一株引起清溪乌鳖(Pelodiscus sinensis nigrum)“摇头病”致病菌的分离鉴定与药敏分析

从患"摇头病"清溪乌鳖(Pelodiscus sinensis nigrum)的肝脏、脾脏、肾脏、肺组织中分离得到1株细菌。菌落为圆形乳白色凸起,融蜡状,表面光滑,边缘清晰整齐;对该菌进行染色镜检可见其为革兰氏阳性杆菌,呈单个或链状排列。结合生理生化检测结果、16S rDNA基因和gyrB基因和rpoB基因序列分析以及系统进化树结果,该菌株为蜡样芽孢杆菌群(Bacillus cereus group)内新种。用不同浓度的分离菌腹腔注射感染健康的清溪乌鳖,观察发现死亡的清溪乌鳖出现与自然发病鳖相似的症状且从病鳖内脏中可分离得到同样的菌;经统计和计算,其LD50为2.42×105 CFU/kg体重。应用纸片扩散法对14种常用抗菌药物进行药敏试验,结果显示,分离菌对头孢氨苄、氟苯尼考、强力霉素、恩诺沙星、氧氟沙星五种药物敏感;对利福平、头孢他啶则耐药。本研究为清溪乌鳖细菌性病原的报道,旨在为该病的确诊与防治提供科学依据和参考。

清溪乌鳖油脂肪酸的气相色谱-质谱联用分析

采用气相色谱-质谱法对清溪乌鳖油脂中脂肪酸组成进行分析。共检测到22种脂肪酸,其中单不饱和脂肪酸6种,多不饱和脂肪酸9种,饱和脂肪酸7种。清溪乌鳖富含ω-3脂肪酸,含量达16.69%。此外清溪乌鳖油中9-十八碳烯酸(油酸)和9-十六碳烯酸(棕榈油酸)的含量也较高。本研究为清溪乌鳖油在生物制药和营养保健品领域的开发应用提供了科学依据。

中华鳖日本品系、清溪乌鳖及其杂交子代微卫星分析

以中华鳖日本品系和清溪乌鳖作为父母本,杂交获得子1代,对亲本和杂交子1代遗传变异进行相关微卫星分析。结果显示,在9对筛选的微卫星引物位点中,3个群体90个个体观测到的等位基因数为241个,其中有效等位基因数130个,平均等位基因数14.56～20.22个,平均有效等位基因数9.51～11.58个,期望杂合度0.843 6～0.968 8,总平均值0.921 8,观测杂合度0.100 0～0.922 2,总平均值0.513 1,平均多态信息含量为0.858 2～0.895 3;检测的3个群体各项遗传多样性参数都表明具有较为丰富的遗传多样性,都还有很大的选育潜力;在遗传距离上,杂交子1代与日本品系更近,与乌鳖稍远,乌鳖与日本品系的遗传距离最远,这也印证了父母本与杂交子1代不同的遗传基因型。

清溪乌鳖若干生物学性状与生长研究

研究新品种清溪乌鳖的若干生物学性状与生长特性。结果表明,清溪乌鳖独特的腹部灰黑色是区分其与普通中华鳖的一个重要外部特征;幼鳖体长和吻端宽与背甲长的比值较普通中华鳖小,成鳖体高、后侧裙边宽和尾长与背甲长的比值较普通中华鳖大。在人工配合饲料精养条件下,初孵清溪乌鳖稚鳖经450 d养殖,平均体重由初始约6.0 g增加到493.2 g,平均成活率达85%以上。雌雄个体间的生长速度差异较大,体重与背甲长呈正相关。

中华鳖2个培育品系的16S rRNA基因多态性比较分析

以中华鳖(Pelodiscus sinensis)日本品系、清溪乌鳖两个国家水产新品种为研究对象,并以中华鳖黄河群体和台湾群体为对照,克隆测序获得了其16S rRNA基因全长序列1 606 bp,并对群体遗传多样性进行比较分析。结果表明,在4群体共80个个体中,共检测到53个变异位点,包括9个群体特异性位点,其中清溪乌鳖3个,中华鳖日本品系和黄河种群各1个,台湾群体4个;共发现16种单倍型,其中清溪乌鳖8个、中华鳖日本品系2个、中华鳖黄河群体和台湾群体各3个,群体间无共享单倍型。中华鳖不同群体的16S rRNA基因多样性从高到低依次为清溪乌鳖(0.821)、中华鳖台湾群体(0.484)、中华鳖黄河群体(0.195)、中华鳖日本品系(0.100)。中华鳖日本品系和黄河群体、清溪乌鳖和台湾群体的遗传距离相对较近,分别为0.001和0.005。不同群体的单倍型各自聚为一支,表明中华鳖群体分化较为明显,不同群体的特异性位点可作为种质鉴别的依据。单倍型进化树显示,中华鳖日本品系和黄河群体以很高的置信度聚为一支,推测中华鳖日本品系起源于中国黄河流域。