温阳益气颗粒通过激活mTOR抑制OGD诱导的H9c2心肌细胞自噬

背景:温阳益气颗粒是一种包含四种中药成分的配方,在中国广泛用于治疗心力衰竭(heart failure,HF),其可调节细胞自噬,但作用机制尚不明确。方法:H9c2细胞经温阳益气颗粒处理24h后进行氧葡萄糖剥夺(oxygen-glucose deprivation,OGD)。通过qPCR分析评估自噬标记物Beclin-1 mRNA和LC3 mRNA表达水平。通过蛋白质免疫印迹分析测定Beclin-1、LC3、p62和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的蛋白表达水平。采用透射电子显微镜观察温阳益气颗粒对自噬体形成的影响。结果:温阳益气颗粒可显著抑制OGD诱导的心肌细胞自噬,其特征是抑制Beclin-1 mRNA的表达水平并增加LC3 mRNA的表达水平。此外,温阳益气颗粒可降低Beclin-1蛋白表达水平和LC3-II/LC3-I的比例,增加p62蛋白表达水平。温阳益气颗粒对LC3-II/LC3-I比值、p62蛋白表达水平及自噬体形成的影响与mTOR活性相关。结论:温阳益气颗粒通过抑制过度自噬在缺氧缺血性应激中发挥保护作用,该作用部分原因在于其对mTOR的影响。这些数据为温阳益气颗粒在心肌细胞自噬过程中的心肌保护作用提供了新的见解。