术组比较,血清TC、TG、LDL、VLDL及肾组织TNF-α水平均显著升高(P均<0.01)。与模型组比较,健脾清化方组、清热化湿组、尿毒清组血清TC、TG、LDL、VLDL及肾组织TNF-α水平均显著降低(P均<0.01),益气健脾组血清TC、TG、VLDL均显著降低(P均<0.01),但LDL及肾组织TNF-α水平差异无统计学意义(P均>0.05)。结论健脾清化方可改善脂质代谢紊乱,并下调肾组织TNF-α的表达,从而改善肾脏炎症反应,实现抗肾纤维化的作用。方中的清热化湿药物对于降低LDL和肾组织TNF-α水平起着核心作用。

健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾衰的临床观察

目的:观察健脾清化方治疗脾虚湿热型慢性肾功能衰竭患者的临床疗效及作用机制。方法:将脾虚湿热型慢性肾功能衰竭患者随机分为两组,对照组与健脾清化方组各53例。对照组予以纠正水、电解质紊乱,现代营养及血管紧张素转换酶或受体抑制剂等治疗;健脾清化方组在对照组治疗的基础上加用健脾清化方治疗。结果:健脾清化方组患者的临床症状有明显改善,血肌酐、尿素氮、甘油三酯和低密度脂蛋白均有下降,而红细胞总花环有显著增加,与对照组比较,有统计学意义(P<0.05)。结论:早、中期慢性肾功能衰竭患者在常规治疗的基础上加用健脾清化方,能显著降低血脂,提高细胞免疫功能,从而改善肾功能,降低蛋白尿。

健脾清化汤干预脾虚湿热型慢性肾衰竭微炎症状态的临床随机对照研究

目的观察健脾清化汤联合西医常规疗法对脾虚湿热型慢性肾衰竭(CKD3期)微炎症状态的影响。方法将70例脾虚湿热型慢性肾衰竭CKD3期患者随机分为治疗组(36例)与对照组(34例),对照组予西医常规疗法,治疗组在对照组治疗措施基础上加用健脾清化汤。两组疗程均为12周,观察中医证候积分及血清C反应蛋白(CRP)、肌酐(Scr)、核因子kB(NF-kB)、肾小球滤过率(GFR)、血浆白蛋白(ALB)、前白蛋白(PAB)、血红蛋白(Hb)、转铁蛋白(TF)的变化情况。结果 1治疗前后组内比较,治疗组倦怠乏力、气短懒言、食少纳呆、腰膝酸软、恶心呕吐、身重困倦、脘腹胀满、口干口苦积分及总积分差异均有统计学意义(P<0.05),对照组除食少纳呆、口干口苦积分外,其余分项积分及总积分差异均有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,气短懒言、食少纳呆积分及总积分的差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P<0.05)。2治疗前后组内比较,治疗组Scr、CRP、NF-kB水平差异均有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,Scr、CRP、NF-kB水平差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P<0.05)。3治疗前后组内比较,治疗组GFR、ALB、PAB、TF水平差异均有统计学意义(P<0.05);组间治疗后比较,GFR、ALB、PAB、TF水平差异有统计学意义,治疗组优于对照组(P<0.05)。结论健脾清化汤联合西医常规疗法治疗脾虚湿热型慢性肾衰竭(CKD3期),可显著缓解临床症状,改善患者的微炎症及营养状态。

健脾清化方对慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠肾组织氧自由基和转化生长因子β1 mRNA表达的影响

目的观察健脾清化方对慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠肾组织氧自由基和转化生长因子β1(trans-forminggrowthfactorβ1,TGFβ1)mRNA表达的影响。方法模型组和健脾清化方治疗组大鼠予以高脂饲料喂养结合5/6肾切除法,建立慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠模型,并分别予以蒸馏水和健脾清化方灌胃干预8周。干预结束后,检测正常对照组、模型组和健脾清化方治疗组大鼠24h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白的水平;并检测各组大鼠肾组织超氧化物歧化酶的活性及丙二醛和游离脂肪酸的含量。采用RT-PCR技术检测各组大鼠肾组织TGFβ1mRNA的表达水平。结果模型组大鼠24h尿蛋白定量及血尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白和低密度脂蛋白水平均较正常对照组明显升高;肾组织超氧化物歧化酶活性较正常对照组明显下降;肾组织丙二醛、游离脂肪酸含量及TGFβ1mRNA表达水平则较正常组对照组明显升高,差异均有统计学意义。健脾清化方治疗组上述指标则均较模型组有不同程度的改善,差异有统计学意义。结论健脾清化方可减少慢性肾功能衰竭高脂血症大鼠24h尿蛋白定量,改善其肾功能,其作用机制与改善脂质代谢紊乱、调节氧化-抗氧化系统及降低肾组织TGFβ1的表达相关。

健脾清化方对肾纤维化大鼠肾功能、蛋白尿及肾组织Col-IV表达的影响

目的探讨健脾清化方对肾切除联合阿霉素诱导局灶节段性肾小球硬化模型大鼠肾功能、蛋白尿及肾组织IV型胶原(Col-IV)表达的影响。方法建立单侧肾切除合并阿霉素3mg/kg尾静脉2次注射大鼠肾硬化模型,分别予以健脾清化方、健脾清化方拆方(益气健脾方及清热化湿方)、尿毒清颗粒干预8周。测定用药后各组肾功能及24h尿蛋白定量,实时荧光定量PCR法测定肾组织Col-IV表达水平。结果模型组与空白组及假手术组相比,血清肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量及肾组织Col-IV表达水平均明显升高(P<0.01)。与模型组相比,健脾清化方组血清肌酐、尿素氮、24h尿蛋白定量及肾组织Col-IV表达水平均明显下降(P<0.01),清热化湿方组血清肌酐及肾组织Col-IV表达水平明显下降(P<0.01),尿素氮降低(P<0.05),尿毒清组尿素氮及肾组织Col-IV表达水平明显下降(P<0.01),血清肌酐、24h尿蛋白定量降低(P<0.05),益气健脾方组各项指标均无明显下降(P>0.05)。结论健脾清化方能下调肾组织IV型胶原的表达,从而抑制细胞外基质的积聚和肾小球系膜增殖,发挥抗肾纤维化和保护残存肾功能的效用。其拆方清热化湿方在改善肾功能和肾纤维化方面的疗效与健脾清化方接近,提示清热化湿类药物是健脾清化方抗肾纤维化的关键。