基于“肺与大肠相表里”研究清半夏多糖对哮喘模型大鼠结肠水液代谢的影响

目的观察清半夏多糖对哮喘模型大鼠结肠水通道蛋白5(Aquaporin 5,AQP5)mRNA表达的影响,探讨清半夏多糖作为"大分子"多糖类成分,基于"肺与大肠相表里",对哮喘大鼠结肠水液代谢调节的作用机制。方法 48只SPF级Wistar大鼠,随机分至正常对照组、哮喘模型组、清半夏多糖高、中、低剂量组。采用鸡卵清蛋白(OVA)诱导致敏、激发,建立哮喘大鼠模型。PowerLab数据采集分析系统收集各组大鼠血氧饱和度,记录造模前后体质量变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清、肠黏液中核因子κB(NF-κB)的含量;苏木素-伊红(HE)、高碘酸-雪夫(PAS)染色观察结肠组织病理改变和杯状细胞数量,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测结肠AQP5 mRNA变化。结果哮喘模型组大鼠的血氧饱和度显著降低(P<0.01);阳性药组和清半夏多糖中剂量组大鼠血氧饱和度均有显著升高(P<0.01);哮喘模型组大鼠体质量变化不大,而正常对照组和阳性药组体质量持续显著上升(P<0.01),清半夏多糖各组大鼠体质量有上升趋势。ELISA结果显示,哮喘模型组大鼠血清和肠黏液NF-κB含量显著升高(P<0.01);而阳性药组、清半夏多糖高剂量组能显著降低哮喘模型大鼠血清、肠黏液的NF-κB的含量(P<0.01,P<0.05),清半夏多糖中剂量能显著降低哮喘大鼠肠黏液中NF-κB的含量(P<0.01)。HE染色结果发现,与正常对照组比较,哮喘模型组大鼠结肠组织出现明显病理改变,阳性药组、清半夏多糖各组与哮喘模型组比较具有缓解作用;PAS染色结果发现与哮喘模型组比较,阳性药组、清半夏多糖各组结肠杯状数量明显增多、染色加深。qPCR结果显示,阳性药组,清半夏多糖各组与哮喘模型组比较,AQP5 mRNA均有明显降低(P<0.01)。结论基于"肺与大肠相表里"理论,研究发现清半夏多糖可能通过对哮喘模型大鼠结肠AQP5 mRNA的表达从而影响结肠黏液生成,进而干预哮喘进程,说明清半夏多糖可能是原药材发挥"燥湿化痰"的物质作用基础。

清半夏多糖对过敏性哮喘模型大鼠肺组织MUC5AC mRNA的影响

目的:通过观察清半夏多糖对过敏性哮喘模型大鼠气道黏液分泌的作用,研究清半夏多糖为原药材发挥'燥湿化痰'功效'大分子'成分的物质作用基础。方法:SPF级Wistar大鼠60只,除正常组外,鸡卵清蛋白(OVA)与铝镁佐剂腹腔注射诱导致敏,OVA溶液雾化激发,建立过敏性哮喘大鼠模型。造模成功后大鼠随机平均分成5组,为过敏性哮喘模型组,阳性药组(孟鲁司特钠,5 mg·kg-1),清半夏多糖高、中、低剂量组(400,200,100 mg·kg-1)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)上清液中白细胞介素-4(IL-4),γ-干扰素(IFN-γ)含量,BALF沉渣进行嗜酸性粒细胞(EOS)的计数检测;苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织黏蛋白5AC(MUC5AC) mRNA的表达。结果:与正常组比较,过敏性哮喘模型组大鼠血清IL-4含量显著升高(P <0. 01),IFN-γ含量显著降低(P <0. 01),BALF中EOS计数显著升高(P <0. 01);与过敏性哮喘模型组比较,孟鲁司特钠组、清半夏多糖高、中、低剂量组均能显著降低血清中IL-4的含量(P <0. 01),清半夏多糖高、中剂量组能显著降低BALF中IL-4的含量(P <0. 05,P <0. 01),清半夏多糖中剂量组能显著增高血清中IFN-γ的含量(P <0. 05),孟鲁司特钠组、清半夏多糖各剂量组均能显著降低BALF中的EOS计数(P <0. 01)。HE染色结果显示,过敏性哮喘模型组大鼠肺组织出现明显病理改变,孟鲁司特钠组、清半夏多糖各组具有缓解作用。与正常组比较,过敏性哮喘模型组大鼠肺组织的MUC5AC mRNA表达显著升高(P <0. 01);与过敏性哮喘模型组比较,孟鲁司特钠组、清半夏多糖高、中、低剂量组MUC5AC mRNA均显著降低(P <0. 01)。结论:清半夏的'大分子'成分清半夏多糖,可能是原药材清半夏发挥'燥湿化痰'功效的物质作用基础。