温补肾阳药对丙基硫氧嘧啶引起肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响

目的:应用凝胶内差异显示电泳技术研究温补肾阳药对药物性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:正常大鼠、通过喂饲丙基硫氧嘧啶造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠的肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy2、Cy3、Cy5标记,等量混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder软件进行差异蛋白质组分析,筛选出16个差异蛋白质。经质谱测定及数据库比对,其中10个蛋白质得到鉴定。结果:肾阳虚时氨甲酰磷酸合成酶1、二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、泛醇-细胞色素C还原酶核心蛋白I、异戊酰辅酶A脱氢酶、热休克蛋白60、琥珀酰CoA合成酶、羟氨基辅酶A脱氢酶/酮脂酰辅酶乙酰辅酶A脱氢酶α亚基、鸟氨酸转氨甲酰酶、谷胱甘肽过氧化物酶表达量均增加,而鸟氨酸氨基转移酶表达量降低。应用温补肾阳药治疗后,上述蛋白质的表达量均有不同程度的纠正。结论:喂饲温补肾阳药的肾阳虚模型大鼠糖、脂类和蛋白质代谢均得以改善,可能与温补肾阳药维护线粒体膜稳定性有关。

温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响的研究

目的利用双向凝胶内差异显示电泳技术,分析温补肾阳药对激素依赖性肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组影响。方法正常大鼠、肾阳虚大鼠及温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质样品分别用荧光染料Cy2,Cy3,Cy5标记,经双向电泳后用不同波长光激发扫描后得到不同样品的蛋白质组图谱,经DeCyder软件分析,以肾阳虚动物与正常动物肝线粒体蛋白质相差1·2倍以上的蛋白作为差异蛋白,共获得16个差异蛋白质,经质谱测定和与蛋白质文库比对,其中11个蛋白质得到鉴定。结果肾阳虚动物由于肾上腺皮质功能受损,引起热休克蛋白60和70含量增加,可能起到调整处于应激状态的细胞存活、保护细胞免受损伤的作用;肾阳虚动物糖代谢和脂代谢功能降低,而蛋白质代谢和核酸代谢功能增强,表现为二氢硫辛酰胺脱氢酶和脂酰辅酶A脱氢酶活性降低,而肌氨酸脱氢酶、氨甲酰磷酸合成酶和亚硫酸氧化酶活性增加;肾阳虚动物由于三羧酸循环和脂肪酸β-氧化功能障碍,引起ATP合酶、醛脱氢酶和NADH脱氢酶活性代偿性增加,试图通过增加ATP的产量以缓解能量代谢的不足;但肾阳虚动物由于鸟氨酸氨基转移酶活性降低,导致储存能量的肌酸合成降低,使产生的ATP大部分通过热能形式消耗掉,从而导致肾阳虚的临床虚寒症状。应用温补肾阳药治疗后使热休克蛋白60更趋增加,可能加强对细胞的保护作用;温补肾阳药增加二氢硫辛酰胺脱氢酶的活性,可通过改善糖代谢和促进三羧酸循环功能使机体的能量代谢增强;温补肾阳药还可以通过增加ATP合酶和醛脱氢酶的含量,使ATP的产量增加,缓解能量代谢功能障碍。结论温补肾阳药可以通过调整线粒体内多种与能量代谢相关蛋白质表达而起到治疗肾阳虚的作用。

温补肾阳药对肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响

目的:应用凝胶内差异显示电泳技术和质谱技术研究温补肾阳药对肾上腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响。方法:通过切除两侧肾上腺造成肾阳虚模型大鼠和温补肾阳药治疗大鼠肝线粒体蛋白质经荧光染料Cy3、Cy5标记,与等量Cy2标记的内标混合后在同一胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。利用DeCyder软件进行差异蛋白质组分析,筛选出18个差异蛋白质进行质谱鉴定,其中15个蛋白质得到鉴定。结果:经温补肾阳药治疗后,肾阳虚动物氨甲酰磷酸合成酶、过氧化氢酶、二氢硫辛酸脱氢酶、热休克蛋白60、亚硫酸氧化酶、ATP合成酶、醛脱氢酶、丙酮酸脱氢酶、3-巯基丙酮酸转硫酶、腺苷酸激酶同工酶5、谷胱甘肽过氧化物酶表达均增高。结论:温补肾阳药可能通过加快糖、脂类、蛋白质和核酸分解代谢,加快ATP合成以及清除自由基和过氧化物,维持线粒体膜稳定性,从而起到治疗肾阳虚的作用。

温补肾阳药对大鼠LDH同工酶活性的影响

为了研究温补肾阳基本方中附子、肉桂、肉苁蓉及巴戟的作用及相互关系,我们选择了大鼠'肾阳虚模型'血清LDH同工酶活力作为观察指标,进行动物实验研究,报告于下。材料和方法一、药物:(1)醋酸氢化考的松注射液,南京第三制药厂出品,批号:871025。(2)温里药附子、肉桂与补阳药肉苁蓉、巴戟均由本院门诊部药房提供。将这些药物组成三组,即附桂组(A)、苁戟组(B)及附桂加苁戟组(C),药物各以1∶1的比例,按传统方法水煎浓缩至100%(100g生药/100ml),纱布过滤备用。二、动物:SD大鼠,雌性,体重170～220g。

温补肾阳药在更年期综合症中的应用体会

温补肾阳药在更年期综合症中的应用体会张治安王清黑龙江省海伦市乐业医院（１５２３５２）关键词温补肾阳药更年期综合症中医药疗法妇女更年期综合症是妇女更年期常见多发病，严重的影响妇女身心健康。笔者临床多年探讨用温补肾阳药治疗１００余例，其效果明显优于西药、...

温补肾阳药对甲状腺切除的肾阳虚大鼠肝线粒体蛋白质组的影响

目的:研究温补肾阳药对肾阳虚动物肝线粒体蛋白质组的影响。方法:12只SD大鼠,随机分为3组,每组4只。模型组和治疗组切除两侧甲状腺,正常组做相应的假手术,但不切除甲状腺。喂养7 d后模型组和治疗组大鼠出现拱背耸毛、大便稀溏等肾阳虚的症状。从第8天开始,治疗组每天喂饲温补肾阳药1次,给药剂量6.7 g.kg-1,其他2组喂饲等体积的生理盐水,连续6 d后,断头处死3组大鼠,分离提取其肝线粒体蛋白质,分别用荧光染料Cy3,Cy5标记,每个Cy3及Cy5标记的样品与等量Cy2标记的内标混合后在同一块凝胶中进行电泳分离,经不同光激发后扫描得到不同样品的蛋白质组图谱。经DeCyder 6.5软件进行差异蛋白质组分析,并对差异蛋白质进行质谱鉴定。结果:双向电泳后,平均每块胶检测到997个蛋白质点,其中所有图谱共有的点有687个,并从中筛选到22个差异蛋白,其中热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ,ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白和类钙离子激活中性蛋白酶12在肾阳虚状态下表达量均增加,而二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶、鸟氨酸转氨酶和GTP结合调节蛋白在肾阳虚状态下表达量均降低。经温补肾阳药治疗后,热休克蛋白60、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物、ATP合成酶、乳铁传递蛋白、ATP酶质子通道蛋白、电子传递黄素蛋白二氢硫辛酰胺支链酰基转移酶、脂酰辅酶A脱氢酶和GTP结合调节蛋白表达量均增加,而氨甲酰磷酸合成酶Ⅰ和类钙离子激活中性蛋白酶12表达量减少。结论:温补肾阳药可能通过调节物质代谢、保护线粒体膜稳定性和维护细胞内信号传导而起到治疗肾阳虚的作用。

A REVIEW ON TRADITIONAL CHINESE MEDICINE IN PREVENTION AND TREATMENT OF MULTIPLE SCLEROSIS

Multiple sclerosis(MS),a diseaseaffecting the central nervous system,ischaracterized by patches of demyelinationand sclerosis of gliosis desseminatedthroughout the white matter of brain andspinal cord.In 1968,Charcot firstdescribed its clinical and pathologicalcharacteristics.Its incidence is very high,especially in Europe and America.Thereis no epidemic data of this