清瘟败毒颗粒的急性和亚慢性毒性试验研究

在急性毒性试验中,给予试验组小鼠不同浓度的清瘟败毒颗粒水溶液,测定清瘟败毒颗粒的半数致死量和最大耐受量;在亚慢性毒性试验中,试验组大鼠以88,44,22g/(kg·d)的剂量连续经口给药42d,并另设灌服生理盐水对照组,在给药后观察大鼠的生长发育、血液学和血液生化、脏器病理学变化。结果显示,急性毒性试验没能测出清瘟败毒颗粒的半数致死量;小鼠经口灌服受试药物的最大耐受量高于132g/(kg·d);在亚慢性毒性试验期间,各给药组大鼠体重、血液学指标、血液生化指标与对照组比较均无显著性差异。急性毒性试验表明清瘟败毒颗粒无急性毒性;亚慢性毒性试验表明连续口服给药较安全。

清瘟败毒颗粒中黄连和连翘的薄层鉴别

薄层层析方法用于清瘟败毒颗粒中黄连和连翘的鉴别。试验以苯-乙酸乙酯-甲醇-异丙醇-浓氨溶液(12∶6∶3∶3∶1)为展开剂,置氨蒸气饱和的展开缸内展开,于紫外灯下检视黄连和盐酸小檗碱的存在。以三氯甲烷-甲醇(5∶1)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂,105℃烘5min,自然光下检测连翘的存在。结果表明,在365nm紫外灯下,清瘟败毒颗粒与黄连对照药材、盐酸小檗碱在Rf值相同处有相同斑点;在自然光下,清瘟败毒颗粒与连翘对照药材在Rf值相同处有相同斑点。建立了清瘟败毒颗粒中黄连和连翘的薄层鉴别方法,专属性强,重现性好,适合于快速检验。

清瘟败毒颗粒中栀子苷和菝葜皂苷元的薄层鉴别

为了建立清瘟败毒颗粒中栀子苷和菝葜皂苷元的薄层鉴别方法,试验以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(10∶7∶2∶0.5)为展开剂,喷以10%硫酸乙醇溶液,自100℃开始加热至斑点显色清晰,于自然光下检测栀子苷的存在;以甲苯-丙酮(9∶1)为展开剂,喷以5%香草醛硫酸溶液,自105℃开始加热至斑点显色清晰为止,自然光下检测菝葜皂苷元的存在。结果表明:在自然光下,清瘟败毒颗粒与栀子苷、菝葜皂苷元在比移值(Rf值)相同处有相同斑点。说明该试验建立的鉴别清瘟败毒颗粒中栀子苷和菝葜皂苷元的方法,专属性强,重现性好,适合于快速检验。

HPLC法测定清瘟败毒颗粒中盐酸小檗碱的含量研究

为了建立"清瘟败毒颗粒"中盐酸小檗碱含量的高效液相色谱检测方法(high-per-formance liquid chromatography,HPLC),采用SB-C18柱(StableBond,4.6×150 mm,5μm),流动相:乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(50∶50),紫外检测波长为345nm,流速1.0mL/min,柱温30℃。在选择色谱条件下,盐酸小檗碱与辅料、溶剂及清瘟败毒颗粒中的其他成分的峰之间分离良好,在16.0～48.0μg/mL范围内峰面积与盐酸小檗碱含量直线关系(r2=1,n=6),平均回收率为99.09%。该方法简便、灵敏、可重复性好,可用于清瘟败毒颗粒的质量控制。

清瘟败毒颗粒对鸡免疫的影响

研究清瘟败毒颗粒对鸡抗体水平、淋巴细胞转化和免疫器官指数的影响。选用30日龄海蓝白公鸡,随机分成3组。采用HA-HI试验方法测定各组血清中新城疫抗体效价,MTT法测定T淋巴细胞增殖,免疫28d后采用器官重量法测定免疫器官指数。清瘟败毒颗粒能够延长抗体在体内的时间,提高淋巴细胞转化率,提高鸡腔上囊、胸腺和脾脏指数,促进免疫器官的发育。清瘟败毒颗粒对鸡细胞和体液免疫都有显著影响,对鸡免疫具有增强作用。

中兽药新制剂清瘟败毒颗粒对鸡人工感染支气管炎的防治试验

鸡传染性支气管炎是一种急性高度接触性呼吸道传染病,影响鸡的产蛋量和蛋品质。本研究以鸡传染性支气管炎病毒标准株M41人工感染21日龄700只海兰褐雏鸡,使其发病。接种病毒前后在饮水中分别添加不同剂量的清瘟败毒颗粒,以清瘟败毒散为对照治疗组,观察不同处理鸡的临床症状、发病率、病理变化和死亡率等。结果表明:饮水中添加0.25‰清瘟败毒颗粒,对IBV标准株M41的攻毒保护作用与阳性对照组相比较差异显著(P<0.05);清瘟败毒颗粒低剂量治疗组与高、中剂量治疗组及清瘟败毒散治疗组之间差异显著,因水中添加0.5‰清瘟败毒颗粒,对人工感染鸡传染性支气管炎治疗作用明显,治愈率达88.00%,显著高于清瘟败毒散治疗组(P<0.05)。

清瘟败毒颗粒的制备及稳定性研究

通过对清瘟败毒颗粒剂制备过程中黄连、黄芩提取工艺的优选,辅料种类和用量的选择,制剂成型及初步稳定性的考察,确定了清瘟败毒颗粒的最佳制备工艺为：黄连加10倍、8倍、8倍水,煎煮3次,分别煎煮1.5h、1.5h和1h;黄芩加8倍、8倍、8倍量水,煎煮3次,均为1h;其余12味,加水温浸1h,煎煮2次,第1次加10倍水,煎煮2h,第2次加8倍量水,煎煮1h,滤过,合并滤液,减压浓缩至密度为1.08-1.10,合并所有稠膏和黄芩苷粉,加辅料适量制成颗粒。通过加速稳定性试验和长期稳定性试验确定产品的稳定性。结果表明,在上述条件下制备的清瘟败毒颗粒在聚酯/铝/聚乙烯药品包装用复合膜的包装下,其长期稳定性试验和加速稳定性试验中各项指标均符合药典规定,显示产品稳定性良好。

清瘟败毒颗粒的薄层鉴别分析

采用薄层色谱法对清瘟败毒颗粒中赤芍、栀子、玄参三味药材进行定性鉴别.分别以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(305100.2),乙酸乙酯-丙酮-水(550.6),三氯甲烷-甲醇-水(410.1)为赤芍、栀子、玄参的展开剂,硅胶板上展开,所得的薄层色谱斑点清晰,特征明显,阴性对照未见干扰.所建立的方法专属性强,重复性好,可用于清瘟败毒颗粒的定性鉴别.

清瘟败毒颗粒质量标准的研究

建立清瘟败毒颗粒剂的质量标准。采用TLC方法对处方中的黄芩、黄连进行了定性鉴别;采用HPLC方法测定黄芩苷的含量。色谱柱为KromasilTMC18;流动相为甲醇-水-磷酸(55∶50∶0.2),流速为1ml·min-1;检测波长280nm;进样量在0.06～0.21μg范围内线性关系良好(r=0.9996);平均回收率为100.2%,RSD=1.21%(n=6)。方法准确可靠,重现性好,可作为清瘟败毒颗粒的质量控制方法。

清瘟败毒颗粒中连翘苷的薄层色谱鉴别和含量测定试验

为了建立清瘟败毒颗粒中连翘苷的薄层色谱(TLC)鉴别方法和含量测定方法,TLC鉴别方法采用硅胶G薄层板,三氯甲烷-甲醇(8∶1)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂;含量测定采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱条件为:采用LabTech-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水-冰醋酸(27∶73∶0.1),流速1.0 mL/min,UV检测波长277 nm,柱温30℃,进样量10μL。结果显示:本试验建立的连翘苷TLC鉴别方法操作简便,专属性强;HPLC含量测定方法专属性强,连翘苷在0.025~0.8 mg/mL内线性良好(r=0.9999),日内精密度和日间精密度分别小于0.9%和1.8%,平均回收率范围在96.4%~103.2%。比较了连翘苷从连翘药材到清瘟败毒散、从连翘药材到清瘟败毒颗粒中的转移率,两者并无显著差异。表明本试验建立的清瘟败毒颗粒中连翘苷的TLC鉴别方法和含量测定方法,可用于清瘟败毒颗粒中连翘苷的质量控制及清瘟败毒颗粒制备工艺的优化。

清瘟败毒饮颗粒结合双嘧达莫治疗儿童川崎病临床疗效及安全性观察

目的分析清瘟败毒饮颗粒结合双嘧达莫治疗儿童川崎病临床疗效及安全性。方法研究纳入2019年1月—2022年10月小儿内科收治的82例儿童川崎病进行分组研究,分组方法为随机数字表法,将其分为西医组和中医组,各41例,西医组给予双嘧达莫治疗,中医组治疗方法同西医组,并结合清瘟败毒饮颗粒治疗,各组数据观察:临床治疗效果、治疗前后患儿中医证候(壮热不退、肌肤斑疹、唇赤干裂、咽红目赤、关节疼痛、手足硬肿等)积分变化、患儿冠脉损伤发生率、发热持续时间、淋巴结肿大消退时间及四肢肿胀消退时间、黏膜充血消退时间、住院时间、治疗前后患儿降钙素原(procalcitonin,PCT)、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、红细胞沉降率(erythrocyte sedimentation rate,ESR)等水平炎症因子水平变化、免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)及免疫球蛋白M(immunoglobulin M,IgM)、补体C_(3)(complement 3,C_(3))等免疫指标水平变化、不良反应发生情况。结果中医组患儿治疗总有效率比西医组高,P<0.05;中医组患儿冠脉损伤发生率低于西医组,P<0.05;中医组患儿发热持续时间、淋巴结肿大消退时间及四肢肿胀消退时间、黏膜充血消退时间、住院时间均比西医组短,均P<0.05;治疗前各组患儿中医证候(壮热不退、肌肤斑疹、唇赤干裂、咽红目赤、关节疼痛、手足硬肿等)积分、PCT及CRP、ESR、IgG、IgM、C_(3)等指标比较,P>0.05,治疗后各组患儿中医证候(壮热不退、肌肤斑疹、唇赤干裂、咽红目赤、关节疼痛、手足硬肿等)积分、PCT及CRP、ESR、IgG、IgM、C_(3)等指标均改善,中医组患儿治疗后中医证候(壮热不退、肌肤斑疹、唇赤干裂、咽红目赤、关节疼痛、手足硬肿等)积分、PCT及CRP、ESR、IgG、IgM、C_(3)等指标均优于西医组,均P<0.05;中医组与西医组患儿治疗不良反应率均较低,P>0.05。结论清瘟败毒饮颗粒结合双嘧达莫治疗儿童川崎病临床疗效显著,患儿症状改善,免疫功能提升,冠脉损伤发生率低,恢复快,治疗安全可靠,值得应用。