ELISA15分钟温育法对乙型肝炎“两对半”检测的研究

采用含ＰＥＧ的稀释液稀释酶标记物，ＥＬＩＳＡ温育时间可缩短到３７℃１５分钟，检测二肝“两对半”其持异性达到１００％，ＨＢｓＡｇ最低检出量为ｌｎｇ／ｍｌ，抗－ＨＢｓ为２ｍＵ／ｍｌ，ＨＢｅＡｇ的３种参比血清（３７＃，４９＃，５６＃），抗ＨＢｅ的３种参比血清（５５＃，５７＃，６１＃），抗。ＨＢｃ的３种参比血情（２＃，３＃，４＃），部颁的最高稀释度均可测出，１５分钟法对乙肝标志物检出稀释度高于常规法，批内变异ＣＶ３．１４％～１４．４７％，批间变异ＣＶ５．６１％～９．０９％，冷（４℃），热（３７℃）气温操作结果与室温操作结果无显著性差异，稀释的酶标记物于４℃保存６个月仍保持活性。

两种3′,5′-环核苷酸磷酸二酯酶的制备及活性测定

3′,5′-环核苷酸磷酸二酯酶[EC.1.4.17](简称PDE),在生物体内有重要的生化功能.它可水解环核苷酸为5'-核苷酸,并与核苷酸环化酶共同维持细胞内环核苷酸水平.根据性质的不同PDE分为多种形式,但总的可分为两大类:依赖于Ca2+的PDE,可被钙调蛋白激活;不依赖于Ca2+的PDE,不被钙调蛋白激活.开展对环核苷酸、钙调蛋白及药物杀虫机理的研究都需要分离制备这两类不同形式的PDE.本实验以新鲜的猪心为材料制备分离出这两种PDE,并进行了活性分析.

酶联免疫反应加速仪在检测HBsAg中的应用

目的探讨酶联免疫反应加速仪在酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙型肝炎乙肝病毒表面抗原(HBsAg)中的应用。方法用酶联免疫反应加速仪和常规温育方法同步检测5个浓度的HBsAg定值血清,同时用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA,并对结果进行比较分析。结果5个浓度的HBsAg定值血清用两种方法检测的HBsAg吸光度值(OD值)比较,有显著性差异(P<0.05)。有4个浓度的HBsAg定值血清定性结果相一致,0.5 IU/ml的HBsAg定值血清用常规温育法检测结果为阴性,用酶联免疫反应加速仪检测结果为阳性,而0.5 IU/ml的HBsAg定值血清HBV-DNA的含量均大于1×103拷贝/ml。5个浓度的HBsAg定值血清,酶联免疫反应加速仪的OD值CV%分别为2.3、2.5、2.0、2.2、2.4,常规温育方法的OD值CV%分别为3.8、4.4、4.3、4.7、4.5。结论酶联免疫反应加速仪在确定最佳反应时间条件下,具有加速抗原抗体反应的作用,可以提高ELISA检测的灵敏度,利于临床判读"灰区"标本的结果,且重复性好,可替代常规温育方法,值得推广。

两种温育方法对ELISA检测抗-HCV结果的影响

两种温育方法对ＥＬＩＳＡ检测抗－ＨＣＶ结果的影响２５３０１５山东省德州市药品检验所张利李博李文笔者在用ＥＬＩＳＡ法检测大批量的献血者血浆的抗－ＨＣＶ时，发现在３７℃恒温水浴箱和３７℃恒温培养箱中分别检测同一份抗－ＨＣＶ阳性样品的结果存在较大差异，而临...

半自动血细胞分析用于解决冷凝集素导致血常规分析错误1例

在血液学实验室的工作中,血常规检测经常会遇到由于各种原因导致仪器堵孔、无法检测等情况,而由于冷凝集素导致的血常规检测异常的并不多见,我们也一直在寻找一种正确合理的消除冷凝集素的方法,笔者将工作中碰到的冷凝集素导致血常规分析错误以及对其消除方法一例,作以下介绍。

新型冠状病毒感染诱导冷凝集现象对血常规参数的影响

目的探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)感染导致冷凝集现象对血常规参数的影响,以及37℃温育30 min纠正后的效果,以提高血常规检测结果的准确性。方法收集天门市第一人民医院2022年12月26日~2023年1月17日SARS-CoV-2感染者血常规标本2875例为COVID-19组,同期SARS-CoV-2核酸阴性的流感患者50例为对照组;同时选取2022年8月~11月SARS-CoV-2核酸阴性的所有住院患者血常规标本28072例为非COVID-19组,COVID-19组患者又进一步分为冷凝集组(54例)和无冷凝集组(2821例),COVID-19组再分为轻型、中型、重型、危重型4组;根据MCHC结果将冷凝集组分为强冷凝集组(>380 g/L)(32例)和弱冷凝集组(≤380 g/L)(22例),采用37℃温育方法纠正处理冷凝集标本,对比纠正前后各型各组血常规各参数的变化。结果COVID-19组[1.88%(54/2875)]与非COVID-19组患者冷凝集率[0.071%(20/28072)]差异有统计学意义(χ^(2)=356.97、P<0.001),COVID-19组与非COVID-19组患者白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)、血细胞比容(HCT)和血小板(PLT)差异均无统计学意义(Z=-1.680、P=0.093,t=1.376、P=0.185,t=1.069、P=0.299,t=1.127、P=0.274,Z=-0.532、P=0.601);平均红细胞血红蛋白含量(MCH)、红细胞平均体积(MCV)和平均血红蛋白浓度MCV(MCHC)差异有统计学意义(t=-3.194、P=0.005,Z=-3.622、P<0.001,Z=-2.435、P=0.015);COVID-19组轻型、中型、重型和危重型患者冷凝集率分别为0.18%(4/2242)、3.96%(18/455)、17.88%(27/151)和18.52%(5/27),差异有统计学意义(Z=260.40、P<0.001),中型与轻型、重型与轻型、危重型与轻型以及重型与中型患者组间两两比较差异均有统计学意义(χ^(2)=97.97、18.87、20.66、93.85,P均<0.001);危重型与中型、重型与危重型患者差异均无统计学意义(χ^(2)=3.068、P=0.08,χ^(2)=1.06、P=0.937)。冷凝集组标本经37℃温育30 min均得以纠正,纠正前后WBC、RBC、HCT、MCV、MCH和MCHC差异均有统计学意义(Z=-4.953、t=10.137、t=8.614、t=-6.307、t=-4.918、Z=-6.334,P均<0.001);而PLT(Z=-1.317、P=0.188)和HGB(t=0.212、P=0.833)差异无统计学意义。强冷凝集组(MCHC>380 g/L)标本温育前后WBC和PLT差异亦有统计学意义(Z=-4.283、-3.489,P均<0.001),而弱冷凝集组标本温育前后PLT差异无统计学意义(Z=-1.923、P=0.054)。结论SARS-CoV-2感染者易出现冷凝集现象,且随着病情加重冷凝集增强,冷凝集除影响红细胞水平外,还可能会导致WBC和PLT检测结果偏低,故及时纠正冷凝集可提高COVID-19患者血常规检测结果的准确性。