菊花清除自由基动力学特性及对羟基自由基介导的2-脱氧核糖裂解的抑制作用

目的研究不同因素对菊花清除自由基能力的影响,鉴定其功能性成分,探索菊花对羟基自由基引导的2-脱氧核糖裂解的抑制作用。方法测定菊花提取液在不同浓度、温度和反应时间条件下对1,1-二苯基-2-苦基肼自由基(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH·)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐阳离子自由基[2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)ammonium salt cationic radical,ABTS^(+)·]的清除率。采用高效液相色谱法,测定了菊花提取液与DPPH·和ABTS^(+)·反应前后供试品溶液中木犀草苷、木犀草素葡萄糖醛酸苷、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C的含量。采用体外Fenton反应实验体系,测定菊花提取液对2-脱氧核糖裂解的保护作用。结果菊花样品浓度、温度和反应时间对DPPH·和ABTS^(+)·的清除率均有影响。与DPPH·和ABTS^(+)·反应后,菊花提取液中7种测定成分的含量均明显降低,是菊花清除自由基的主要功能性成分。菊花提取液对2-脱氧核糖裂解的保护作用与剂量相关。结论菊花具有清除自由基、抑制2-脱氧核糖裂解的作用,研究结果为菊花的深入开发提供了依据。

香辛料体外阻断NDMA及清除自由基的研究

研究7种香辛料(石榴皮、八角、生姜、大蒜、乌梅、丁香及鼠尾草)对N-二甲基亚硝胺(NDMA)体外合成的影响及清除自由基的能力。采用2种溶剂(乙醇、水)制备7种香辛料的提取液,在体外模拟胃液环境下研究其对NDMA生成的阻断效果;同时,考查香辛料提取液对亚硝酸盐及自由基清除率(DPPH自由基清除法、Deoxyribose筛选法和邻苯三酚自氧法)的影响;在此基础上,找出对阻断N-亚硝胺具有协同增效的复配香辛料组合。7种香辛料中,石榴皮、八角、丁香及鼠尾草的水提液和乌梅、生姜和大蒜的醇提液对NDMA生成具有较强的阻断率,其中石榴皮及八角对于亚硝胺的抑制率最强,相当于0.01 mg/mL维C的作用效果;丁香及鼠尾草在抑制亚硝酸盐方面表现良好;不同的香辛料对不同自由基的清除率不同;复配后的香辛料混合液中,石榴皮和鼠尾草(1∶1)不仅对NDMA生成的阻断率可达70.12%,在清除亚硝酸盐方面,也具有最佳清除率75.28%。7种香辛料均有抑制N-亚硝胺生成的效果,对亚硝酸根离子和自由基也具有清除作用,但其抑制亚硝胺生成的机理仍需要进一步的研究。

米口袋清除自由基活性及其成分研究

为了研究中草药米口袋的清除自由基活性及其成分,用2∶1的甲醇:氯仿超声提取米口袋成分,并用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次进行萃取,利用DPPH法、邻二氮菲-Fe2+氧化法和AP-TEMED法进行清除自由基活性实验,同时与合成抗氧化剂BHT进行对照。结果显示乙酸乙酯提取物(EAF)具有最高的清除自由基活性,大于人工合成抗氧化剂BHT。利用硅胶,RP-18和Sephadex LH-20对其进行活性追踪分离,得到3种纯的清除自由基活性成分。利用1D、2DNMR和ESI-MS对其结构进行鉴定。结果显示为槲皮素-3-O-葡萄糖甙,芹菜素和4',7-二羟基黄酮。抗氧化活性大小顺序为槲皮素-3-O-葡萄糖甙>芹菜素>4',7-二羟基黄酮>EAF>BHT。含酚羟基化合物的清除自由基活性与其结构密切相关。活性大小主要取决于酚羟基的数目。本研究结果证明:米口袋及其活性成分具有很强的清除自由基作用。可作为一种高效的新型清除自由基天然食品添加剂使用,具有广泛的应用前景。

北五味子乙素清除自由基及体外抑菌作用的研究

对五味子乙素进行清除自由基及体外抑菌实验。结果表明:五味子乙素对自由基的清除效果明显,其中对羟自由基清除作用大于相同质量浓度的VC,其半数清除质量浓度为0.2mg/mL;对超氧阴离子自由基清除作用小于VC,其半数清除质量浓度为0.24mg/mL。五味子乙素提取液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用,其中对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,最低抑菌浓度为0.25mg/mL,对根霉、黑曲霉、南洋酵母无明显抑菌活性。

苹果多酚抗氧化作用及其清除自由基能力的研究

苹果多酚是一类很强的抗氧化剂,具有较好清除自由基的作用。还有抗变异原性、防龋齿作用、抑制血压上升等生理功能,极具开发潜力。以猪油、芝麻油为底物,采用碘量法研究了苹果多酚的抗氧化性,结果表明,苹果多酚对油脂的脂质过氧化有良好的阻断作用,且抗氧化效果随其用量的增加而加强。在油脂中按油重的0.5%添加苹果多酚,可延长芝麻油出厂期4 d,过氧化值为10.49 mmol/kg,抑制率达到36.78%;对猪油的抗氧化性在第6天时达到最大,抑制率达到61.78%。由此可见,苹果多酚对延长芝麻油的保质期有明显的功效,对植物油和动物油均有较明显的抗氧化作用。在此基础上,对苹果多酚清除DPPH自由基的动力学性质进行了研究,并与茶多酚比较其抗氧化能力。结果表明:苹果多酚清除DPPH自由基速度快,EC50值为0.07,而茶多酚的EC50值为0.075,表现出比茶多酚较强的抗氧化能力,具有良好的发展前景。

红薯梗中清除自由基活性成分的研究

本实验将红薯梗以甲醇粗提后,再用有机溶剂梯度萃取,并测定了各组分清除DPPH·以及O2-·自由基的活性。实验结果表明,红薯梗各提取物对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH·)和O2-·自由基有程度不同的清除作用。对两种自由基的清除均以乙醚组分效果最好,其中清除DPPH·的活性为同浓度茶多酚的1.6倍。提纯后的乙酸乙酯的主要组分,经紫外、可见分光光度计法的测定推测,其结构类型应为二氢黄酮类。

芜菁多糖提取工艺及清除自由基活性的研究

在单因素实验的基础上,应用响应面法对芜菁多糖的提取工艺进行优化。测定了芜菁多糖清除自由基的活性。结果表明:芜菁多糖的最佳提取工艺为,浸提温度80℃,浸提时间2.5 h,液料比(30∶1)(mL∶g)。此条件下芜菁多糖的得率为8.858%,接近于理论值。芜菁多糖的体外清除自由基活性实验证明,芜菁多糖(WJc)对羟自由基的清除活性较好。

鸡骨草总黄酮清除自由基及抑制亚硝化作用研究

目的研究鸡骨草总黄酮清除自由基及对亚硝化反应的抑制能力。方法采用超声辅助乙醇浸提的方法提取鸡骨草中的黄酮类化合物,采用水杨酸及邻苯三酚自氧化法测定鸡骨草总黄酮对羟自由基的清除作用、超氧阴离子自由基的清除作用;通过分光光度法测定鸡骨草总黄酮对亚硝酸盐的清除率和对亚硝胺合成的阻断率。结果鸡骨草总黄酮的含量为20.60%,对羟自由基和超氧阴离子自由基具有一定的清除作用;在模拟人体胃液的条件下(pH为3.0、温度37℃),鸡骨草总黄酮能有效地清除亚硝酸盐和阻断亚硝胺合成,随反应浓度增加清除率和阻断率增加。结论鸡骨草总黄酮具有一定清除自由基与抑制亚硝化反应能力,且二者之间有一定的相关性。

瓜馥木总黄酮提取纯化及其清除自由基活性研究

目的:研究瓜馥木总黄酮最佳提取工艺,并将总黄酮进行富集纯化,测试其清除自由基活性。方法:采用正交实验,考察乙醇浓度、提取温度、固液比及提取时间4个因素对该工艺的影响;利用AB-8大孔吸附树脂分离纯化总黄酮粗品;采用清除DPPH自由基初步评价瓜馥木提取物及总黄酮的抗氧化能力。结果:确立了瓜馥木总黄酮的最佳提取工艺为:提取时间3 h,乙醇浓度90%,固液比1∶10,提取温度为70℃。黄酮粗品经AB-8大孔树脂纯化以后,含量可达到55%以上。结论:优选出的最佳提取工艺条件及纯化总黄酮的方法对进一步的工艺开发有较好的参考价值,瓜馥木富集纯化的总黄酮部位具有较强的清除自由基能力,为开发成为中药保健品提供了一定的依据。

白灵菇多糖的分离纯化及清除自由基研究

对白灵菇子实体粗多糖进行分离纯化与纯度鉴定,并应用化学发光法对多糖清除羟自由基(.OH)和超氧阴离子自由基(O2.)的能力进行研究。结果表明,利用Savag法脱法蛋白质、透析法脱法小分子物质以及醇沉后得到的粗提物,经DEAE-Cellulose52和SephadexG-200柱层析后得到纯品;采用UV、琼脂糖凝胶电泳以及SephadexG-200方法鉴定这种物质PNFPⅡ-a是一种纯多糖;而且这种子实体纯多糖具有较强的抗氧化活性,能显著消除O2.和.OH。

木耳黑色素的发酵制备及其清除自由基活性研究

黑色素具有抗氧化、清除自由基、刺激免疫等一系列的生物活性。本文以深层发酵法制备木耳黑色素,并对木耳黑色素进行体外抗氧化作用研究,考察了碳、氮源、金属离子对木耳菌产黑色素的影响,用Box-Behnken设计结合响应面分析法优化了发酵培养基组成。结果表明,最佳发酵培养基为:酪蛋白0.747%、可溶性淀粉1.726%、Ca CO30.140%,在此条件下木耳黑色素的产量可达170.37 mg·L-1。在一定范围内,发酵制备的木耳黑色素具有较强的清除超氧阴离子自由基和ABTS阳离子自由基能力。木耳黑色素是一个天然和有效的抗氧化剂,深层发酵是生产这一活性物质的有效方法。本研究为木耳黑色素的工业发酵生产奠定了基础。

黑胡椒和白胡椒精油抗氧化性能及清除自由基能力的比较

黑胡椒精油(BPEO)和白胡椒精油(WPEO)的抗氧化活性的测定是基于总体抗氧化能力、清除超氧阴离子自由基能力、清除羟基自由基能力、铁离子还原能力、抗亚油酸脂质过氧化能力五个方面,并与其他的合成抗氧化剂如BHT,PG,Vc做比较。实验结果表明,在一定浓度范围内,黑、白胡椒精油清除超氧阴离子自由基的能力强于BHT、PG和VC;被测样品的羟自由基清除率BHT>BPEO>WPEO>PG>Vc;精油能有效抑制亚油酸的过氧化反应。实验表明黑、白胡椒精油都具有良好的抗氧化效果,且黑胡椒精油强于白胡椒精油。

固态发酵生产菜籽肽及其清除自由基能力的研究

以菜籽粕为原料,氮溶解指数、氨基酸态氮、肽含量、蛋白酶活力为评价指标,研究枯草芽孢杆菌固态发酵生产菜籽肽的动态效果,探讨菜籽肽清除自由基的能力。结果显示,随着发酵时间的延长,蛋白酶活力、氮溶解指数和多肽含量呈先升高后降低趋势,在发酵中期(3d)达到最大值,分别为1840U/ml、70%和7.5mg/ml;菜籽肽清除自由基的能力与菜籽肽的浓度呈正相关,7.5mg/ml的菜籽肽对DPPH.、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率分别为88.5%、71.2%和83.1%;凝胶过滤色谱分析结果表明,随着发酵的进行,产生了许多小分子质量菜籽肽,并且分子量越小的菜籽肽清除自由基的能力越强。

毛杨梅树皮提取物抗氧化及清除自由基活性初步研究

毛杨梅树皮提取物中的主要成分为局部梧酰化的聚原翠雀定，具有比原花青定抗氧化活性更强的化学结构特征。本研究以水为提取剂，通过强化提取、絮凝沉降、溶剂萃取、吸附分离等手段从树皮中提取分离得到产物，并经花色素反应定性和IR谱图鉴别。用凝胶渗透色谱法（GPC）和蒸汽渗透压法（VPO）测定产物的相对分子质量（Mr）及其分布，产物中95％以上组分的数均相对分子质量（Mn）为1705（相当于聚合度4-5），其余组分的Mn为798。用化学法测定目标产物分子中C-3的掊酰化度为38％。生物活性功能测定结果表明，目标产物能明显抑制油脂过氧化；络合Fe^2＋金属离子能力为181mg／g；1mg目标产物对1，1-二苯基-2-苦基肼（DPPH）自由基的清除速率为0．23mg／min，清除率为92％（试验浓度：产物与DPPH质量比为1：1．8），强于马尾松树皮原花色素试样。初步研究结果表明，毛杨梅树皮提取物可望进一步开发成为新型天然抗氧化及自由基清除荆。

余甘子树皮提取物抗氧化及清除自由基活性初步研究

余甘子树皮提取物的主要成分为局部棓酰化的聚原翠雀定-原花青定混合物,具有强抗氧化活性的化学结构特征。试验结果表明,采用超声波强化提取、冷冻絮凝沉降和大孔树脂吸附等方法提取分离获得的目标产物对1,1-二苯基-2-苦基-肼(DPPH)自由基的清除效率平均达91.13%,略高于茶多酚;对金属离子Fe2+的络合能力达358mg/g;抑制脂质过氧化能力强于马尾松树皮提取物。研究表明余甘子树皮提取物可望进一步开发成为新型天然抗氧化及自由基清除剂。

一氧化氮对采后水蜜桃果实衰老和清除自由基酶系影响

为研究一氧化氮(NO)处理对采后水蜜桃果实衰老和清除自由基相关酶的影响,分别采用0、5、10、20和30μL/L的NO气体熏蒸水蜜桃,然后置于20℃下贮藏10 d。结果表明:10μL/L的NO处理可有效地抑制水蜜桃果实软化。对自由基清除酶系影响研究表明,NO处理提高了贮藏期果实超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)和单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性,保持了较高抗坏血酸(ASC)含量。因此,适宜浓度(10μL/L)的NO处理能提高桃果实清除自由基酶系能力,抑制膜脂过氧化并保持细胞膜完整性,进而改善贮藏品质。

中国、印度产白豆蔻精油清除自由基能力研究

从总体抗氧化能力、清除超氧阴离子自由基能力、清除羟基自由基能力三个方面,以合成抗氧化剂没食子酸丙酯(PG)作为参照物,分别评价了白豆蔻精油的抗氧化活性,并进一步比较了中国与印度产白豆蔻的抗氧化性能。结果表明:在精油浓度为0.5～2.0mg/mL的浓度范围内,中国、印度产白豆蔻精油清除超氧阴离子自由基的能力强于PG。在1×10-5～5×10-5mg/mL的浓度范围内,中国、印度产精油清除羟基自由基的能力强于PG。从而说明白豆蔻精油具有良好的抗氧化效果,且印度产白豆蔻精油抗氧化性略强于中国产白豆蔻精油。

半枝莲、白花蛇舌草及其药对提取物抗氧化及清除自由基活性

采用几种化学及生物学模型考察了半枝莲、白花蛇舌草及其药对提取物抗氧化及清除自由基活性。研究结果表明三种提取物中,半枝莲提取物还原能力、清除DPPH及.OH自由基能力最强,药对提取物螯合Fe2+能力以及保护DNA免受自由基损伤能力最强。提示提取物抗氧化及清除自由基活性可能与其黄酮组成及含量相关。推测药对的抗癌作用机理可能与金属离子的螯合能力和对DNA损伤的保护作用等有关。

五味子多糖的分离纯化及清除自由基研究

应用水提醇沉以及多种方法除蛋白,从五味子果实中获得一种粗多糖SCP-BII。SCP-BII经DEAE-Cellu-lose52和Sephadex G-200柱层析后得到单一组分SCP-BII。应用化学发光法对SCP-BII的清除·OH和O2·的能力进行了研究,结果表明:SCP-BII对·OH和O2·均具有明显的清除能力。

野葛异黄酮糖苷的分离纯化及体外清除自由基活性的研究

以野葛的根样为试材,依次通过总黄酮提取、有机溶剂分级分离和柱色谱法进行分离纯化,获得4种异黄酮糖苷组分,依据核磁共振谱和质谱分析结果分别鉴定为葛根素、大豆苷、芒柄花苷和染料木苷。采用1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH·)的有机自由基体系和超氧阴离子(O2-·)的无机活性氧自由基体系,对上述4种异黄酮糖苷化合物的体外清除自由基能力和抗氧化活性进行测定。结果表明,4个异黄酮糖苷组分对DPPH·自由基和O2-·自由基均具有一定的清除活性,清除能力的大小与处理浓度均成正相关关系,对DPPH·自由基的清除效果由高到低依次为染料木苷、大豆苷、葛根素和芒柄花苷,抑制O2-·自由基能力由强到弱依次为葛根素、大豆苷、染料木苷和芒柄花苷。