逐瘀清心胶囊对精神分裂症大鼠神经组织及髓鞘病变影响及机制

目的 观察逐瘀清心胶囊对MK-801诱导的精神分裂症大鼠神经组织及髓鞘病变的影响,探讨逐瘀清心胶囊治疗精神分裂症的作用机制。方法 将40只雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、逐瘀清心组、利培酮组,每组10只。除空白组外,其余组大鼠应用MK-801药液腹腔注射构建精神分裂症模型。造模成功后,逐瘀清心组给予逐瘀清心胶囊混悬液0.054 g/(kg·d)灌胃,利培酮组给予利培酮混悬液0.036 mg/(kg·d)灌胃,空白组及模型组给予等剂量蒸馏水灌胃,均1次/d,连续灌胃28 d。HE染色观察大鼠脑组织病理形态,LFB染色观察脑白质髓鞘病变情况,Western blot法观察脑额叶皮质、海马、扣带组织中分化抑制因子2(Id2)、少突胶质细胞转录因子1(Olig1)、少突胶质细胞转录因子2(Olig2)蛋白表达情况。结果 模型组大鼠脑组织神经元细胞核固缩明显,髓鞘组织结构松散,存在明显的脱髓鞘病变;与模型组比较,逐瘀清心组、利培酮组细胞形态较为规则,核固缩现象减少,脱髓鞘病变减轻,结构较为致密,且逐瘀清心组改善更明显。与空白组比较,模型组大鼠额叶皮质、海马、扣带组织中Id2蛋白表达量均明显升高(P均<0.05),Olig1和Olig2蛋白表达量均明显降低(P均<0.05);与模型组比较,逐瘀清心组和利培酮组大鼠额叶皮质、海马、扣带组织中Id2蛋白表达量均明显降低(P均<0.05),Olig1和Olig2蛋白表达量均明显升高(P均<0.05)。结论 逐瘀清心胶囊可明显减轻精神分裂症大鼠神经组织损伤,其作用机制可能与调控脑额叶皮质、海马、扣带中Id2、Olig1、Olig2蛋白的表达,修复髓鞘病变有关。

清心胶囊对病毒性心肌炎不同分期Th细胞分化的影响

目的:观察病毒性心肌炎(VMC)不同分期Th细胞分化的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法:复制VMC急性期和恢复期BALB/c小鼠模型,给予清心较囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,ELISA法检测血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平。结果:无论急性期还是恢复期,经清心胶囊治疗后,VMC小鼠心肌病变均明显减轻;VMC小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平显著降低(P<0.01,P<0.05),IL-10或IL-4水平显著升高(P<0.05),与正常组比较无显著差异(P>0.05)。结论:清心胶囊能够通过抑制Th1应答,促进Th2应答从而恢复Th1/Th2细胞平衡。

清心胶囊对病毒性心肌炎小鼠不同分期T细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的观察病毒性心肌炎(VMC)不同分期T细胞凋亡与凋亡蛋白表达的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法参照文献方法复制VMC急性期和恢复期BALB/c小鼠模型,给予清心胶囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,Annexinv/PI双染色流式细胞术和透射电镜观察T淋巴细胞凋亡;流式细胞术检测Fas、FasL、bcl-2及Bax蛋白在T细胞上的表达。结果(1)无论急性期还是恢复期,模型组小鼠心肌病变明显,治疗组心肌病理改变明显减轻,正常组心肌无明显病理改变。(2)与正常组比较,VMC急性期、恢复期小鼠脾T细胞的凋亡率均显著升高(P<0.01);与模型组比较,无论急性期还是恢复期,治疗组小鼠脾T细胞的凋亡率均显著降低(P<0.01),但与正常组比较,仍有显著性差异(P<0.01)。透射电镜下可见正常T细胞和凋亡T细胞的典型形态,模型组T细胞凋亡增多。(3)与正常组比较,急性期、恢复期模型组小鼠脾T细胞Fas、FasL表达均显著升高(P<0.01),bcl-2表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,急性期、恢复期治疗组小鼠脾T细胞FasL表达均显著降低(P分别<0.01、0.05),bcl-2表达均显著升高(P分别<0.01、0.05),Fas表达无统计学差异(P>0.05);无论急性期还是恢复期,Bax表达各组间均无显著性差异(P>0.05)。结论VMC急性期。

清心胶囊对病毒性心肌炎恢复期小鼠的药效学及免疫调节作用研究

目的：观察清心胶囊不同剂量对病毒性心肌炎（VMC）恢复期的疗效，明确有效治疗剂量和量效关系，并初步探讨其免疫调节机制，为临床应用与新药开发提供实验依据。方法：雄性、5—6周Balb／c小鼠，先分出正常组（N组），腹腔注射无病毒Eagle＇s MEM液0．1mL。其余小鼠予0．1mL含CVB3的Eagle＇s MEM液，12天后再均分为模型组（M组）、清心胶囊高（Q1组）中（Q2组）低（Q3组）剂量治疗组、玉丹荣心丸阳性对照组，当天开始给药，连续给16天后处死。采用光、电镜观察心肌病理改变，并检测血清SOD、MDA、IL-2、IL-4 cTnI水平。结果：（1）M组小鼠心肌病变明显，治疗组病变明显减轻，正常组无明显病变。（2）与M组比，各治疗组MDA显著降低（P〈0．05），Q1、Q2组SOD显著升高（P〈0．05）；与N组比，各治疗组MDA、SOD均无显著性差异（P〉0．05）。（3）与M组比，各治疗组cTnI显著降低（P〈0．05）；与N组比，各治疗组cTnI均无显著性差异（P〉0．05）。（4）与模型组比，治疗组IL-2显著降低（P〈0．01），IL-4显著升高（P〈0．05）与N组比，治疗组IL-2、IL-4均无显著性差异（P〉0、05）。结论：清心胶囊对VMC恢复期小鼠有显著疗效，且与剂量呈一定相关性，中高剂量疗效最佳；清心胶囊具有抗氧化、调节免疫、保护心肌细胞的作用。

病毒性心肌炎小鼠T淋巴细胞凋亡的调控与清心胶囊的干预作用

目的:观察病毒性心肌炎(VMC)T细胞凋亡与凋亡蛋白表达的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法:复制VMCBALB/c小鼠模型,给予清心胶囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,Annexinv/PI双染色流式细胞术和透射电镜观察T淋巴细胞凋亡;流式细胞术检测Fas、FasL、bcl-2及Bax蛋白在T细胞上的表达。结果:(1)模型组小鼠心肌病变明显,治疗组心肌病理改变明显减轻,正常组心肌无明显病理改变。(2)与正常组比较,VMC小鼠脾T细胞的凋亡率均显著升高(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠脾T细胞的凋亡率均显著降低(P<0.01),但与正常组比较,仍有显著性差异(P<0.01)。透射电镜下可见正常T细胞和凋亡T细胞的典型形态,模型组T细胞凋亡增多。(3)与正常组比较,模型组小鼠脾T细胞Fas、FaSL表达均显著升高(P<0.01)lbcl-2表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠脾T细胞FasL表达均显著降低(P<0.01),bcl-2表达均显著升高(P<O.01、),Fas表达无统计学差异(P>0.05);与正常组比较,治疗组小鼠脾T细胞FaSL表达无显著性差异(P>0.05),Fas、bcl-2表达仍有显著性差异(P<0.05);而Bax表达各组间均无显著性差异(P>0.05)。结论:VMC发病过程中存在T细胞过度凋亡现象,这与Fas、FasL表达升高和bcl-2表达降低有关;清心胶囊能够显著抑制T细胞的过度凋亡,与其下调FasL表达和上调bcl-2表达有关。

万氏牛黄清心缓释胶囊在比格犬体内药动学研究

目的:研究比格犬单剂量交叉口服万氏牛黄清心缓释胶囊和市售普通丸给药的药动学。方法:采用高效液相色谱法测定10只比格犬单剂量口服万氏牛黄清心pH-依赖型梯度释药胶囊和市售丸后血浆中盐酸小檗碱的血药浓度。血浆样品采用碱化后乙醚萃取浓缩方法制备。以青藤碱为内标物质,流动相采用乙腈-0.1 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液-磷酸(30:70:0.01),检测波长为262 nm,流速为1.0mL·min^(-1)。结果:血浆中内源性物质对盐酸小檗碱及青藤碱的测定无干扰;最低检出限为1.25 ng·mL^(-1);盐酸小檗碱在1.25～250ng·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,r=0.9990;绝对回收率为82.94%～88.36%,方法回收率为89.28%～92.29%;日内精密度RSD≤4.87%、日间精密度RSD≤7.03%。缓释胶囊和普通丸药动学参数AUC_(?)分别为668.02和809.95 h·ng·ml^(-1),MRT分别为5.27和4.34h,缓释胶囊相对于普通丸的生物利用度为84.6%。结论:建立的测定方法处理简单,无干扰,灵敏度高,适合测定中药缓释制剂的药物动力学研究。万氏牛黄清心缓释胶囊具有明显的缓释作用,药物在体内呈梯度释放。

高效液相色谱法测定清心滚痰胶囊中硫化汞的含量

目的：建立清心滚痰胶囊中硫化汞的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为C18柱（4.6 mm × 250 mm，0.5μm），流动相为甲醇-0.01 mol／L磷酸氢二钠缓冲液（含0.01％二乙基二硫代氨基甲酸钠）（V∶V＝73∶27，用磷酸调节pH至7.5），检测波长为270 nm，流速为0.8 ml／min，柱温为30℃。结果：Hg2＋进样量在0.4～2.0μg 范围内线性关系良好（ r ＝0.99997），平均回收率为93.83％，RSD为1.94％（n＝6）。结论：该法简便、准确、专属性强，可用于清心滚痰胶囊中硫化汞的含量测定。

清心沉香八味胶囊中檀香、肉豆蔻挥发油β-环糊精包合工艺研究

目的:优选清心沉香八味胶囊中檀香、肉豆蔻挥发油β-精包合工艺。方法:采用正交试验法,以挥发油利用率为指标,考察挥发油与β-环糊精的配比、包合温度、包合时间三因素对β-环糊精包合檀香、肉豆蔻混合挥发油的工艺影响。结果:檀香、肉豆蔻混合挥发油β-环糊精最佳包合工艺条件为挥发油:β-环糊精为1:8,包合温度为50℃,包合时间为4h。结论:优选出的包合工艺稳定可行,且重复性好。

正交试验优选清心安神软胶囊提取工艺

目的优选清心安神软胶囊的提取工艺。方法以盐酸小檗碱提取率为考察指标,采用正交试验法,考察乙醇体积分数、加醇量、提取时间及提取次数对黄连提取工艺的影响;以萃取物得率为指标,采用正交试验设计,考察萃取压力、萃取温度、解析压力及解析温度对肉桂超临界CO2提取工艺的影响。结果黄连最佳醇提工艺为A2B2C2D3,即药材加6倍量70%乙醇提取3次,每次1 h;肉桂超临界CO2提取的最佳工艺A1B2C3D3,即萃取压力15 MPa,萃取温度40℃,解析压力8 MPa,解析温度为50℃,萃取时间约为4 h。结论优选的清心安神软胶囊的提取工艺简便、快速、准确,可为工业化生产提供理论依据。

清心安神软胶囊的制备工艺研究

目的研究清心安神软胶囊的制备工艺。方法采用单因素平行实验的方法,对影响软胶囊成型的各种影响因素(基质、粉末粒度、润湿剂、助悬剂等)进行考察。结果最佳制备工艺为:取花生油328 g,加入20 g蜂蜡后加热熔融,放冷,加入过100目筛的黄连提取物及2.5 g吐温-80,搅匀,然后加入肉桂提取物,充分搅拌均匀后压制成1 000粒软胶囊(0.5 g/粒),即得。结论所确定的成型工艺合理可行,产品符合《中国药典》规定,适合产业化生产。

清心安神软胶囊质量标准研究

目的建立清心安神软胶囊的质量标准。方法采用TLC法鉴别清心安神软胶囊中黄连、肉桂;用高效液相色谱法对制剂中盐酸小檗碱、桂皮醛进行定量分析。结果定性鉴别分离度好,专属性强;盐酸小檗碱的含量测定线性范围为0.6412μg～6.412μg(r=0.9997,n=7),平均回收率为97.57%(RSD=0.81,n=6);桂皮醛的含量测定线性范围为0.2148μg～2.148μg(r=0.9998,n=7),平均回收率为97.70%(RSD=0.88,n=6)。结论所建立之方法准确可靠、灵敏度高、专属性强,可有效控制清心安神软胶囊的质量。

八味清心沉香胶囊与散剂对动物心血管与镇静作用的对比研究

以八味清心沉香散剂3g/kg,胶囊剂6g/kg、3g/kg给药可明显降低大鼠心肌缺血程度,心电图S-T段比对照组降低,散剂为36.4%、胶囊剂为54.6%、45.5%;大鼠心肌冠脉结扎再灌注,心肌酶LDH、CK、AST比伪手术组,散剂降低27.2%、14.8%、23.2%,胶囊剂高剂量降低39.7%、24.1%、24.9%,等剂量降低31.9%、14.2%、17.3%。可明显加强戊巴比妥钠的镇静作用,高、中、低剂量催眠翻正反射消失率分别为散剂30%、胶囊高剂量60%、等剂量40%。用抖笼法测定小鼠10分钟内静止时间,活动抑制率,散剂52.1%,胶囊剂高剂量72.2%、胶囊剂等剂量66.7%,对照组为23.4%。研究结果表明,八味清心沉香胶囊高剂量组药理强度明显高于低剂量组,与同等剂量的散剂比较,胶囊优于散剂。目的:测定八味清心沉香胶囊抗心肌缺血及镇静作用,并对比八味清心沉香胶囊与散剂之间抗心肌缺血及镇静作用的差异。

HPLC法测定万氏牛黄清心微丸中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量

目的测定万氏牛黄清心胶囊中盐酸小檗碱和黄芩苷的含量。方法采用高效液相色谱法 ,以盐酸小檗碱和黄芩苷为对照品 ,采用Shim PackCLC ODSC18柱 ,乙腈 0 1mol·L-1磷酸二氢钾溶液 (V∶V =3∶7)为流动相 ,流速为 1 0mL·min-1,在波长 2 80nm检测。结果盐酸小檗碱在6 0 4～ 48 3 2mg·L-1内 ,质量浓度与峰面积具有良好的线性关系 ,线性回归方程为A =2 2 5 6×1 0 4ρ-8 72 0× 1 0 3 ,r =0 9998;平均回收率为 1 0 2 0 % (RSD =1 73 % ,n =9)。黄芩苷在 1 1 88～71 2 8mg·L-1内 ,质量浓度与峰面积具有良好的线性关系 ,线性回归方程为A =7 2 1 0× 1 0 3 ρ -1 674× 1 0 2 ,r=0 9997;平均回收率为 99 4% (RSD =2 3 4% ,n=9)。

AT_1R基因多态性与原发性高血压中医证型及降压中药疗效的关系

目的观察国人原发性高血压(essentialhypertension,EH)患者血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)一型受体(AT1R)基因A1166C多态性的分布,及其与高血压中医辨证分型和降压药物疗效的关系。方法测定206例汉族EH患者和86名汉族健康人的血压、体重指数、空腹血糖、胆固醇、甘油三酯浓度以及血浆AngⅡ、内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平。用盐析法提取外周血白细胞DNA,PCR加限制性酶切方法检测AT1R的1166位基因突变。根据高血压中医辨证标准对206例高血压病患者进行辨证分型,比较各中医证型的基因分布;分别用清心胶囊和卡托普利治疗阴虚阳亢型高血压患者34例与32例,观察其降压效果与基因型分布的关系。结果(1)高血压组除收缩压、舒张压显著高于正常对照组外,体重指数、空腹血糖及血脂、血浆相关激素水平两组比较差异无显著性;(2)EH患者AT1R基因AC加CC基因型的比例为0·126,较正常对照组0·047显著增高(P<0·01),C等位基因分布频率也明显高于正常对照组,分别为0·068、0·023(P<0·05);而男性与女性之间,AT1R基因型和等位基因分布频率,差异均无显著性;(3)基因分型与临床表型:AA基因型与AC加CC基因型间收缩压、舒张压、血糖、血脂、血浆AngⅡ、ET、CGRP水平经t检验,差异无显著性(P>0·05);(4)基因分型与中医分型:高血压病各证型中AA基因型与AC加CC基因型分布,差异亦无显著性(P>0·05);(5)基因分型与降压疗效:卡托普利和清心胶囊对不同基因型高血压患者均有效,各治疗组中AA与AC加CC基因型高血压患者降压效果相近。结论在中国汉族人群中,AC基因型与原发性高血压有关,C等位基因可能是高血压的一个易感基因;而高血压病中医辨证分型可能与是否携带C等位基因无关,清心胶囊和卡托普利的降压效应与是否携带C1166等位基因无关。在不同基因型的EH患者中,其血压、血糖、血脂、血浆AngⅡ、ET、CGRP未见明显差异,提示基因型对高血压的影响可能未通过糖脂代谢、血浆ET、CGRP、AngⅡ系统。