基于BDNF/TrkB通路探讨清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的影响

目的 基于脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)/原肌球蛋白相关激酶B(Tropomyosin-related kinase B,TrkB)通路探讨清心开窍方对淀粉样前体蛋白/早老素-1(APP/PS1)双转基因小鼠认知功能及神经元保护作用的影响。方法 将30只APP/PS1小鼠按照随机数字表法分为模型组、安理申组(1.67 mg·kg^(-1)·d^(-1))、清心开窍方低剂量组(4.75 mg·kg^(-1)·d^(-1))、清心开窍方中剂量组(9.5 mg·kg^(-1)·d^(-1))和清心开窍方高剂量组(19 mg·kg^(-1)·d^(-1))。选取6只雄性C57/B6小鼠记为对照组,连续90 d于每日上午9点进行灌胃。完成灌胃后,通过Morris水迷宫测试小鼠的空间学习记忆能力;通过HE染色观察小鼠海马CA1区细胞形态变化;通过尼氏染色观察小鼠海马CA1区病理形态变化;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)、TrkB、BDNF mRNA在小鼠海马中的表达;通过蛋白免疫印迹法(Western blotting, WB)检测P-TrkB、TrkB、BACE1、BDNF蛋白的表达水平。结果 与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期明显增多(P<0.01),而穿越平台次数以及在原平台所在象限滞留的时间明显增多(P<0.01),其小鼠海马神经元出现严重损伤,排列松散,尼氏体数量减少,染色变浅,BACE1表达增加(P<0.01),P-TrkB、TrkB、BDNF表达降低(P<0.01);与模型组相比,清心开窍方治疗组逃避潜伏期缩短,穿越平台次数以及目标象限停留时间明显增多(P<0.05或P<0.01),小鼠海马锥体细胞排列较紧密,形态完整,尼氏体数目增加,着色加深,BACE1表达降低(P<0.05或P<0.01),P-TrkB、TrkB、BDNF表达增加(P<0.05或P<0.01)。结论 清心开窍方可能通过BDNF/TrkB通路改善APP/PS1小鼠学习记忆能力,对神经细胞起保护作用。

清心开窍方联合卡巴拉汀治疗轻中度阿尔兹海默病痰浊蒙窍型的疗效观察

目的探讨清心开窍方联合卡巴拉汀治疗轻中度阿尔兹海默病痰浊蒙窍型的疗效。方法选取2021年7月至2023年7月本院收治的轻中度阿尔兹海默病痰浊蒙窍型患者80例,随机分为观察组和对照组,各40例。对照组接受卡巴拉汀治疗,观察组采用清心开窍方联合卡巴拉汀治疗,连续治疗2个月后比较两组临床疗效、认知功能、日常生活能力量表(ADL)评分和中医证候积分。结果观察组总有效率为90%,明显高于对照组72.5%(P<0.05);治疗后两组简易精神状态检查量表评分(MMSE)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分、ADL评分均明显高于治疗前(P<0.05),且观察组明显高于对照组(P<0.05);两组治疗后中医证候积分明显低于治疗前(P<0.05),且观察组低于对照组(P<0.05)。结论清心开窍方联合卡巴拉汀治疗轻中度阿尔兹海默病痰浊蒙窍型效果明显,可进一步提高临床疗效,减轻患者认知功能障碍,改善日常生活能力。

基于NLRP3炎性小体探讨清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠神经炎症的影响

目的:研究清心开窍方对阿尔兹海默病(AD)模型小鼠神经性炎症和认知能力的影响,并探讨与核苷酸结合寡聚域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体相关通路的关联。方法:将APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、多奈哌齐治疗组[1.67 mg/(kg·d)]、清心开窍方治疗组[低剂量组:4.75 mg/(kg·d);中剂量组:9.5 mg/(kg·d);高剂量组:19 mg/(kg·d)],每组10只。SPF级的雄性C57BL/6J小鼠作为对照组。Morris水迷宫实验测试定向导航和空间感知能力;HE和Nissl染色测定海马区的细胞和尼氏体数目的变化;蛋白质印迹(Western blot)和定量实时荧光聚合酶链反应(RT-q PCR)测定NLRP3、Caspase-1、Aβ、IL-1β和IL-6的表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠的平均逃逸潜伏期明显增加(P<0.01),通过平台次数和在平台所在目标象限停留时间明显减少(P<0.01),海马区神经元数量减少,不规则,尼氏体数量减少,染色颜色浅,NLRP3、Caspase-1、Aβ、IL-1β、IL-6表达明显增加(P<0.01);与模型组相比,多奈哌齐治疗组和清心开窍方治疗组逃避潜伏期均明显缩短,穿越平台次数及在平台所在象限停留时间明显增多(P<0.05或P<0.01),治疗组小鼠神经细胞排列更为紧密有序,形态更为完整,尼氏体数目明显增加,颜色加深,NLRP3、Caspase-1、Aβ、IL-1β和IL-6的表达明显减少(P<0.05或P<0.01)。结论:清心开窍方可能通过抑制NLRP3炎症通路减轻神经炎症改善APP/PS1小鼠的Aβ病理变化以及学习和记忆障碍。

清心开窍方对AD小鼠学习记忆能力及海马CA1区神经细胞形态的影响

目的:探讨清心开窍方对AD模型小鼠学习记忆能力及海马CA1区神经细胞形态的影响。方法:将150只小鼠随机分为5组,即空白组、模型组、清心开窍方高、低剂量组(14.82,7.41 g.kg-1)、脑复康组(0.42 g.kg-1)。除空白组外,其余各组均每日灌服三氯化铝(AlCl3)(200 mg.kg-1)造模,用药各组自造模第7天起,每日上午给予AlCl3灌胃,下午给予相应的药物,每日1次,连续8周,9周后评定疗效,测小鼠学习记忆功能和脑内一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及乙酰胆碱脂酶(AchE),及对海马CA1区神经细胞形态学观察。结果:中药各组能明显改善AD小鼠学习记忆能力,与对照组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01);清心开窍方各组能明显减少海马神经细胞的破坏,降低AD小鼠脑组织中NO,NOS含量及AchE活性,与模型组比较有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:清心开窍方能改善AD小鼠学习记忆的能力,对海马神经细胞具有保护作用。

清心开窍方对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆能力及脑组织自由基代谢的影响

目的探讨清心开窍方对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法清心开窍方组用清心开窍方治疗,脑复康组用脑复康治疗,9w后评定疗效。结果清心开窍方各组能明显改善AD小鼠学习记忆能力,与脑复康组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),清心开窍方组超氧化物歧化酶(SOD)活性明显升高(P<0.01),丙二醛(MDA)及脂褐素(LF)含量明显下降(P<0.01)。结论清心开窍方能改善AD小鼠学习记忆的能力,提高AD小鼠的抗氧化能力,降低氧自由基对机体的损伤,而对AD病具有很好的治疗作用。

清心开窍方皂苷对AD大鼠大脑皮层及海马区Bax、Bcl-2、Aβ及βAPP表达的影响

目的探讨清心开窍方及其皂苷对阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠大脑皮层与海马区Bax蛋白、Bcl-2蛋白、β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)及淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,βAPP)表达的影响。方法选取32只SPF级SD大鼠,将Aβ25-35注入32只大鼠双侧杏仁核制作AD模型,造模后随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组(盐酸多奈哌齐片,1.67mg/kg)、清心开窍方组(清心开窍方煎液,12.67mL/kg)及皂苷组(皂苷,6.30mg/kg),每组8只,另选取8只大鼠作为正常组。正常组、模型组给予等量双蒸水灌胃,各组每天干预1次,连续2周。给药结束后进行Morris水迷宫测试,记录各组大鼠水迷宫测试期间第1～5天逃避潜伏期及跨越平台次数。免疫组织化学法检测各组大鼠大脑皮层与海马区Bax、Bcl-2、Aβ及βAPP表达。结果与模型组比较,各用药组大鼠第3～5天逃避潜伏期均缩短,皮层与海马区Bax、Aβ及βAPP表达降低,跨越平台次数增加,皮层Bcl-2表达升高,西药组、中药组海马Bcl-2表达升高,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与西药组比较,皂苷组βAPP均升高;中药组皮层及海马区Aβ均降低,海马区Bax表达降低,皮层Bcl-2表达升高;皂苷组第3～5天逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数减少,皮层及海马区Bcl-2表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论清心开窍方能显著改善AD大鼠学习记忆和空间探索的能力,可能是通过降低大脑皮层与海马区Bax、Aβ、βAPP表达,升高Bcl-2表达而发挥作用。

清心开窍方有效成分对AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达的影响

目的:探讨清心开窍方有效成分对AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达的影响。方法:动物实验采用对照观察法。雄性SD大鼠112只,称体质量后按随机数字表分为7组:正常组、假手术组,模型组、安理申组,皂苷组、挥发油组、多糖组,每组16只。采用双侧海马注射Aβ1-40制造AD大鼠模型,造模后第2天开始灌胃,连续灌胃2周(每天上午10点开始),清心开窍方皂苷组、清心开窍方挥发油组、清心开窍方多糖组剂量分别是9、3.33、8.33 m L/(kg·d),安理申组给药剂量为1.67 mg/(kg·d),予对照组和模型组等体积生理盐水。2周后,采用免疫组化、实时定量荧光PCR及WB法检测AD大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达。结果:清心开窍方各有效成分组大鼠海马区IL-1β、GFAP及Aβ表达水平降低,与对照组比较差异非常显著(P<0.01,P<0.05)。结论:清心开窍方有效成分可能是通过降低海马区IL-1β、GFAP及Aβ的表达发挥抗AD的作用。

清心开窍方挥发油对AD大鼠大脑皮层及海马区GFAP及Caspase-3表达的影响

目的探讨清心开窍方及其挥发油对Aβ25-35杏仁核注射诱导痴呆(Alzheimer′s disease,AD)大鼠皮层及海马区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)、淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,βAPP)及Caspase-3表达的影响。方法选取32只雄性SD大鼠,采用杏仁核注射Aβ25-35诱导AD大鼠模型,造模后随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组[盐酸多奈哌齐片,1.67mg/kg]、清心开窍方组(中药组,清心开窍方煎液12.67mL/kg)和挥发油组(挥发油,3.33mL/kg),另选取8只大鼠作为正常组,正常组、模型组给予等量双蒸水灌胃,各组每天干预1次,连续2周。给药结束后进行Morris水迷宫测试,记录各组大鼠水迷宫测试期间第1～5天逃避潜伏期及跨越平台次数。免疫组织化学法检测各组大鼠大脑皮层与海马区GFAP、Aβ、βAPP及Caspase-3的表达。结果与模型组比较,各用药组大鼠第3～5天逃避潜伏期均缩短,皮层与海马区GFAP、Aβ、βAPP及Caspase-3表达水平降低,跨越平台次数增加,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与西药组比较,中药组皮层及海马区Aβ表达水平降低、βAPP升高,挥发油组皮层及海马区GFAP、βAPP及Caspase-3均升高,挥发油组第3～5天逃避潜伏期明显延长,跨越平台次数减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论清心开窍方能明显改善AD大鼠学习记忆能力,其机制可能是通过降低皮层及海马区GFAP、Aβ、βAPP及Caspase-3的表达发生作用。

清心开窍方对Aβ大鼠痴呆模型学习记忆能力和胆碱能系统的影响

目的:探讨Aβ对大鼠学习记忆能力的影响及清心开窍方的防治作用。方法:将Aβ1-40注入大鼠双侧海马建立痴呆(AD)动物模型,动物实验采用对照观察法。治疗组与预防组用清心开窍方防治,对照组用双益平治疗,疗程结束后评定疗效,用Morris水迷宫法测试大鼠学习记忆能力;用化学比色法测定乙酰胆碱酯酶含量;采用放射免疫法测定乙酰胆碱转移酶和M受体的含量。结果:预防组和治疗组大鼠的学习记忆能力改善显著高于模型组(P<0.05)。脑内海马区ChaT和AchE活性,模型组ChaT活性显著降低,预防组和治疗组的ChaT活性升高,差异有显著意义(P<0.05)。对大脑皮层的M受体测定表明,模型组的M受体显著低于正常对照组,治疗组与预防组则有所上升。结论:清心开窍方能改善AD大鼠的学习记忆能力,对AD病具有预防和治疗作用。

清心开窍方多糖对AD大鼠脑组织凋亡信号传导分子Caspase-3及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的影响

目的:探讨清心开窍方多糖成分对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠脑组织凋亡信号传导分子Caspase-3及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组和多糖组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35制造AD大鼠模型,造模后第2天起及灌胃给药2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,免疫组化方法研究脑组织Caspase-3、Bax、Bcl-2及βAPP的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力(P<0.05,P<0.01);清心开窍方组、多糖组大鼠大脑皮层、海马区Bax、Caspase-3、βAPP表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论:清心开窍方能显著改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质、海马Bax、Caspase-3、βAPP表达而发挥作用。

清心开窍方含药脑脊液对氯化钾所致PC12细胞损伤的保护机制

目的从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对氯化钾损伤的PC12细胞的保护作用。方法 SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9 g/kg),2次/d,连续3.5 d,制备清心开窍方含药脑脊液。采用PC12细胞和终浓度800 mmol/L的氨化钾共培养,造成神经细胞损伤模型。RTPCR方法检测Bax mRNA、Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA表达水平,四甲基原氮唑盐(MTT)法检测清心开窍方含药脑脊液对PC12细胞活性的影响。结果清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax mRNA、Caspase-3 mRNA表达水平降低,Bcl-2 mRNA表达增高,与模型组比较差异显著(P<0.05,P<0.01)。结论清心开窍方对氯化钾损伤的PC12细胞有明显的保护作用。

清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆及海马CA1区Akt、GSK3α、βAPP、Aβ表达的影响

目的:探讨清心开窍方对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力、海马CA1区神经元形态学的改变,以及对Akt、GSK3α、βAPP、Aβ蛋白表达的影响。方法:选取50只3月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠,随机分为模型组、多奈哌齐组(1.67 mg·kg^(-1))、清心开窍方高、中、低剂量组(每日给药剂量分别为19、9.5、4.75 g·kg^(-1)),另取10只同背景同性别同月龄的C57BL/6J小鼠作为对照组,对照组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,1次/d,连续灌胃12周。采用Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力,透射电镜观察小鼠海马CA1区神经元超微结构,尼氏染色法观察小鼠海马CA1区神经元损伤情况,免疫组织化学染色法检测海马CA1区Akt、GSK3α、βAPP、Aβ蛋白的表达情况。结果:与对照组比较,模型组APP/PS1双转基因小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),穿台次数减少,其海马CA1区神经元超微结构出现严重损伤,锥体细胞数量减少,排列紊乱,尼氏体着色变浅,Akt蛋白表达减少(P<0.01),GSK3α、βAPP、Aβ表达增加(P<0.01);与模型组比较,清心开窍方干预组逃避潜伏期均明显缩短(P<0.01),穿台次数增多,同时比较小鼠在原平台停留的时间和路程百分比均明显增加(P<0.05;P<0.01),其神经元结构较完整,核膜清晰,胞浆内核糖体丰富,线粒体数量增多,且嵴结构完整,锥体细胞数量增多,排列紧密,尼氏体着色较深,同时Akt蛋白表达增加(P<0.01;P<0.05),GSK3α、βAPP、Aβ表达减少(P<0.01;P<0.05)。结论:清心开窍方能够改善APP/PS1双转基因小鼠的学习记忆能力,其机制可能与Akt/GSK3α介导的信号通路相关,它能够激活Akt,抑制GSK3α,降低βAPP、Aβ的生成,减少神经元损伤。

清心开窍方对老年性痴呆模型大鼠学习记忆能力的影响研究

目的:探讨Aβ1-40对大鼠学习记忆能力的影响及清心开窍方的防治作用。方法:将Aβ1-40注入大鼠双侧海马建立老年性痴呆动物模型,动物实验采用对照观察法。治疗组与预防组用清心开窍方防治,对照组用双益平治疗,疗程结束后评定疗效,检测脑组织中海马区ChaT、AchE活性。结果:预防组和治疗组大鼠的学习记忆能力改善显著高于模型组(P<0.05)。脑内海马区ChaT和AchE活性,模型组ChaT活性显著降低,预防组和治疗组的ChaT活性升高,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:清心开窍方对Aβ1-40所致老年性痴呆大鼠模型具有预防和治疗作用。

清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元损伤IGF-1R、IRS-1及Aβ mRNA表达的影响

目的：研究清心开窍方对Aβ25-35诱导原代海马神经元细胞损伤胰岛素样生长因子1受体（insulin—like growth factor 1 receptor，IGF-1R）、胰岛素受体底物蛋白1（insulin receptor substrate-1，IRS-1）及β-淀粉样蛋白（β—amyloid，Aβ）基因表达的影响，探讨清心开窍方对神经元细胞的保护作用及其机制。方法：制备sD乳鼠原代海马神经元细胞，分为6组：正常对照组、模型组、尼莫地平组（1×107mol.L-1）、清心开窍方低、中、高剂量组（6.25、12.5、25mg/mL）。支持培养至第7天，各治疗组分别给予相应药物预处理24h后，模型组及各治疗组加入老化处理的Aβ25-35。（终浓度为10 μmol.L-1）共同作用24h，建立AD细胞模型。正常对照组给予相等体积的培养液继续孵育24h。采用CCK一8法检测各组的细胞活力，RT—PCR法检测各组IGF-1R、IRS-1和Aβ mRNA的表达水平。结果：模型组与正常对照组比较细胞活性明显降低（P〈0.01），而清心开窍方能有效改善细胞活性；RT—PCR法结果显示模型组IGF-1R mRNA明显降低（P〈0.01），IRS-1和Aβ mRNA表达均明显增加（P〈0.01），而不同浓度的清心开窍方处理后均能提高IGF-1R mRNA的表达（P〈0.01或P〈0.05），减少IRS-1和Aβ mRNA表达（P〈0.01或P〈0.05）。结论：清心开窍方能减轻β一淀粉样蛋白对神经元细胞的毒性作用，提高细胞存活率，保护海马神经元细胞。

清心开窍方多糖对AD大鼠海马区GFAP及βAPP表达的影响

目的:探讨清心开窍方多糖对Aβ25-35杏仁核注射诱导AD大鼠海马区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及淀粉样前体蛋白(βAPP)表达的影响。方法:雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组(简称清开方组)和多糖组。观察各组大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化方法研究海马区GFAP及βAPP的表达。结果:清心开窍方组和多糖组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠海马区GFAP及βAPP表达水平降低,与模型组比较有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:清心开窍方能明显改善AD大鼠学习记忆能力,可能是通过降低海马区GFAP、βAPP表达作用。

清心开窍方对AD小鼠脑组织NO、AchE含量及海马CA1区神经细胞形态学改变的实验研究

目的探讨清心开窍方对AD模型小鼠脑组织NO、AchE含量及海马CA1区神经细胞形态学的影响。方法动物实验采用对照观察法,对照组用清心开窍方治疗,对照组用脑复康治疗,9周后评定疗效。结果中药各组能明显减少海马神经细胞的破坏,降低AD小鼠脑组织中NO、NOS含量及AchE活性,与模型组比较有统计学意义(P<0.05～0.01)。结论清心开窍方对AD小鼠海马神经细胞具有保护作用,而对AD病具有治疗作用。

清心开窍方含药脑脊液对过氧化氢所致PC12细胞损伤的保护机制研究

目的:从细胞水平研究清心开窍方含药脑脊液对过氧化氢(H2O2)损伤的PC12细胞的保护作用,为该方剂的临床应用提供依据。方法:SD大鼠灌胃给予清心开窍方水煎液(7.9g/kg),每日2次,连续3.5d,分别于第7次给药后0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、2.5h采集制备清心开窍方不同时间点含药脑脊液。采用PC12细胞和终浓度200μmol/L的过氧化氢共培养,造成神经细胞损伤模型。RT-PCR方法检测Bax mRNA、Bcl-2mRNA、Caspase-3mRNA表达水平,MTT法检测清心开窍方含药脑脊液对PC12细胞活性的影响。结果:清心开窍方含药脑脊液组PC12细胞活性明显高于模型组,Bax mRNA、Caspase-3mRNA表达水平降低,Bcl-2mRNA表达增高,与模型组比较,有显著性差异(P<0.05～0.01)。结论:清心开窍方对H2O2损伤的PC12细胞有明显的保护作用。

清心开窍方抑制Aβ1-42纤维聚集的实验研究

目的:探讨清心开窍方抗Aβ1-42纤维聚集的机制。方法:实验分组:对照组、老化组单纯用Aβ1-42液,不同剂量清心开窍方组同时加入清心开窍方汤剂,老化组及不同剂量清心开窍方组均37℃恒温箱孵育7d,对照组Aβ1-42单独孵30 min,利用硫磺素T(Th-T)荧光分析法、透射电镜及扫描电镜观测Aβ1-42的聚集和纤维化程度。制备小量Affigel-Aβ,用高效液相色谱检测清心开窍方中与Affi-gel-Aβ结合的成分。结果:Th-T荧光分析示清心开窍方低、中、高剂量组对Aβ聚集与纤维形成的抑制率为分别为22.58%、75.51%、83.66%,组间比较P<0.01。透射电镜观察显示对照组Aβ1-42主要以无定型结构存在,聚集少或无明显聚集,电子密度较低,未见纤维结构形成;老化组Aβ1-42以淀粉样的纤维结构为主,交织成网状,呈针状或晶状聚集,无分枝,直径约10 nm;高、中剂量清心开窍方组Aβ1-42主要表现为无定型结构,未见明显Aβ纤维和Aβ聚集沉积,而低剂量清心开窍方组Aβ1-42主要表现为纤维型和无定型混合结构。扫描电镜观察显示对照组Aβ呈无定型,老化组纤维性结构明显增多,纤维粗,排列不规则,纵横交错,聚集形成片状结构,而清心开窍方与Aβ1-42共同孵育组,随清心开窍方浓度增加,纤维型明显减少,形成纤维束的直径逐渐变细。高效液相色谱(highperformance liquid chromatography,HPLC)检测显示:清心开窍方与Affigel-Aβ反应后,经甘氨酸(p H 2.5)洗脱的组分中存在能够被HPLC荧光检测仪检测到的物质。结论:清心开窍方具有抑制Aβ聚集和纤维形成的作用,且其中含有与Aβ结合的成分,这些成分不会促进Aβ的毒性,而可能具有抑制Aβ毒性的作用,提示在对于AD有效的中药方剂中探索与Aβ结合的成分,可能是探索AD治疗药物的一种手段。

清心开窍方对AD模型小鼠学习记忆能力及脑组织NO AchE含量的影响

目的：探讨清心开窍方对AD模型小鼠学习记忆能力的影响及其机制。方法：动物实验采用对照观察法。对照组用清心开窍方治疗，治疗组用脑复康治疗，9周后评定疗效。结果：中药各组能明显改善AD小鼠学习记忆能力，与对照组比较有显著性差异（P〈0．05—0．01）；中药各组均可降低AD小鼠脑组织中NO、NOS含量及AchE活性，与模型组比较有统计学意义（P〈0．05～0．01）。结论：清心开窍方能改善AD小鼠学习记忆的能力而对AD病具奄治疗作甩。

大鼠双侧杏仁核注射Aβ25-35对学习记忆与皮质区Bax、Bcl-2表达的影响及清心开窍方皂苷的干预作用

目的:探讨大鼠双侧杏仁核注射Aβ25-35对大鼠学习记忆与皮质区Bax、Bcl-2、Aβ、GFAP表达的影响及清心开窍方皂苷的干预作用。方法:动物实验采用对照观察法。雄性SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、安理申组、清心开窍方组、皂苷组,每组8只。采用双侧杏仁核注射Aβ25-35制造AD大鼠模型,造模后第2天起,分别灌胃给药及双蒸水2周后,观察大鼠水迷宫空间记忆能力,并通过免疫组化法研究大鼠皮质区Bax、Bcl-2、Aβ及GFAP的表达。结果:中药各组能明显改善AD大鼠学习记忆能力,大鼠皮质区Bax、Aβ、GFAP表达水平降低,Bcl-2表达水平提高,与对照组比较差异显著(P<0.01～P<0.05)。结论:清心开窍方能改善AD大鼠学习记忆的能力,可能是通过降低皮质区Bax、Aβ、GFAP表达及升高Bcl-2表达发挥作用。