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清热祛瘀固肾方对anti-β2GPI诱导下的滋养层细胞TLR4/MyD88信号通路的影响
1
作者
高祥福
冉婷
+3 位作者
谢志军
孙静
于晓
潘伟力
《浙江中医药大学学报》
CAS
2016年第9期648-653,共6页
[目的]以Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,My D88)通路为切入点,探讨清热祛瘀固肾方(简称清固方)对抗β2糖蛋白I抗体(anti-beta 2 glycoprotein I antibody,anti-β2GPI)诱导的...
[目的]以Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,My D88)通路为切入点,探讨清热祛瘀固肾方(简称清固方)对抗β2糖蛋白I抗体(anti-beta 2 glycoprotein I antibody,anti-β2GPI)诱导的人胎盘滋养层细胞HTR8损害的作用及机理。[方法]将40只雌性Wistar大鼠,随机分为清固方高、中、低剂量组和正常组。分组用药10d后心脏取血,分别制备含不同浓度清固方血清和正常血清。构建My D88和TLR4真核表达质粒,分别转染HTR8细胞。两组HTR8细胞各分成清固方高、中、低剂量组、肝素组、阴性对照组和空白对照组。阴性对照组及空白对照组给予正常血清,其它组则给予相应的含药血清干预。除空白对照组外,其它各组与小鼠单克隆anti-β2 GPI共孵育后采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中单核细胞趋化因子-1(monocyte hemotactic protein-1,MCP-1)、白细胞介素-1β(interleukin-1beta,IL-1β)浓度。[结果]经anti-β2GPI诱导的转染TLR4真核表达质粒的HTR8细胞经各组含药血清处理后,清固方高、中、低剂量组IL-1β浓度低于肝素组和阴性对照组,清固方高剂量组及空白对照组MCP-1浓度低于肝素组,差异有统计学意义(P<0.05);转染My D88真核表达质粒的HTR8细胞经各组含药血清处理后,清固方高、中、低剂量组及空白组对照IL-1β、MCP-1浓度低于肝素组,阴性对照组IL-1β、MCP-1浓度高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05)。清固方高、中、低剂量组、肝素组总凋亡率均低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01),空白对照组总凋亡率低于其他各组,差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]清固方通过干预TLR4/My D88信号转导通路,抑制HTR8细胞表面β2-GPI/anti-β2GPI活化引起的IL-1β、MCP-1分泌和细胞凋亡。
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关键词
抗磷脂综合征
妊娠丢失
HTR8细胞
清热祛瘀固肾方
TLR4/My
D88通路
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题名
清热祛瘀固肾方对anti-β2GPI诱导下的滋养层细胞TLR4/MyD88信号通路的影响
1
作者
高祥福
冉婷
谢志军
孙静
于晓
潘伟力
机构
浙江中医药大学附属第一医院
浙江中医药大学附属第二医院
浙江中医药大学中医临床基础研究所
出处
《浙江中医药大学学报》
CAS
2016年第9期648-653,共6页
基金
浙江省自然科学基金项目(LY12H27006)
高等学校博士学科点专项科研基金(20123322120001)~~
文摘
[目的]以Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子(myeloid differentiation factor88,My D88)通路为切入点,探讨清热祛瘀固肾方(简称清固方)对抗β2糖蛋白I抗体(anti-beta 2 glycoprotein I antibody,anti-β2GPI)诱导的人胎盘滋养层细胞HTR8损害的作用及机理。[方法]将40只雌性Wistar大鼠,随机分为清固方高、中、低剂量组和正常组。分组用药10d后心脏取血,分别制备含不同浓度清固方血清和正常血清。构建My D88和TLR4真核表达质粒,分别转染HTR8细胞。两组HTR8细胞各分成清固方高、中、低剂量组、肝素组、阴性对照组和空白对照组。阴性对照组及空白对照组给予正常血清,其它组则给予相应的含药血清干预。除空白对照组外,其它各组与小鼠单克隆anti-β2 GPI共孵育后采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测细胞培养上清液中单核细胞趋化因子-1(monocyte hemotactic protein-1,MCP-1)、白细胞介素-1β(interleukin-1beta,IL-1β)浓度。[结果]经anti-β2GPI诱导的转染TLR4真核表达质粒的HTR8细胞经各组含药血清处理后,清固方高、中、低剂量组IL-1β浓度低于肝素组和阴性对照组,清固方高剂量组及空白对照组MCP-1浓度低于肝素组,差异有统计学意义(P<0.05);转染My D88真核表达质粒的HTR8细胞经各组含药血清处理后,清固方高、中、低剂量组及空白组对照IL-1β、MCP-1浓度低于肝素组,阴性对照组IL-1β、MCP-1浓度高于其他各组,差异有统计学意义(P<0.05)。清固方高、中、低剂量组、肝素组总凋亡率均低于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.01),空白对照组总凋亡率低于其他各组,差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]清固方通过干预TLR4/My D88信号转导通路,抑制HTR8细胞表面β2-GPI/anti-β2GPI活化引起的IL-1β、MCP-1分泌和细胞凋亡。
关键词
抗磷脂综合征
妊娠丢失
HTR8细胞
清热祛瘀固肾方
TLR4/My
D88通路
Keywords
antiphospholipid syndrome
pregnancy loss
HTR8 cells
Qingre-quyu-gushen decoction
TLR4/My D88 pathway
分类号
R331 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
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1
清热祛瘀固肾方对anti-β2GPI诱导下的滋养层细胞TLR4/MyD88信号通路的影响
高祥福
冉婷
谢志军
孙静
于晓
潘伟力
《浙江中医药大学学报》
CAS
2016
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