清肺透邪汤对肺炎支原体感染小鼠CARDS TX/NLRP3炎性小体相关因子表达的影响

目的探讨清肺透邪汤对肺炎支原体(MP)感染后CARDS TX及NLRP3炎性小体相关因子的变化及相关性,试图进一步明确清肺透邪汤防治肺炎支原体肺炎(MPP)的效应靶点。方法随机将48只Balb/c幼鼠分成正常组、模型组、清肺透邪汤组、阿奇霉素组4组,每组12只。除正常组外,对其余3组Balb/c幼鼠采用滴鼻法进行MP感染。造模后,清肺透邪汤组每只幼鼠给予15 g/kg的对应方剂进行灌胃,1次/d,连续14 d;阿奇霉素组,每只幼鼠给予阿奇霉素90 mg/kg灌胃,1次/d,连续3 d,停药4 d,2个周期,停药期间给予蒸馏水灌胃;正常组、模型组每只幼鼠均给予0.3 mL蒸馏水灌胃。在感染后的第3、7、10、14天进行取材,运用Real-time PCR法检测肺组织CARDS TX、NLRP3、ASC及Caspase-1的表达,采用ELISA法检测血清中IL-1β表达水平,采用免疫组化法检测肺组织中NF-κB表达。结果MP感染后,幼鼠肺组织出现炎症改变,镜下可见肺泡壁增厚、肺泡上皮细胞破坏、浸润。MP感染后,幼鼠肺组织中的CARDS TX、NLRP3、ASC及Caspase-1基因表达明显升高;与模型相比,清肺透邪方组幼鼠肺组织中的CARDS TX、NLRP3、ASC及Caspase-1基因表达明显下降,其上游调控因子NF-κB减少,下游促炎因子IL-1β降低(均P<0.05)。结论清肺透邪汤可以有效地下调CARDS TX基因表达,降低MP毒力作用的主要效应靶点;初步证实了清肺透邪汤可以通过NF-κB通路调控,影响NLRP3炎性小体合成,促使IL-1β所致炎性反应减弱,可能是保护肺损伤的相关机制。

清肺透邪汤介导NLRP3炎性小体抑制NF-κB信号通路改善肺炎支原体小鼠炎性反应

目的探讨清肺透邪汤对肺炎支原体肺炎(MPP)小鼠的治疗作用及其作用机制。方法 40只雄性SPF级BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、清肺透邪汤低、中及高剂量组,每组8只。利用鼻腔滴注肺炎支原体菌液(MP)的方法建立肺炎支原体肺炎小鼠模型,模型组小鼠灌服生理盐水,清肺透邪汤低、中、高剂量组小鼠分别按200、400、800 mg/kg体重每天剂量灌服清肺透邪汤混悬液。治疗两周后,计算小鼠肺组织指数;HE染色检测肺组织病理改变;TUNEL检测小鼠肺内细胞凋亡情况;ELISA检测各小鼠肺泡灌洗液中IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-18含量;q PCR检测肺组织中NLRP3、MyD88及NF-κB mRNA的表达;Western Blot检测肺组织中NLRP3、MyD88及p-NF-κB蛋白的表达。结果清肺透邪汤显著降低MPP小鼠肺指数,减轻肺病理损伤和细胞凋亡率(P<0.05);清肺透邪汤还可显著降低肺泡灌洗液中IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-18水平(P<0.05);并降低NLRP3、MyD88和NF-κB mRNA和蛋白表达(P <0.05)。结论清肺透邪汤改善肺炎支原体肺炎小鼠肺损伤,其作用机制可能与抑制NLRP3炎性小体及NF-κB信号通路有关。