还原型谷胱甘肽联合护肝清脂片治疗非酒精性脂肪性肝病患者疗效研究

目的探讨应用还原型谷胱甘肽联合护肝清脂片治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者的疗效。方法2020年2月~2022年2月我院诊治的61例NAFLD患者,被随机分为对照组30例和观察组31例,分别给予还原型谷胱甘肽治疗或在此基础上联合护肝清脂片治疗6个月。依据文献评估中医症状评分,采用ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、IL-8、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(vaspin)、可溶性白细胞分化抗原163(sCD163)、成纤维细胞生长因子-21(FGF21)、纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)和脂联素(APN)水平。结果在治疗6个月末,观察组神疲乏力、腹胀满、肝区不适、粪便不畅、尿黄、形体偏胖、面色萎黄和口苦口淡评分分别为(0.6±0.1)、(0.9±0.1)、(0.8±0.1)、(0.6±0.1)、(0.8±0.1)、(0.8±0.1)、(0.7±0.1)和(1.2±0.2),均显著低于对照组【分别为(1.2±0.1)、(1.4±0.2)、(1.6±0.2)、(1.1±0.1)、(1.4±0.2)、(1.6±0.2)、(1.1±0.2)和(1.9±0.3),P<0.05】;观察组血清TNF-α、IL-6、IL-8和hs-CRP水平分别为(20.3±4.1)ng/L、(22.9±3.4)mg/L、(132.9±16.6)ng/L和(12.5±2.1)mg/L,均显著低于对照组【分别为(27.9±3.6)ng/L、(27.5±3.1)mg/L、(167.5±18.2)ng/L和(16.5±2.7)mg/L,P<0.05】;观察组血清TC、TG和LDL-C水平分别为(4.2±0.4)mmol/L、(1.5±0.2)mmol/L和(2.3±0.4)mmol/L,均显著低于对照组【分别为(6.3±0.5)mmol/L、(2.9±0.3)mmol/L和(3.1±0.4)mmol/L,P<0.05】;观察组血清vaspin、PAI-1、FGF21水平分别为(1.1±0.2)μg/L、(8.2±1.6)ng/mL和(143.5±16.8)pg/mL,均显著低于对照组【分别为(1.5±0.2)μg/L、(10.4±2.3)ng/mL和(181.6±19.7)pg/mL,P<0.05】,而血清APN和sCD163水平分别为(15.7±2.4)μg/mL和(76.8±9.1)ng/mL,显著高于对照组【分别为(12.1±3.5)μg/mL和(62.3±7.4)ng/mL,P<0.05】。结论应用还原型谷胱甘肽联合护肝清脂片治疗NAFLF患者可显著改善中医症状,降低血脂和炎症因子水平,需要进一步临床验证。

护肝清脂片质量标准研究

目的:建立中药复方新药护肝清脂片的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对护肝清脂片中的山楂、泽泻、三七进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定该制剂中熊果酸的含量。结果:薄层色谱显色清晰且阴性对照无干扰。熊果酸在40～200μg/mL浓度范围内线性关系良好,r=1.000,平均加样回收率为99.05%,RSD为1.3%。结论:该方法操作简便,结果准确、重复性好,可用于护肝清脂片的质量控制。

护肝清脂片对非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏蛋白质合成及胆汁代谢的影响

目的:观察护肝清脂片对非酒精性脂肪肝模型大鼠肝脏蛋白质合成及胆汁代谢的影响。方法:将60只雄性SD大鼠按体质量随机分为正常对照组、模型组、非诺贝特组及护肝清脂片高、中、低剂量组。采用高脂饲料边造模边给药,正常对照组和模型组给予等体积生理盐水,连续灌胃10 w后,行腹主动脉采血并处死所有大鼠,收集血清,并测定各组大鼠血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、白蛋白/球蛋白、总胆红素、间接胆红素及胆汁酸等指标。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血清总蛋白、球蛋白、总胆红素、间接胆红素及胆汁酸水平显著升高(P<0.05)。而护肝清脂片各剂量组及非诺贝特组大鼠体内血清总蛋白、球蛋白、总胆红素、间接胆红素及胆汁酸水平均保持在正常范围内,与模型组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:护肝清脂片能阻止长期高脂饲料喂养对大鼠机体的损伤,使肝脏蛋白质合成及胆汁代谢维持正常。

有氧运动结合中药清脂片对肥胖雌鼠的影响

本研究通过有氧运动＋清脂片（ＣＬＴ）以及不同剂量ＣＬＴ干预肥胖，观察对肥胖的影响。方法：用高脂饲料诱发Ｗｉｓｔａｒ雌鼠肥胖１８周，分组进行不同方式的肥胖干预４周。结果：通过肥胖干预，肥胖鼠体脂和内脏脂肪含量、血清ＴＧ、ＬＤＬ—Ｃ浓度和动脉硬化指数（ＡＩ）明显下降（Ｐ＜０．０１）；ＨＤＬ－Ｃ浓度明显增高（Ｐ＜０．０１）。血清ＴＣ水平没有显著性改变（Ｐ＞０．０５）。结论：有氧运动和ＣＬＴ有明显的减轻肥胖程度、改善血脂的作用，并以有氧运动＋大剂量ＣＬＴ对于肥胖的影响较大。

清脂片对急性心肌缺血大鼠心电图的影响

目的 :通过观察不同剂量CLT和FT对于垂体后叶素引起的急性心肌缺血大鼠心电图的影响 ,探讨其抗大鼠急性心肌缺血、保护心肌的作用。方法 :灌胃给药 7d ,尾静脉注射垂体后叶素 2次 ,并描记心电图。结果 :第 2次注射后 15min ,造模组和FT组ST -T的升高超过 1mV ,出现急性心肌缺血 ,并且心肌缺血阳性率升高 ;CLT小、大剂量组ST -T升高值明显降低 ,心肌缺血阳性率明显减少。结论 :CLT有预防和减轻大鼠急性心肌缺血的作用 。

护肝清脂片对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏中AMPK通路激活及NF-κB-p65蛋白的影响

目的探讨护肝清脂片对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠脂质代谢和炎症反应的影响及可能的作用机制。方法将大鼠随机分为6组:模型组、正常组、非诺贝特组(0.1 g/kg)、护肝清脂片低(0.54 g/kg)、中(1.08 g/kg)、高(2.16 g/kg)剂量组。在高脂饲料造模的同时给予相应的药物持续给药12周。HE染色观察各组肝脏形态学及病理学变化,采用全自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHOL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平及肝组织TG、CHOL水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定肝组织TNF-α、IL-6、CRP水平。q RT-PCR技术检测肝组织SREBP-1c、FASN的m RNA水平,Western blotting检测肝组织p-AMPK、SREBP-1c、FASN及NF-κB-p65的蛋白水平。结果护肝清脂片中、高剂量组能减轻NAFLD大鼠肝脏脂质沉积,显著降低其血清TG、CHOL、AST、ALT水平,同时降低肝组织TNF-α、IL-6、CRP水平。护肝清脂片中、高剂量组显能著升高NAFLD大鼠肝脏p-AMPK的蛋白表达水平,降低SREBP-1c、FASN及NF-κB-p65的表达水平。结论护肝清脂片可能通过激活AMPK通路改善肝脏脂质代谢及抑制NF-κB活性减轻肝细胞炎症反应,缓解NAFLD进程。

HPLC法测定排毒清脂片中蒽醌类成分的含量

目的采用HPLC法测定排毒清脂片中蒽醌类成分的含量。方法 Phenomenex C18柱;以甲醇-0.1%磷酸溶液(75∶25)为流动相,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为254 nm。结果芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚线性浓度范围分别为0.5040～50.40μg·ml-1,r=1.000;0.5090～50.90μg·ml-1,r=0.9998;0.5290～52.90μg·ml-1,r=1.000;0.8320～83.20μg·ml-1,r=1.000;0.4590～45.90μg·ml-1,r=0.9997;回收率分别为100.9%、100.3%、98.74%、100.1%和101.5%,RSD分别为1.68%、1.62%、0.72%、0.88%和1.28%。结论本方法操作简便,专属性强,可作为排毒清脂片中大黄成分的质量控制方法。

高效液相色谱法测定排毒清脂片中大黄素、大黄酚的含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定排毒清脂片中的大黄素、大黄酚的含量。方法:色谱柱:UItjmate XB-C_(18)柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:甲醇-磷酸溶液(85:15);流速:1mL·min^(-1);检测波长:254nm。结果:大黄素、大黄酚分离良好,进样量分别在0.007984～0.047904μg和0.01002～0.06012μg范围内与峰面积是良好线性关系,r值分别为0.9991和0.9998,平均回收率分别为99.18%和99.94%,RSD分别为1.19%和1.16%(n=5)。结论:该方法简便、精确、分离效果好、专属性强,可作为排毒清脂片中大黄成分的质量控制方法。

基于网络药理学的护肝清脂片治疗非酒精性脂肪肝病分子机制研究

目的:利用网络药理学的方法研究护肝清脂片治疗非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的物质基础及作用机制。方法:在TCMSP、BATMAN-TCM数据库检索护肝清脂片全方药材的有效活性成分及其靶点,以类药性(DL≥0.18)和口服利用度(OB≥30%)作为筛选条件,剔除无作用靶点的活性成分,但对文献有报道的化学成分依旧保留。在OMIM、TTD数据库中检索NAFLD的治疗靶点并与药物活性成分靶点做交集,Cytoscape软件构建护肝清脂片-活性成分、活性成分-NAFLD治疗靶点网络,利用DAVID和KEGG数据库对潜在靶点进行富集分析,ClueGo对核心靶点进行Go分析,分析后发现护肝清脂片治疗NAFLD的通路涉及toll样受体信号通路、脂肪细胞因子信号通路、细胞凋亡信号通路等,所得结果通过动物实验进行验证。24只SD雄性大鼠随机分为3组:正常对照组、模型组、护肝清脂片组,持续造模10 w后处死取大鼠肝脏,Western blot和qRT-PCR技术检测大鼠肝组织相关通路的关键蛋白及mRNA的表达情况。结果:护肝清脂片能显著降低高脂饮食大鼠体质量、肝指数及肝脏TC、TG、TNF-α、IL-6水平及p-ASK1蛋白表达,显著升高其肝脏CPT1α mRNA及蛋白表达,显著降低其肝脏MYD88、TLR4 mRNA及蛋白表达(P<0.01)。结论:本研究通过网络药理学的方法,成功构建了护肝清脂片-活性成分-NAFLD治疗靶点网络,预测护肝清脂片治疗NAFLD的物质基础和作用机制,并通过动物实验进行初步验证,结果与网络药理学预测结果相符。护肝清脂片及其活性成分可能通过影响脂肪细胞因子信号通路、toll样受体信号通路、细胞凋亡信号通路对NAFLD起到治疗作用。

排毒清脂片治疗黄褐斑40例疗效观察

目的观察排毒清脂片治疗黄褐斑的临床疗效。方法74例患者随机分为两组,治疗组40例口服排毒清脂片2片3次/d,对照组34例口服谷胱甘肽100mg、维生素C200mg,均3次/d,两组均连续治疗12周。结果治疗组有效率为75.00%,对照组为52.94%,两组有效率差异有显著性(P<0.05)。结论排毒清脂片能有效治疗黄褐斑。

排毒清脂片治疗痤疮62例

目的观察排毒清脂片治疗痤疮的疗效。方法将120例患者随机分为两组,治疗组采用排毒清脂片治疗,对照组采用美满霉素治疗;连续6周。结果治疗组有效率高于对照组。结论排毒清脂片能有效治疗痤疮。

排毒清脂片治疗高脂血症的研究

目的观察排毒清脂片对高脂血症的疗效。方法2008年8月至2009年5月笔者用江西天施康中药股份有限公司生产的排毒清脂片和中国科学院成都地奥制药生产的脂必妥片各治疗高脂血症80例。结果两组调脂总疗效比较,排毒清脂片比脂必妥片为优,统计学上有明显差异。结论"排毒清脂片"是治疗高脂血症较好的药物。

排毒清脂片的质量标准研究

目的建立排毒清脂片的质量标准。方法用薄层色谱法鉴别本品中的大黄、西洋参和麦冬;用高效液相色谱法测定本品中大黄素和大黄酚的含量。结果薄层色谱鉴别特征斑点明显。含量测定中大黄素平均加样回收率为101.79%,大黄酚平均加样回收率为99.16%。结论所建立的薄层色谱鉴别和含量测定方法专属性强,重复性好,可用于排毒清脂片的质量控制。

三叶糖脂清片调控载脂蛋白A5干预脂代谢的实验研究

目的:观察三叶糖脂清片通过调控载脂蛋白A5(ApoA5)影响实验性高脂血症小鼠的脂质代谢。方法:采用高脂饲料喂养建立高脂血症小鼠模型,用三叶糖脂清片、非诺贝特、血脂康连续灌药30 d后,进行取血、分离血清,通过酶联免疫吸附实验、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)方法检测血清ApoA5含量。结果:三叶糖脂清片高剂量组、低剂量组总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平较模型组均降低;模型组与正常对照组、血脂康组、非诺贝特组、三叶糖脂清片高剂量组ApoA5含量比较差异均有统计学意义(P<0.05)。非诺贝特组ApoA5含量与血脂康组及三叶糖脂清片高剂量组、低剂量组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。三叶糖脂清片高剂量组ApoA5含量与低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:三叶糖脂清片具有降低实验性高脂血症小鼠LDL-C、TC作用,其降脂作用可能是通过影响ApoA5而实现的,且三叶糖脂清片的降脂作用不呈剂量依赖性。

护肝清脂片对脂肪变性肝细胞甘油三酯代谢及氧化应激水平的影响

目的研究护肝清脂片药物血清对脂肪变性肝细胞的甘油三酯代谢以及氧化应激水平的影响。方法以不同浓度游离脂肪酸(free fatty acid,FFA)混合物(油酸和棕榈酸)孵育Hep G2 24h,建立并筛选最佳Hep G2脂肪变性模型,分别以大鼠空白血清和非诺贝特药物血清为对照,采用油红O染色、试剂盒检测等方法检测护肝清脂片药物血清对Hep G2脂肪变性细胞模型脂滴形态、甘油三酯含量以及氧化应激相关指标的变化。结果护肝清脂片药物血清明显减小Hep G2细胞内脂滴数量和大小,降低细胞内甘油三酯、活性氧和丙二醛含量,同时增加总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽含量。结论护肝清脂片药物血清抑制游离脂肪酸诱导的Hep G2细胞脂肪变性,其可能与清除Hep G2细胞内活性氧自由基以及提高Hep G2细胞的抗氧化能力、减轻细胞氧化应激损害有关。

护肝清脂片对非酒精性脂肪肝大鼠的药效学研究

目的:研究护肝清脂片对非酒精性脂肪肝的药效情况。方法:大鼠按体重随机分为空白组、模型组、非诺贝特组(0.1g/kg)、护肝清脂片高(2.16g/kg)、中(1.08g/kg)、低剂量组(0.54g/kg)。采用高脂饲料造模,同时给予各组大鼠相应的药物连续10周。实验结束后,腹主动脉采血并处死所有大鼠,观察大鼠肝组织病理改变情况,并测定各组大鼠的血脂、肝指数、血糖、肝脏抗氧化能力等指标。结果:相较于模型组,护肝清脂片高、中剂量组大鼠的肝指数和MDA都明显下降;SOD、CAT、TAOC则明显升高。结论:护肝清脂片高(2.16g/kg)、中(1.08g/kg)剂量组能有效改善及预防非酒精性脂肪肝模型大鼠脂肪变性及炎症损伤,具有降低血脂水平、提高抗氧化能力等疗效。

排毒清脂片的UPLC-Q-TOF-MS成分分析及网络药理学探索

目的:利用UPLC-Q-TOF-MS鉴定排毒清脂片的化学成分,并在此基础上开展网络药理学研究。方法:采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~17 min,95%~5%A;17~17.01 min,5%~95%A;17.01~20 min,95%A),流速0.3 m L·min-1,柱温40℃,使用电喷雾离子源(ESI),负离子模式采集数据,质谱扫描范围m/z 50~1200,通过对照品、相对分子质量、质谱裂解规律和文献信息鉴定排毒清脂片的化学成分;运用多个数据库检索化学成分对应靶点、排毒清脂片所治疾病靶点以及代谢通路,利用Cytoscape 3.7.1软件构建"药材-成分-靶点-通路-疾病"的可视化网络拓扑关系图。结果:从排毒清脂片甲醇提取物中鉴定出了33个成分,其中27种来源大黄,4种来源西洋参,2种来源麦冬。网络药理学研究表明其中31个化学成分的18个直接靶点,58个间接靶点及类固醇激素生物合成通路、花生四烯酸代谢通路、胰岛素信号通路等7条通路与排毒清脂片治疗高脂血症、痤疮、单纯性肥胖有较强的相关性。结论:UPLC-Q-TOF-MS技术可快速、高效对排毒清脂片进行化学成分定性分析,揭示了排毒清脂片的药效物质基础;网络药理学研究可辨识大黄、西洋参、麦冬3味中药的作用靶点及代谢通路,初步阐释排毒清脂片的分子作用机制,可为该制剂的质量控制与临床应用提供参考。

清血消脂片对血脂水平的影响

目的:观察中药清血消脂片对高脂血症患者的调脂作用、安全性及中医临床症状疗效。方法:将200例高脂血症患者随机分为口服清血消脂片的治疗组和口服月见草油的对照组。治疗前后均检查血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)和中医症状积分。结果:治疗组TC平均下降14.11%,TG平均下降38.08%,HDL-C平均上升26.92%,优于对照组(P<0.01);中医症状疗效优于对照组(P<0.05);ALT、BUN、Cr治疗前后比较无统计学差异(P>0.05)。结论:清血消脂片可以有效调节血脂,改善临床症状,使用安全。

顶空气相色谱法测定糖脂清片中大孔吸附树脂有机残留物

目的:建立糖脂清片中大孔吸附树脂有机溶剂正己烷、苯、甲苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯和二乙烯苯的残留量检测法。方法:采用顶空气相色谱法检测,色谱柱为HP-INNOWAX毛细管柱;检测器为氢火焰离子化检测器,载气为高纯氮。结果:该法线性良好,r值均在0.992 6～0.999 9之间;方法精密度、重现性相对标准偏差(RSD)均小于5.0%,样品加样回收率(n=9)为99.7%～117.0%。结论:该法操作简便快速,准确度好,灵敏度高,可用于糖脂清片中8种有机溶剂残留量的测定。