一株沙门菌温和噬菌体PEA2-3生物学特性及基因组分析

泛耐药菌和多重耐药菌的检出率不断上升,噬菌体在防控治疗耐药菌的传播和感染上有良好的应用前景。本研究旨在利用耐药菌株分离出宽裂解谱温和噬菌体,丰富了沙门菌温和噬菌体库。利用丝裂霉素C诱导、分离纯化出1株温和性噬菌体,命名为 Salmonella virus PEA2-3,测定其部分生物学特性并进行生物信息学分析。透射电镜观察显示,噬菌体头部宽约为61 nm,尾长93 nm,属于有尾噬菌体目(Caudovirales)、罗斯蒙特病毒属( Rosemountvirus );最佳感染复数为0.01;一步生长曲线显示潜伏期为20 min,裂解期约为80 min;能够裂解不同来源的沙门菌(38/72)及大肠杆菌(23/52),是1株宽裂解谱的溶原性噬菌体,具有较好的应用价值。基因组测序结果显示,该噬菌体基因组全长52 770 bp,GC含量为45.99%,基因组共注释到73个CDS,8个CDS被赋予已知功能蛋白,不存在抗生素抗性基因或者毒力基因。噬菌体PEA2-3全基因组提交至NCBI的GenBank数据库,获得序列号为MW508890。结果显示,这是1株能同时裂解大肠杆菌与沙门菌的宽裂解谱高效价温和噬菌体,为防控和治疗耐药菌传播提供了良好的应用基础。

噬菌体仲裁通讯系统的研究进展

温和噬菌体在感染宿主期间可根据种群密度进入裂解或溶原周期。近年来,在针对枯草芽孢杆菌感染过程的SPbeta噬菌体中发现了一种决定裂解-溶原过程的通讯系统,该通讯系统被称为仲裁通讯系统。仲裁通讯系统由aimR、aimP、aimX 3个噬菌体基因组成,其中aimR编码的AimR蛋白是仲裁通讯系统的关键蛋白。仲裁肽运至细胞内与AimR蛋白结合,解除AimR蛋白对aimX基因的调控作用,使噬菌体进入溶原周期。对AimR蛋白的结构特征、肽作用机制等进行了综述,以期为这种通讯系统的深入研究以及利用枯草芽孢杆菌进行病害防治提供参考。

噬菌体可分为哪两类?

噬菌体可根据DNA进入寄主细胞的情况分为两类:一类是烈性噬菌体,即DNA进入细菌细胞后就进行复制与蛋白质合成,装配成许多子代噬菌体,使菌体裂解,释放大量子代噬菌体;另一类是温和性噬菌体,即侵染细菌细胞后并不立即进行复制,而将它的DNA插入寄主细胞的染色体中去,成为染色体的一部分,随着细菌的分裂,它也随着分裂。

耐高温α-淀粉酶在溶源性枯草杆菌表达系统中的高效表达

构建了高效表达耐高温α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌表达系统,并研究了该表达系统的主要特点.通过PCR扩增由地衣芽孢杆菌的基因组DNA分离高温淀粉酶基因后,将其克隆到质粒pSG703中.然后用pSG703质粒转化含温和性噬菌体φ105MU331的枯草芽孢杆菌,通过同源重组使高温淀粉酶基因插入到溶源性枯草芽孢杆菌的染色体上,并处于φ105MU331的强启动子下游.由于高温淀粉酶基因处于噬菌体的强启动子下游,在热诱导后可以实现高温淀粉酶的高效表达,诱导后8h内分泌到培养液中的高温淀粉酶活性可以达到9.58×103u/mL.本文构建的重组高温淀粉酶表达系统具有稳定、高效和杂蛋白分泌少的特点.

螺旋链霉菌一个菌株14^#的特性

用紫外光诱导螺旋链霉菌的溶源化菌株，得到一个不释放噬菌体的品系。这个品系。１４°对温和噬菌体Ｐ１１还有免疫性。瑟慎吸印－分子杂交的结果表明菌株１４°染色体ＤＮＡ和温和噬菌体Ｐ１１的ＤＮＡ有同源性。推测茵株１４°可能是一个缺陷溶源性菌株。

可控性自裂解乳球菌的构建

为阐明发酵乳杆菌温和噬菌体φPYB5编码的由穿孔素(Hyb5)和裂解素(Lyb5)组成的裂解盒在乳酸菌中的作用特征,将hyb5l-yb5基因克隆到E.coli/L.lactis穿梭质粒pSEC的nisin诱导型启动子下游,构建了重组质粒pSEC-hyb5l-yb5。将pSEC-hyb5l-yb5电转入Lactococcus lactisNZ9000,获得重组菌株NZphl。经nisin诱导表达后,Hyb5-Lyb5表现出高的裂解活性,使NZphl菌液的浊度(OD600)急剧下降,并释放出大量胞内蛋白,为利用自裂解菌株生产优质乳制品奠定了基础。

编委推荐

Nature|噬菌体衣壳蛋白直接激活细菌固有免疫细菌–噬菌体之间的军备竞赛在不断共进化中。与真核细胞固有免疫系统通过致病菌相关分子模式(pathogen-associated molecular patterns,PAMPs)感知致病菌的方式相似,许多细菌的固有免疫系统需要噬菌体特异性分子的激发,才能够对噬菌体感染作出应答。但细菌的哪种分子负责侦测噬菌体的何种激发分子尚不清楚。2022年11月16日,美国麻省理工学院、比利时布鲁塞尔自由大学(Universitélibre de Bruxelles,ULB)Abel Garcia-Pino以及瑞典隆德大学(Lund University)Vasili Hauryliuk等合作在Nature发表了题为“Direct activation of a bacterial innate immune system by a viral capsid protein”的研究论文,报道了来自沙门氏菌温和噬菌体SJ46,在多个大肠杆菌中也保守的融合毒素–抗毒素系统CapRelSJ46直接感知噬菌体中重要保守成分衣壳蛋白,保护大肠杆菌抗多种噬菌体感染的分子机制(doi:10.1038/s41586-022-05444-z)。

生物固氮

932727固氮 Bacillus azotofixans 菌株的细菌噬菌体 BA-4的初步鉴别[英]/Seldin,L.∥Microbios.-1992,71(288～280).-167～177[译自 DBA,1993,12(4),93-02237]为了从 B.azotofixans 中分离温和噬菌体,

噬菌体对细菌毒力影响的研究进展

噬菌体普遍存在于自然界中,在生态环境中发挥重要作用,通过多种方式影响细菌的进化。文章简述了温和噬菌体通过溶原性转换[包括活性溶原(Active lysogeny)]和转导的方式使细菌的毒力增强或减弱;裂解性噬菌体通过对宿主菌施加选择压力,允许毒力减弱的菌株繁殖,可能导致毒力降低,对于研究细菌毒力有一定的参考意义。

大肠杆菌噬菌体P88尾丝蛋白受体识别关键氨基酸位点的确定

温和噬菌体P88由溶原性大肠杆菌K88诱导得来,前期研究结果表明其尾丝蛋白的716-746位氨基酸为其受体识别的关键区域。本研究旨在确定该关键区域内的关键氨基酸位点。采用大肠杆菌无痕缺失的方法以溶源大肠杆菌K88的基因组为操作对象,将P88尾丝蛋白中的第716、719、721、722、725、730、734、736、744和746位的氨基酸分别定点突变为丙氨酸,丝裂霉素C诱导定点突变溶原菌K88,之后用P88的宿主菌DE048筛选和纯化定点突变噬菌体,并测定定点突变噬菌体宿主谱。在构建的10株大肠杆菌K88定点突变株中,有5株可以诱导出与亲本噬菌体P88具有相同宿主谱的噬菌体突变株,然而尾丝蛋白第719、721、730、734和736位氨基酸定点突变的K88突变株无法用DE048筛选出突变噬菌体粒子,因此推测噬菌体尾丝蛋白第719、721、730、734和736位氨基酸为其受体识别的关键氨基酸位点。本研究为温和噬菌体基因和宿主谱的改造提供了理论基础。

枯草桿菌Bacillus subtilis溶源菌株Bs47的分离及某些特性的观察

把保藏的144株枯草杆菌分成6个试验菌株组,用分羣混合双层法,从6个菌株组內分离到4株带噬菌体的菌株。选择其中一株,其所带的噬菌体对Ki-2菌株能转导的Bs47菌株,对其溶源性作了初步的观察。根据单菌落传代孢子加热以消除游离噬菌体后,仍继续释放噬菌体,以及Bs47菌株对其本身所释放的噬菌体表现免疫性等这些特点,从而确定Bs47是溶源性菌株。应用丝裂霉素c或紫外线进行产生噬菌体诱导试验,结果都有诱导效应。增加噬菌体产生量,前者达1,000倍,后者在10倍以上。

肠道微生态与胃肠道疾病关系的研究进展

人类胃肠道中寄居着庞大的细菌和非细菌性生物群,对人体胃肠道免疫和炎症反应以及其他疾病的发生起重要调节作用。因此,人类想要深入了解肠道微生物群落与我们的肠道健康和疾病的关系,只有积极探索微生物群的特点,针对性进行综合分析,了解它们的组成和生物学特性,才能为防治肠道微生物所致疾病提供重要依据。本文就肠道微生态与人类胃肠道疾病的关系进行系统总结。