中药清热利湿饮对HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA及分泌IL-8、IL-10的影响

目的:揭示中药清热利湿饮对人永生化角质形成细胞HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的作用机制。方法:以HaCaT细胞为研究对象,分别采用RT-PCR技术及ELISA方法观察中药清热利湿饮提取液对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞表达IL-6mRNA、IL-8mRNA、IL-10mRNA和分泌IL-8、IL-10的影响。结果:清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-6mRNA和IL-8mRNA的表达有下调作用,在药物浓度为10g/L和12.5g/L时,HaCaT细胞IL-10mRNA的表达量增强较为明显,与TNF-α诱导活化组相比,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。清热利湿饮对经TNF-α诱导活化的HaCaT细胞IL-8的分泌有不同程度的抑制作用,但对IL-10的影响不明显。结论:清热利湿饮可下调IL-6mRNA、IL-8mRNA的表达,上调IL-10mRNA的表达,且此作用随药物浓度的升高而增强;同时可降低细胞IL-8的分泌,但对IL-10的分泌无明显的作用。

清热利湿饮对HaCaT细胞增殖的影响

目的:确定清热利湿饮对人角质形成细胞株HaCaT细胞增殖的影响。方法:使用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况;流式细胞技术(FACS)和BrdU掺入实验检测细胞周期和DNA复制;Westernblot检测细胞周期调控蛋白的表达情况。结果:清热利湿饮药物处理可明显抑制HaCaT细胞增殖,且与清热利湿饮有浓度依赖关系;清热利湿饮处理组细胞出现S期停滞;清热利湿饮作用48 h后,Cychn E蛋白表达下降。结论:清热利湿饮能抑制HaCaT细胞增殖,其机制可能与抑制Cyclin E蛋白表达有关。

清热利湿饮对HaCaT细胞衰老的影响及其机制分析

目的观察清热利湿饮对人角质形成细胞株HaCaT细胞衰老的影响,探讨其分子作用机制。方法使用SA-β-Gal(β-半乳糖苷酶)染色法检测清热利湿饮对细胞衰老的影响;Brd U检测细胞DNA合成,Western blot和realtime PCR检测细胞衰老基因的表达情况。结果与对照组相比,清热利湿饮药物处理可明显促进HaCat细胞衰老;Western blot结果示清热利湿可促进p21蛋白表达上调,抑制p21蛋白表达可缓解清热利湿饮导致的细胞衰老。结论清热利湿饮能通过上调p21蛋白表达促进HaCaT细胞衰老。

清热利湿饮治疗荨麻疹疗效观察及抗过敏作用机制初探

目的观察清热利湿饮治疗荨麻疹临床疗效及对患者治疗前后白介素2(IL-2)、白介素4(IL-4)水平的影响,探讨清热利湿饮对Ⅰ型变态反应及5-脂氧合酶的影响。方法将入选患者随机分为治疗组与对照组,88例治疗组患者口服清热利湿饮,63例对照组患者口服咪唑斯汀。应用放射免疫法对治疗组60例患者进行治疗前后IL-2、IL-4的检测并与20例健康成人的IL-2、IL-4水平作对照。实验部分建立大鼠Ⅰ型变态反应与花生四烯酸致大鼠足跖肿胀模型,分别随机分组,灌胃生理盐水、咪唑斯汀、清热利湿饮,观察其抑制Ⅰ型变态反应与5-脂氧合酶的效果。结果治疗组愈显率为82.95%,总有效率为94.31%,与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。实验结果显示,清热利湿饮可明显抑制I型变态反应与5-脂氧合酶活性。结论清热利湿饮治疗荨麻疹疗效确切,复发率低,其作用机制可能与抗过敏、抗组胺、抑制5-脂氧合酶活性、抗病原微生物、利尿等有关。

清热利湿饮对普萘洛尔致豚鼠银屑病样皮损的影响

目的:评价清热利湿饮对豚鼠耳部银屑病样病理改变的影响及安全性。方法:用心得安构建豚鼠耳部的银屑病样病理改变模型,喂饲不同浓度清热利湿饮,采用Baker法对组织学积分和真皮炎细胞浸润程度进行评分,以甲氨蝶呤(MTX)作为对照。结果:清热利湿饮组和MTX组Baker评分和炎症细胞浸润数显著低于模型组(P<0.01),而清热利湿饮组与MTX组比较差异无显著性(P>0.05)。实验豚鼠各主要脏器未发现组织病理学改变。结论:清热利湿饮口服可改善豚鼠耳部银屑病样模型的病理变化,口服安全。

清热利湿饮通过调控FBW7影响HaCaT细胞Cyclin E的表达

目的:明确清热利湿饮调控HaC aT细胞内Cyclin E表达的机制。方法:Western blot检测HaCaT细胞蛋白半衰期;免疫沉淀及Western blot检测蛋白泛素化水平;Western blot及Real-time PCR检测清热利湿饮对E3泛素连接酶SCF-FBW7表达的影响。结果:与对照组比较,清热利湿饮组Cyclin E蛋白的半衰期较对照组缩短,Cyclin E蛋白泛素化水平及蛋白降解速度显著增高,FBW7 mRNA与蛋白水平明显上调。结论:清热利湿饮通过调控FBW7抑制Cyclin E的表达。

中药清热利湿饮对HaCaT细胞周期的影响

目的探讨中药清热利湿饮水提液对经肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导活化的人永生化角质形成细胞(HaCaT)细胞周期的影响。方法采用MTT法检测TNF-α对HaCaT细胞增殖的影响,流式细胞仪技术检测清热利湿饮提取液对HaCaT细胞周期的影响。结果经2.5×105 u/L的TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖率比对照组增加了(14.11±2.97)%,12.5 g/L和15 g/L清热利湿饮可使HaCaT细胞阻滞于S期,与TNF-α对照组相比,S期比率分别增加了10.63%和21.55%。结论 TNF-α可使HaCaT细胞活化及过度增殖,一定浓度的清热利湿饮以浓度依赖的方式干扰正常的HaCaT细胞周期,通过阻滞细胞的周期时相而抑制HaCaT细胞的分裂和过度增殖。

清热利湿饮治愈盘状红斑狼疮1例

盘状红斑狼疮（discoid lupus erythematosus,DLE）也称慢性皮肤型红斑狼疮（CCLE）,是一种病因不明的自身免疫病。临床上主要表现为：（1）皮肤持久性盘状红斑,界限清楚,边缘隆起,中央稍凹陷,多位于颊部、鼻梁、耳、颈外侧及头皮,上覆黏着性鳞屑,祛除鳞屑后可见角质栓和扩大的毛孔;（2）黏膜损害,常见于下唇,上覆白色鳞屑,可有糜烂;（3）对光敏感,日晒后加重;（4）冻疮样狼疮,女性患者多发于指尖、耳轮、足跟;

清热利湿饮治疗变应性皮肤血管炎32例疗效观察

目的:观察清热利湿饮治疗变应性皮肤血管炎的疗效。方法:对采休清热利湿饮治疗32例变应性皮肤血管炎患者。结果:痊愈21例,显效6例,有效2例,无效3例,总有效率为90.63%。结论:清热利湿饮治疗变应性皮肤血管炎疗效确切。

清热利湿饮加减治疗急性泛发性湿疹验案

该文分享应用清热利湿通便法(清热利湿饮加减)治疗急性泛发性湿疹案例1则,以期为临床治疗该病提供参考。

中药清热利湿饮对HaCaT细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨中药清热利湿饮水提液对经肿瘤坏死因子(TNF-α)诱导活化的人永生化角质形成细胞(HaCaT)增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法检测清热利湿饮提取液对HaCaT细胞增殖的影响,采用流式细胞仪技术检测HaCaT细胞的凋亡。结果:25.00、50.00、100.00g/L清热利湿饮对经TNF-α诱导的HaCaT细胞均有明显的增殖抑制作用,与MTX阳性对照组相比,差异显著(P<0.05,P<0.01)。10.00g/L和12.50g/L清热利湿饮作用于活化后的HaCaT细胞,凋亡率为(44.94±4.16)%和(45.75±4.74)%,与MTX组(37.12±5.44)%相比有显著性差异(P<0.05)。结论:清热利湿饮可通过诱导细胞凋亡而抑制HaCaT细胞的过度增殖。

清热利湿饮通过调控miR-17-5p抑制人角质形成细胞STAT3通路的作用研究

目的确定清热利湿饮对人角质形成细胞JAK-STAT3信号通路的影响,探讨抑制JAK-STAT3信号通路在清热利湿饮治疗银屑病机制的作用。方法Western blot检测细胞蛋白的表达,实时定量PCR检测JAK mRNA的表达,荧光素酶报告基因检测STAT3的转录以及JAK 3‘UTR的活性。结果清热利湿饮显著降低人角质形成细胞株HaCaT细胞内STAT3磷酸化水平以及STAT3的转录功能;进一步研究显示清热利湿饮可通过转录后水平降低JAK1表达抑制STAT3的磷酸化;实时定量PCR和荧光素酶报告基因分析实验结果显示清热利湿饮能够促进miR-17-5p的表达,进而抑制JAK13‘UTR活性,抑制JAK1的翻译,降低JAK1的表达。结论清热利湿饮能通过促进miR-17-5p的表达,抑制人角质形成细胞内JAK1的表达,进而抑制STAT3的功能。

基于JAK-STAT3通路探讨清热利湿饮治疗银屑病的分子机制

目的:探讨清热利湿饮对角质形成细胞HaCaT细胞及咪喹莫特诱导的银屑病小鼠模型酪氨酸激酶蛋白JAK-STAT3信号通路的分子机制。方法:含不同浓度清热利湿饮的完全培养基培养HaCaT细胞48h后,Western Blot检测JAK1、JAK2及P-STAT3的蛋白表达。另将50只BALB/c雄性小鼠随机分为空白对照组、模型组、清热利湿高、中、低剂量组,每组10只,利用PASI评分及HE染色评价银屑病小鼠皮损情况,免疫组化测定皮损中增殖细胞核抗原Ki67及信号通路中P-STAT3表达情况,Western Blot检测JAK1、JAK2、SAT3及P-STAT3蛋白表达情况,实时荧光定量检测组织中IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF mRNA的表达。结果:清热利湿饮可以使HaCaT细胞内JAK1、JAK2及P-STAT3的表达明显降低。与空白对照组比较,模型组小鼠皮损、红斑、鳞屑、浸润程度严重,清热利湿各剂量组较模型组显著减轻,PASI评分降低、表皮厚度减少(P<0.01)。与空白对照组比较,模型组皮损角质形成细胞中Ki67、P-STAT3着色细胞层数及数量显著增多且于细胞核中沉积(P<0.01),清热利湿各剂量组比模型组减少(P<0.01,P<0.05),高剂量组减少更加显著。模型组中STAT3、P-STAT3、JAK1、JAK2蛋白表达较空白对照组均增高(P<0.01),清热利湿高、中剂量组均较模型组低(P<0.01,P<0.05)。模型组与空白对照组比较,IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF mRNA表达均上调(P<0.01),清热利湿高、中剂量组较模型组的表达均下调(P<0.01,P<0.05)。结论:清热利湿饮可以抑制表皮角质形成细胞中JAK-STAT3通路中相关蛋白的表达,且有效减少IL-6、TNF-α、IL-1β、VEGF mRNA表达,从而发挥治疗银屑病的作用。

杜锡贤教授治疗银屑病经验

杜锡贤教授认为,银屑病由多种病因引起,外感六淫、内伤七情、饮食不节等均可导致湿热内蕴,在疾病的整个发展过程中,湿热始终贯穿其中,因此治疗在坚持辨证论治的基础上,强调清热利湿、解毒凉血,同时注意生活调理和情志调节,可取得令人满意的疗效。