山楂酒甲醇含量的测定及清除DPPH和ABTS自由基活性的研究

建立了山楂酒中甲醇测定的GC分析方法,并对清除DPPH和ABTS自由基活性进行了研究。结果表明：山楂酒在发酵9~425 d时,其甲醇含量呈逐渐上升的趋势,在564~730 mg/L之间。山楂酒具有较强的DPPH和ABTS自由基活性的能力。随着时间的延长,山楂酒DPPH·和ABTS＋·清除能力呈下降趋势。

不同豆浆制备工艺活性成分与ABTS自由基清除能力比较研究

本研究以15个品种的大豆为原料,分别以湿法熟浆、湿法生浆、干法熟浆和干法生浆4个工艺进行加工,通过福林酚法、RP-HPLC和ABTS法对各个样品中的总酚舍量、总黄酮含量、没食子酸和原儿茶酸两种主要酚酸含量和ABTS自由基清除能力进行检测分析。测定结果表明:不同工艺制备样品的总酚含量、总黄酮含量、酚酸含量与ABTS自由基清除能力均具有显著性差异(p<0.05),4种工艺的总分酸含量与其ABTS自由基清除能力均呈线性相关性,熟浆制备的酚酸含量与其ABTS自由基清除能力呈线性相关性,湿法制备的总黄酮含量与ABTS自由基清除能力具有线性正相关性。

不同基因型甘薯叶片酚类质量分数及PPO,POD活性的差异

以86个甘薯基因型的叶片为供试材料,研究其总多酚、绿原酸和干物质的质量分数,多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)活性,ABTS自由基清除能力在基因型间和不同的色泽与干物质质量分数群体之间的差异及其相关性,以期为甘薯叶片相关育种与利用研究奠定一些基础.结果表明:甘薯叶片总多酚和绿原酸的质量分数、ABTS自由基清除率在基因型间和不同干物质质量分数基因型群体间差异有统计学意义,总多酚和绿原酸的质量分数及其ABTS自由基清除能力与叶片干物质质量分数之间呈显著正相关.PPO,POD活性在基因型间的差异有统计学意义,但与叶片色泽、干物质、总多酚和绿原酸的质量分数以及ABTS自由基清除能力间没有明显的相关性规律.

红曲糟源酶解蛋白肽的功能性评价

【目的】研究不同蛋白酶对红曲糟酶解的效果,并对其酶解液进行功能性评价,为红曲糟源蛋白肽的研发制备提供理论支持。【方法】以提高蛋白含量后的红曲糟为原料,利用碱性蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、胃蛋白酶、复配酶制剂F106、酵母抽提酶等不同蛋白酶进行酶解,考察其酶解率、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除抗氧化能力、黄嘌呤氧化酶(Xanthine oxidase,XOD)和血管紧张素转化酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制活性等生物活性功能。【结果】蛋白酶解率最高的为动物蛋白酶和胰蛋白酶酶解处理,分别为(71.43±1.03)%和(70.20±0.32)%。DPPH自由基清除抗氧化能力最优的是胃蛋白酶、碱性蛋白酶和酵母抽提酶酶解处理,蛋白肽的半数效应浓度(Median effective concentration,EC50)分别为(2.78±0.34)mg·mL^(-1)、(3.02±0.03)mg·mL^(-1)、(3.24±0.65)mg·mL^(-1);ABTS自由基清除抗氧化能力、XOD抑制活性能力最优的均为胃蛋白酶和碱性蛋白酶酶解液,其蛋白肽的EC50值分别为(1.54±0.07)mg·mL^(-1)、(6.45±0.27)mg·mL^(-1)和(10.71±0.06)mg·mL^(-1)、(17.68±0.04)mg·mL^(-1),二者的XOD半数抑制指数分别为(1.28±0.01)、(1.78±0.03);ACE抑制活性最优的为碱性蛋白酶酶解液和木瓜蛋白酶酶解液,蛋白肽的EC50值均为(0.27±0.01)mg·mL^(-1),半数抑制指数分别为(118.40±3.53)、(98.35±1.95)。【结论】红曲糟源蛋白经不同蛋白酶酶解后的肽段具有不同的生物活性,其中以胃蛋白酶酶解的XOD抑制活性能力较强,碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解的ACE抑制活性较优。

核桃粕固态发酵酱油的制备及抗氧化性分析

目的:以米曲霉为菌种制备核桃酱油,开发功能性酱油。方法:制备酱油基础上,利用高效液相色谱仪、全自动氨基酸分析仪和气相色谱仪测定酱油营养成分,使用超滤对10 kDa以下组分进行分离,然后测定核桃酱油组分中多肽含量、ABTS自由基清除能力、羟自由基清除能力及DPPH自由基清除能力。结果:核桃酱油中16种氨基酸总含量为4.86 g/100 g,不饱和脂肪酸含量占脂肪酸总量的82.84%。核桃酱油组分中多肽含量为6.804 g/100 mL,当多肽质量浓度为3.6 mg/mL时,核桃酱油组分ABTS自由基清除能力达到95.13%、羟自由基清除能力达到28.20%、DPPH自由基清除能力达到20.08%。结论:核桃酱油组分具有较高的抗氧化性,且其抗氧化能力与多肽含量有关。

玉米源活性肽对脂质过氧化的抑制作用研究

玉米肽具有良好的自由基和活性氧清除等抗氧化活性,但对其脂质过氧化抑制作用的报道较少。本研究利用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶以及模拟胃肠道消化(胰液酶+胃蛋白酶)水解制备玉米源活性肽,测定了不同蛋白酶所制备的玉米肽对ABTS自由基的清除活性,系统评价了其对亚油酸过氧化、蛋黄脂质过氧化和动物肝脏脂质过氧化的抑制作用。结果显示不同蛋白酶制备的玉米肽均具有一定的ABTS自由基清除活性以及脂质过氧化抑制作用,其中,模拟胃肠道消化所制备的玉米肽ABTS自由基清除活性最强,清除率最高达到(78.61±0.56)%;风味蛋白酶制备的玉米肽的亚油酸过氧化抑制作用最强,抑制率最高为(72.54±1.15)%;碱性蛋白酶制备的玉米肽的卵黄脂质过氧化的抑制作用最强,抑制率最高达到(82.50±0.46)%;模拟胃肠道消化制备的玉米肽的动物肝脏脂质过氧化抑制作用最强,抑制率最高达到(61.96±0.34)%。

不同提取方法对双叉犀金龟蛋白质提取率及体外抗氧化活性的影响

双叉犀金龟(Allomyrina dichotoma)蛋白质含量丰富,是一种重要的资源昆虫。采用碱提法、酸提法、盐提法和醇提法分别提取双叉犀金龟幼虫蛋白质,并以DPPH自由基清除活性、ABTS自由基清除活性和总还原力为指标,测定4种方法所提取的蛋白质的抗氧化活性。结果显示:碱提法蛋白质提取率显著最高,蛋白质浓度与抗氧化活性之间呈现良好的正相关关系,但不同种类蛋白质的抗氧化能力有所不同;其中盐溶蛋白的DPPH自由基清除活性及总还原力最强,IC_(50)和A_(700)为1时的浓度分别0.360 4和4.780 5 mg·mL^(-1);酸溶蛋白的ABTS自由基清除活性最强,IC_(50)为4.439 0 mg·mL^(-1)。综合来看,提取方法不同时,双叉犀金龟蛋白质具有一定的ABTS自由基清除活性、较高的DPPH自由基清除活性和总还原力,可为后续进一步向食品、医药等方向开发利用提供理论参考。

碱性蛋白酶水解苦荞的抗氧化活性研究

苦荞生物活性肽生理保健功能的实现主要依赖于其自身的抗氧化活性,为此提出碱性蛋白酶水解苦荞的抗氧化活性研究。以西荞2号和2.4 AU/g的2709碱性蛋白酶为试验材料,在配制苦荞蛋白的基础上,以温度、pH值、2709碱性蛋白酶的使用量以及水解时间为因素指标,分别构建3个不同的因素水平,采用正交试验的方式进行测试。对于苦荞碱性蛋白酶水解抗氧化活性的检测,以DPPH自由基的清除能力和ABTS+自由基清除能力为评价指标。根据测试结果发现,在温度参数为45.0℃、pH值设置为9.0、2709碱性蛋白酶使用量为60.0 AU/g、水解时间为4.0 h的条件下,碱性蛋白酶水解苦荞的抗氧化活性最高;在测试的4个因素中,温度对苦荞水解产物的抗氧化活性影响最明显,其次是pH值;当达到最优水解时间条件后,水解时间对苦荞水解产物的抗氧化活性影响不显著。

紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物抗氧化能力研究

目的评价紫斑牡丹花粉的不同浓度乙醇提取物的抗氧化能力。方法通过测定紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物的3种抗氧化能力(铜离子还原能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力),对紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物的抗氧化性能进行评价。结果铜离子还原能力法测得紫斑牡丹花粉无水乙醇提取物、75%乙醇提取物、50%乙醇提取物、25%乙醇提取物和水提取物的抗氧化活性没食子酸量依次为26.00、28.33、28.90、14.98、9.24 mg/g;紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物的清除DPPH自由基和ABTS自由基能力均低于维生素C,其顺序依次为:50%乙醇提取物>75%乙醇提取物>无水乙醇提物>25%乙醇提取物>水提取物。结论紫斑牡丹花粉不同浓度乙醇提取物均具有较强的抗氧化能力,以50%、75%乙醇提物的抗氧化能力最强。

笃斯越桔花青素在不同pH条件下热稳定性的研究

研究分析了笃斯越桔花青素提取物(BBAE)在不同pH条件下热稳定性的变化,测量指标包括吸光值、颜色及其ABTS自由基清除能力。研究结果表明:在pH4～6加热时,BBAE的吸光值无明显变化,提示其在酸性条件下有较好的稳定性。在pH7和pH8加热时,尤其在pH7时,BBAE的吸光值明显降低,表明BBAE在pH7条件下的热稳定性最差。通过色差仪测定BBAE溶液的L*、a*、b*值从而算出H(色调)值。随着加热温度的升高,pH为4～8时的BBAE溶液的H值呈现不同程度的升高,且逐渐趋近于90°。这表明在加热过程中,BBAE溶液的颜色由最初的红色逐渐向黄色转变。pH为7时的BBAE溶液在吸光值降低,颜色变黄的同时,其ABTS自由基清除率也有显著性的下降。

不同提取工艺翅果油抗氧化能力与活性成分的分析

采用DPPH自由基、ABTS自由基、羟基自由基清除能力法和PF还原法测定了不同提取工艺(超临界CO2流体萃取法,有机溶剂提取法,直压冷榨法,直压热榨法和红外热榨法)制得的翅果油、翅果油中极性和非极性部分的抗氧化能力,同时对翅果油中的微量活性成分进行了分析,并对翅果油中微量活性成分含量与其抗氧化能力进行了相关性分析。结果表明,除羟基自由基清除能力外,不同翅果油对DPPH自由基、ABTS自由基清除能力和Fe3+还原能力不同,5种提取工艺所得翅果油的极性部分抗氧化活性最强,全油次之,非极性部分抗氧化活性最弱。在翅果油的极性部分中,红外热榨法的DPPH自由基清除能力最强,为1080.35μmolTE/100 g,直压冷榨的羟基自由基清除能力最强,为38272.82μmolTE/100 g,有机溶剂提取的ABTS自由基清除能力最强,为2000.76μmolTE/100 g,红外热榨的Fe3+还原能力最强,为2771.89μmolTE/100 g。翅果油中微量生物活性成分与抗氧化活性相关性分析表明,翅果油中的生物活性成分含量与4种抗氧化活性指标均呈极显著正相关(p<0.01),γ-生育酚、δ-生育酚和羽扇豆醇是翅果油中重要的抗氧化基础物质。

pH对模型体系Maillard反应产物抗氧化性的影响

以ABTS(2,2’-联氮-二-(3-乙基-苯并噻唑啉-6-磺酸))自由基清除能力和还原能力为抗氧化性评价指标,研究了葡萄糖-酪氨酸和葡萄糖-组氨酸两种模型体系在不同初始pH下(pH=5、7、9)反应生成的Maillard反应产物(MRPs)的抗氧化性。结果表明:对于葡萄糖-酪氨酸体系,MRPs的ABTS自由基清除能力和还原能力均在碱性条件下最大;对于葡萄糖-组氨酸体系,MRPs的ABTS自由基清除能力在碱性条件下最大,还原能力在酸性条件下最大;相关性分析显示来自两种体系的MRPs的抗氧化性与紫外吸收(A280nm)和棕色化程度(A420nm)均呈一定的线性相关性,表明紫外可见吸收可用来指示葡萄糖-酪氨酸/组氨酸体系MRPs的抗氧化能力的变化规律。

体外模拟消化对牦牛骨胶原蛋白肽抗氧化活性的影响

牦牛骨胶原蛋白经酶解产生的牦牛骨胶原蛋白肽有良好的抗氧化性,为评估其是否适合应用于营养品或保健品的开发,需要研究胃肠道消化对牦牛骨胶原蛋白肽抗氧化活性的影响。研究使用胃蛋白酶、胰液等物质对牦牛骨胶原蛋白肽进行体外模拟胃肠消化,采用水解度、分子质量分布、氨基酸组成对模拟消化前后牦牛骨胶原蛋白肽进行表征,并测定样品·OH清除能力、Fe^(2+)螯合能力及ABTS阳离子自由基清除能力以评估模拟消化对样品抗氧化能力的影响。结果显示,经过体外模拟胃肠消化后,对抗氧化性能起决定性作用的疏水氨基酸含量并无显著变化。分子质量>1000 Da的组分显著降低,且降幅超过50%;<500 Da的组分显著升高,分子质量介于180~1000 Da的主体部分无明显变化。消化前后除·OH清除能力无明显差异外,其他抗氧化性均有提高,表明严苛的胃肠消化不能破坏牦牛骨的抗氧化性功能肽。因此牦牛骨胶原蛋白肽适合应用于营养品和保健品。

猪胸腺提取物在化妆品中的抗氧化功效研究

近年来,生物活性肽中的抗氧化活性肽能够清除自由基、保护细胞抵御氧化应激损伤,从而达到抗衰老的生物活性逐渐被证实。目前,关于猪胸腺提取物抗氧化能力的研究鲜见报道。本次试验以北京修正制药有限公司提供的猪胸腺提取物为研究对象,通过生物体外的DPPH自由基与ABTS+自由基清除试验,探讨其抗氧化能力。结果表明,猪胸腺提取物的浓度为5%~7%时,清除DPPH自由基和ABTS^(+)自由基能力较强,最大清除率分别为20.44%、59.36%,结果说明猪胸腺提取物是具有良好的抗氧化效果。因此,将猪胸腺提取物作为化妆品中天然抗氧化活性物质应用时,其推荐添加量应在5%以上。

响应面优化虾加工副产物酶解制备抗氧化肽的研究

利用响应面法优化虾加工副产物酶促水解制备具有清除ABTS自由基能力抗氧化肽的工艺条件。结果表明,碱性蛋白酶最佳水解条件为pH 8.4、温度59.6℃、加酶量597.3 U/g、时间120 min。在此条件下酶解,水解度达40.2%,ABTS自由基清除率为38.8%,平均肽段长度2.5;水解液经凝胶色谱测定,其肽分子量低于6.5 kDa,大部分集中于1-5 kDa。

雪灵芝醇提物不同极性萃取部分的体外抗氧化活性

目的:通过体外抗氧化和还原活性评价实验,研究藏药雪灵芝乙醇提取物不同极性溶剂萃取部分的抗氧化作用。方法:用体积分数95%的乙醇回流提取雪灵芝粉末,浓缩的乙醇浸膏依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,各部分分别配制成适当浓度的溶液,采用1,1-二苯基-2-苦基肼(DPPH)自由基法,2,2-连氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉磺酸-6)二铵盐(ABTS)自由基法和铁离子还原/抗氧化能力(FRAP)法分别测定各部分的自由基清除能力和铁离子还原力。结果:雪灵芝醇提物的4个萃取部分均具有一定的体外抗氧化作用,其中乙酸乙酯与正丁醇部分清除DPPH·,ABTS+·及还原Fe3+的能力均比二氯甲烷与石油醚部分强。结论:雪灵芝提取物清除能力与提取物样品浓度在一定范围内具有良好的量效关系,其中极性较大的乙酸乙酯部分和正丁醇部分的抗氧化活性及还原能力相对较强。

碱性蛋白酶水解扇贝边条件的优化

以水解度为考察指标,在单因素实验的基础上,利用正交试验对碱性蛋白酶水解扇贝边的条件进行了优化,并且对在最适酶解条件下制得的酶解液的抗氧化活性进行了研究。结果表明:碱性蛋白酶酶解扇贝边的最适条件为,[S]/[E]为12、温度为60℃、酶解时间为240 min、p H值为11。在最适酶解条件下制得的扇贝边酶解液对DPPH和ABTS+自由基均具有显著的清除作用,且表现出一定的量效关系。

三种有机酸对红豆越橘花青素的热稳定性研究

研究分析了红豆越橘花青素在光照和不同pH条件下花青素稳定性的变化;以及添加抗坏血酸、草酸和苹果酸后对花青素稳定性的影响。通过测定吸光值、颜色、ABTS和DPPH自由基清除能力等指标来反映花青素的稳定性。研究结果表明:红豆越橘花青素在可见光谱520 nm处有典型吸收峰;随着光照时间延长,吸光值也逐渐降低,最初2 d下降较明显,约下降30%;pH值为4～6的弱酸性条件下,吸光值无显著变化,随着pH增加,吸光值明显降低,pH值为7时吸光值变化最显著(p<0.05);草酸和苹果酸对红豆越橘花青素加热时吸光值和抗氧化性的改变均起稳定性作用;抗坏血酸会促进红豆越橘花青素吸光值的降低。

百草枯染毒小鼠血清的总抗氧化态变化

目的探讨小鼠腹腔注射百草枯对其血清总抗氧化态的影响。方法小鼠随机分为对照组和百草枯染毒组(PQ组),PQ组小鼠又分别按照50、70、100、150、200和300 mg/kg的百草枯染毒剂量分成6组,给予一次性腹腔注射百草枯;PQ组小鼠分别在染毒后1 h和3 h留取血样,与对照组比较血清ABTS自由基清除率;每个血样采集点均有5个样本。结果不同染毒剂量组小鼠染毒后1 h、3 h的血清ABTS自由基清除率显著低于对照组小鼠(P<0.05);血清ABTS自由基清除率与染毒剂量和检测时间之间无显著相关性。结论百草枯染毒后小鼠的血清ABTS自由基清除率下降,血清总抗氧化态降低。

海绵共附生真菌Alternaria sp.F49抗氧化次级代谢产物研究

利用硅胶柱色谱、凝胶柱、反向柱色谱和高效液相等手段对海绵共附生真菌Alternaria sp.F49在PDB培养基中的代谢产物进行分离纯化,从中分离得到了7个化合物。通过理化性质、波谱分析方法结合文献对照,鉴定了化合物的结构分别为:(8R)-5-O-methyl-orcinotriol(1)、orcinotriol(2)、α-acetylorcinol(3)、3’-hydroxyalternariol 5-O-methyl ether(4)、altenusiol(5)、altenusin(6)和5’-methoxy-6-methyl-biphenyl-3,4,3’-triol(7),其中(8R)-5-O-methyl-orcinotriol(1)是一个未见报道的新苯酚类化合物。体外抗氧化活性测定结果表明,化合物4~7具有强的DPPH自由基清除活性;化合物1~7具有强的ABTS自由基清除活性。