冷鲜猪肉中生物膜形成细菌鉴定及成膜变形杆菌清除

冷鲜肉中微生物极易在设备表面附着形成生物膜,引起肉类腐败变质,同时还会引起食源性疾病传播和食物中毒。本文研究不同温度下冷鲜猪肉中菌群在玻璃和不锈钢表面的成膜规律,分离鉴定成膜微生物,并采用Na Cl O、超声波清除生物膜。结果表明,4、15和26℃生物膜形成量分别在第10、6和3 d达到峰值,且细菌在不锈钢表面形成的生物膜量大于玻璃材质;分离鉴定出普通变形杆菌、腐败希瓦氏菌和假单胞菌等9株成膜细菌。Na Cl O溶液浸泡对不锈钢和玻璃表面的变形杆菌生物膜均有显著清除效果(p<0.05)。采用200、400和600 mg/L Na Cl O溶液浸泡5 min其清除效果均能达到98%以上。100 k Hz超声1 min结合400 mg/L Na Cl O溶液浸泡5 min清除率达99%以上,效果优于Na Cl O溶液和超声波单独作用。

(+)-4-萜品醇对蜡样芽孢杆菌混菌生物膜的清除及与微酸性电解水协同作用研究

蜡样芽孢杆菌是食品中检出率极高的常见食源性病原菌,易引发食物中毒和食品腐败。抑菌实验结果显示:食用香料组分(+)-4-萜品醇对蜡样芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、阪崎肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为2~8μmol/mL;而96μg/mL SAEW的抑制率仅为40%;二者具有协同抑菌作用。结晶紫法测定结果表明,(+)-4-萜品醇对单一及混菌生物膜的清除作用呈浓度依赖性,处理30 min清除率超过80%;SAEW的清除率随着浓度的增加先增大后减小,30μg/mL时清除率最高(69%)。FESEM观察显示:(+)-4-萜品醇和SAEW处理显著减少聚氯乙烯和聚氨酯表面蜡样芽孢杆菌混菌生物膜,(+)-4-萜品醇效果更优;二者联用,清除效果优于SAEW,但低于(+)-4-萜品醇,可能与SAEW处理导致胞外基质致密化,阻碍(+)-4-萜品醇渗透有关。

流感嗜血杆菌生物膜形成对抗生素的耐药性变化

目的体外建立流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae)生物膜(BF),观察细菌形成BF后对抗生素敏感性的变化。方法从腺样体肥大患儿的离体腺样体组织中分离30株流感嗜血杆菌,并以96微孔板培养,采用结晶紫染色和扫描电镜(SEM)鉴定BF形成;分别测定氨苄西林(AMP)、头孢曲松(CRO)、左氧沙星(LVFX)和阿奇霉素(AZM)4种抗菌药物浮游菌的最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC)以及生物膜菌最低生物膜清除浓度(MBEC)。结果 30株流感嗜血杆菌体外都有不同程度BF形成。当BF形成后,不同抗生素的MBEC较其MIC、MBC增高程度大小不一,差异有统计学意义(MBEC/MBC:H=91.54,MBEC/MIC:H=87.91;P均<0.001)。AMP的MBEC最高,可高达MBC和MIC的100多倍;CRO的MBEC较MBC和MIC可增高数十倍,LVFX和AZM对BF的MBEC最接近于MBC和MIC。结论 BF形成后,流感嗜血杆菌耐药性增强;氟喹诺酮类LVFX和大环内酯类AZM对流感嗜血杆菌BF作用相对良好。

培养基对不同产酶铜绿假单胞生物膜菌敏感性的影响

目的研究不同培养基中产不同类型β-内酰胺酶的铜绿假单胞生物膜菌对抗菌药物的敏感性。方法①选取产超广谱β-内酰胺酶、头孢霉素酶和金属型β-内酰胺酶的铜绿假单胞菌菌株,应用L-肉汤(LB)、胰酶大豆肉汤(MHB)、水解酪蛋白胨肉汤(TSB)三种培养基建立细菌生物膜模型;②选用环丙沙星、头孢他啶和亚胺培南,应用微量稀释法和MBECTM-Device测定最低抑菌浓度和最低生物膜菌清除浓度。结果①浮游状态下,铜绿假单胞菌在三种培养基中对同种药物的敏感性无统计学差异(P>0.05);②形成生物膜后,铜绿假单胞菌在三种培养基中对环丙沙星及亚胺培南的敏感性为LB<MHB<TSB,存在统计学差异(P均<0.05)。结论不同环境可影响生物膜状态下铜绿假单胞菌对抗菌药物的敏感性。

克拉霉素和加替沙星联合应用对铜绿假单胞菌生物被膜的体外作用

目的研究克拉霉素和加替沙星联合应用对铜绿假单胞菌生物被膜(BF)的体外作用。方法采用改良的平板培养法建立BF体外模型,经不同浓度克拉霉素处理后,扫描电镜(SEM)观察,琼脂平板法测定不同浓度克拉霉素处理组加替沙星的最低生物膜清除浓度(MBEC)。结果扫描电镜形态学观察显示,1/4MIC、1/16 MIC克拉霉素处理组的BF中纤维素样物质及胶连现象明显减少,BF的网状结构被破坏;MBEC测定结果显示,与0 MIC克拉霉素处理组的加替沙星MBEC值(7.75+2.13)Lnμg/mL比较,1/4MIC克拉霉素处理组(5.00+2.39)Lnμg/mL、1/16 MIC克拉霉素处理组(5.75+2.16)Lnμg/mL均显著降低(P<0.01,P<0.05);而1/4MIC克拉霉素处理组与1/16 MIC克拉霉素处理组之间无显著性差异(P>0.05)。结论克拉霉素本身对铜绿假单胞菌不具有杀菌活性,但1/4MIC、1/16 MIC克拉霉素均能减少铜绿假单胞菌BF中的纤维素样物质,破坏生物膜的结构,而增加加替沙星的抗菌活性。

甘草与厚朴复配物对变异链球菌及生物膜形成的抑制作用

比较了甘草和厚朴的提取物以及两者复配物的抑菌效果,并研究了甘草和厚朴的提取物对变异链球菌乳酸脱氢酶活性的影响和生物膜形成的抑制效果。通过抑菌圈、最小抑菌浓度和部分抑菌浓度指数测试抑菌能力,结果显示甘草和厚朴联合使用时对变异链球菌具有协同作用,且当甘草和厚朴提取物的质量比为1∶2(G-M_(1∶2))时抑菌效果最佳。通过变异链球菌生长曲线探究G-M_(1∶2)对变异链球菌的抑菌时期,研究G-M_(1∶2)对乳酸脱氢酶的活性和生物膜形成的影响,结果显示G-M_(1∶2)能有效抑制乳酸脱氢酶(LDH)的活性和生物膜的形成。

基于天然产物改造的细菌生物膜清除剂研究进展

细菌生物膜广泛存在于各类细菌之中,与约80%的细菌感染有关,是细菌对现有抗生素产生耐受性和耐药性的主要原因之一。因此,开发新型抗生物膜药物具有重要意义。目前的抗生物膜剂主要有3类:生物膜形成抑制剂、生物膜分散剂和生物膜清除剂。其中,生物膜清除剂不同于另外两种,可作为单药杀死生物膜内细菌并清除生物膜,是一种具有潜力的抗菌药物。研究人员对具有抗菌活性的天然产物进行筛选与改造,发现了多种具有生物膜清除活性的化合物,如酰基缩酚酸肽、吡咯霉素、卤代吩嗪和卤代8-羟基喹啉及其衍生物等。本文按照结构和作用机制,对几种主要生物膜清除剂的研究现状进行综述。

酶响应型纳米抗生素的制备及其抗细菌生物被膜性能研究

为解决疏水性抗生素清除细菌生物被膜效果差的问题,本文设计并制备了一种含偶氮苯的诺氟沙星抗生素前药,将其与低聚α-环糊精通过包结络合作用构筑纳米抗生素,并通过核磁氢谱、粒度分析仪、紫外分光光度计和扫描电镜对其响应性降解和抗细菌生物被膜性能进行了详细表征。该纳米抗生素不仅对浮游的革兰氏阴性菌大肠杆菌与革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌展现出了优异的广谱抗菌活性,同时具有良好的亲水性,可在细菌生物被膜中有效渗透,并在过量表达的偶氮还原酶作用下使其中的偶氮键发生响应性降解,从而实现诺氟沙星对细菌生物被膜的高效清除,大大降低了抗生素药物的用量。本文报道的酶响应型纳米药物在治疗细菌感染相关疾病方面具有良好的应用前景。

种植体表面去污处理在种植体周围炎治疗中的作用

种植体周围炎表现为种植体周围组织炎症反应和支持骨组织逐渐丧失,已成为导致种植体失败的主要原因之一。彻底清除种植体表面的菌斑生物膜是种植体周围炎治疗的首要原则,目前已有多种去污处理方法,根据种植体表面菌斑生物膜的作用结局,去污处理方法可分为清除生物膜和杀灭微生物两大类。但尚无一种去污方法能完全清除种植体表面的菌斑生物膜,且缺乏临床推荐指南,因此了解不同种植体表面去污方式的优缺点、有效性及安全性,对指导临床选择种植体周围炎的治疗方式具有重要意义。

表没食子儿茶素没食子酸酯对牙龈卟啉单胞菌细菌毒力抑制作用的体外研究

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin⁃3⁃gallate,EGCG)对牙龈卟啉单胞菌(Por⁃phyromonas gingivalis,P.gingivalis)体外抑菌活性及EGCG对P.gingivalis诱导人牙龈成纤维细胞(human gingi⁃val fibroblasts,HGFs)表达基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)的抑制作用。方法采用微量稀释法分析EGCG对P.gingivalis浮游菌和生物膜的抑制作用。扫描电镜检测EGCG作用下P.gingivalis生物膜微观结构的变化。特异性人工合成显色多肽底物评价EGCG对牙龈素精氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(argi⁃nine gingipain,Rgp)和赖氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(lysine gingipain,Kgp)蛋白水解活性的影响。P.gingi⁃valis刺激HGFs,与EGCG共培养,ELISA检测MMP⁃1和MMP⁃2的蛋白分泌水平,qRT⁃PCR检测MMP⁃1及MMP⁃2 mRNA的表达。结果EGCG对P.gingivalis浮游菌的最低抑菌浓度为62.5μg/mL,最低杀菌浓度为500μg/mL。EGCG可抑制P.gingivalis生物膜形成,并对成熟生物膜具有清除作用,且抑制成熟生物膜的代谢活性。10μg/mL及50μg/mL EGCG可有效抑制牙龈素的水解活性(P<0.05)。此外,50μg/mL EGCG对P.gingivalis刺激HGFs表达及分泌MMP⁃1、MMP⁃2均有抑制作用(P<0.05)。结论EGCG对P.gingivalis有抑菌作用,且可抑制HGFs表达MMPs。

软式内镜一元过氧乙酸消毒液消毒效果

目的评价一元低腐蚀性过氧乙酸消毒液对通过建立铜绿假单胞菌生物膜模型的内镜钳子管道的消毒和生物膜去除效果,并观察验证过氧乙酸消毒液消毒的有效性和时效性。方法生物膜去除效果检测选取奥林帕斯内镜售后服务机构集中回收的临床已使用的内镜钳子管10条搭建生物膜模型后采用过氧乙酸浸泡后抽样。临床观察消毒液有效性和时效性,选取2019年1-12月300条胃镜和300条肠镜作为研究对象,采用过氧乙酸消毒液消毒,统计内镜消毒效果;比较每条内镜连续5 d经步骤a、b来采集样本以检测管道表面附着情况。比较连续使用14 d,浸泡212条内镜后消毒效果。结果内镜钳子管道经过刷洗+过氧乙酸杀灭5 min和15 min,细菌培养无菌生长,生物膜有效去除。胃镜消毒后菌落数平均为(9.362±2.621)CFU低于消毒前菌落数(P<0.001),胃镜消毒合格率为100.00%(300/300)。肠镜消毒后菌落数为0 CFU低于消毒前(P<0.001);肠镜消毒合格率为100.00%。连续使用过程中采集天数对菌落数目无明显影响,且采集天数、采集步骤的交互作用对菌落数目无明显影响。连续使用14 d后浓度仍>1 000 mg/L,为有效浓度,消毒后内镜抽样合格率为100.00%。结论过氧乙酸消毒液在软式内镜消毒中具有较好效果,能有效去除生物膜,具有较高安全性。