基于网络药理学与体外实验研究清髓消炎汤治疗骨髓炎的作用机制

通过TCMSP和BATMAN-TCM数据库筛选经验方中的中药化合物及作用靶点;通过GeneCards、DRUGBANK、TTD数据库查找骨髓炎疾病相关靶点,取疾病与中药化合物靶点的交集靶点预测清髓消炎汤治疗骨髓炎的潜在靶点.运用Cytoscape软件构建分析“中药-成分-成分作用靶点-疾病靶点”网络图;利用STRING数据库平台分析作用靶点PPI网络;通过DAVID、微生信数据库对作用靶点进行GO功能和KEGG通路的富集分析.利用AutoDockTools及PYMOL软件对清髓消炎汤中核心靶点与疾病的核心靶点进行分子对接与体外实验验证清髓消炎汤对骨髓炎常见耐药菌MRSA的抑制,探索清髓消炎汤治疗骨髓炎的作用机制.筛选得到清髓消炎汤中289个成分靶点,骨髓炎有944疾病靶点,得到交集靶点83个.通过网络拓扑学分析得到主要有效成分quercetin、luteolin、fisetin、kaempferol、baicalein、naringenin,主要作用靶点TNF、IL-6、IL-10、STAT3、IL-1β、MAPK14等.主要成分与靶点分子对接结果均为负数,均有很好的自由结合能力.清髓消炎汤(Qingsui Xiaoyan Decoction,QSXYD)对MRSA的MIC和MBC分别是31.3和62.5 mg/mL;QSXYD影响MRSA生物被膜(MRSA-BF)内的活菌量和生物被膜的代谢活性,并呈现剂量依赖(P<0.05);SEM显示QSXYD影响细菌的个体大小、结构疏密程度、菌体表面的形态;RT-PCR结果显示sub-MIC浓度的QSXYD可明显抑制MRSA相关毒力基因与生物膜形成相关基因的表达(P<0.05).通过网络药理学和体外实验等方法研究结果显示,清髓消炎汤可以通过多靶点、多通路作用于治疗和预防骨髓炎,为清髓消炎汤临床应用于治疗骨髓炎提供理论依据.

清髓消炎汤联合聚维酮碘在预防创伤性开放性骨折后的创面感染的应用价值

探究在预防创伤性开放性骨折后的创面感染中应用清髓消炎汤联合聚维酮碘的应用效果。方法 选取参与单位2021年1月-2022年12月期间就诊的创伤性开放性骨折患者230例作为研究对象,采用随机数字表法,分为单纯聚维酮碘组(对照组,n=115)和清髓消炎汤联合聚维酮碘(实验组,n=115),分析患者血清炎性指标、创面感染发生率及Gustilo-Anderson分型情况。结果 与对照组比较,清创前,两组患者的白细胞计数、血沉、CRP水平无较大差异,Gustilo-Anderson分型无较大差异清创后3天及7天,Gustilo-Anderson分型Ⅱ型与之无较大差异(P>0.05),清创后3天及7天,实验组的白细胞计数、血沉、CRP水平更优,Gustilo-Anderson分型中,Ⅰ型患者数量更多,Ⅲ型患者数量更少,发生创面感染概率更低,差异明显,P<0.05。结论 在预防创伤性开放性骨折后的创面感染中应用清髓消炎汤联合聚维酮碘开展治疗,可降低炎性指标,改善患者开放性骨折病症情况,降低创面感染概率。

基于生物膜探讨清髓消炎汤对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用及其机制研究

目的 研究清髓消炎汤(Qingsui XiaoyanDecoction, QSXYD)对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus, MRSA)毒力和生物膜的影响,探讨QSXYD对MRSA的体外抑菌机制。方法 采用微量肉汤稀释法检测QSXYD对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),在此基础上绘制24h的时间-生长曲线;选择亚抑菌浓度(sub-MIC)观察QSXYD对MRSA的H2O2敏感性;XTT实验检测QSXYD对MRSA生物被膜内的活菌量,评估QSXYD对MRSA生物被膜的代谢活性;扫描电镜(SEM)检测QSXYD对MRSA形态学的影响;激光共聚焦(CLSM)检测QSXYD对MRSA生物膜内细菌活力的影响;实时荧光定量(Real-time PCR)检测sub-MIC QSXYD对MRSA对生物膜形成基因icaA、icaB、icaC、icaR表达的影响。结果 QSXYD对MRSA的MIC和MBC分别是31.3mg/mL和62.5mg/mL;QSXYD能够增强H2O2对MRSA的敏感性(P<0.05);QSXYD影响MRSA生物被膜(MRSA-BF)内的活菌量和生物被膜的代谢活性,并呈现剂量依赖(P<0.05);SEM显示QSXYD影响细菌的个体大小、结构疏密程度、菌体表面的形态;CLSM结果显示MRSA活菌量随着QSXYD浓度增加而减少,MRSA死菌量随着QSXYD浓度增加而增加;RT-PCR结果显示sub-MIC浓度的QSXYD可明显抑制MRSA生物膜形成相关基因的表达(P<0.05)。结论 QSXYD主要通过干扰生物膜形成基因,破坏细菌的生物膜,抑制MRSA的生长和繁殖。