应用FITC系统建立非均衡竞争游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)化学发光法

目的制备抗人T3多克隆抗体,应用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanat,FITC)系统开发新型非均衡竞争技术,建立一种能广泛应用于临床检测游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)的方法。方法以T3-牛血清白蛋白(bovin serum albumin,BSA)为抗原免疫新西兰大白兔,制备抗人T3多克隆抗体,亲和层析法纯化并联接辣根过氧化物酶(horse radish peroxidase,HRP)。用FITC标记T3-类似物。采用抗FITC抗体包被发光板,FITC-T3类似物与抗FITC抗体结合形成固相抗原,通过非均衡竞争法原理,固相抗原与血清中FT3竞争结合抗T3抗体-HRP,通过标准曲线计算FT3浓度,建立方法学评价并与直接用T3-牛血清γ球蛋白(Bovine serum gamma globulin,BGG)包被(非FITC系统)的检测系统相比较。将本方法应用于临床120份血清标本的检测,定量结果与德国罗氏2010电化学发光全自动免疫分析系统(Elec-sys 2010)定量结果进行比较。结果抗体经酶联免疫吸附实验证明对T3、具有高度特异性。应用FITC系统建立的非均衡竞争化学发光免疫分析标准曲线的线性R>0.99,线性范围0.25～50 pg/ml,分析灵敏度为0.25 pg/ml,精密度测试批内、批间变异系数CV<5%,检测结果优于非FITC系统的检测。对于临床血清标本的检测,其定量结果与德国Elecsys2010定量试剂盒的定量结果具有很好的相关性,相关系数r=0.962 2,两者的测定值无显著性差异。结论制备的抗人T3多克隆抗体特异性强,以FITC系统为平台建立的非均衡竞争FT3检测化学发光法具有精密性好、灵敏度高、稳定性强,有良好的准确性,达到临床测定的需求,可代替进口化学发光产品用于临床样本的检测。

游离三碘甲腺原氨酸(FT3)生物素-亲合素酶联免疫分析

采用T3抗体包被酶标板微孔、生物素化T3和辣根过氧化物酶(HRP)标记链亲合素作为信号放大体系,一系列定量游离T3(FT3)为标准品,并以四甲基联苯胺-过氧化氢为显色底物,建立了FT3的生物素-亲合素(BA)酶联免疫分析(FT3-BA-EIA)法。其灵敏度为0.90pmol/L,标准曲线范围0.9～45.0pmol/L,批内变异系数3.1%～8.1%,批间变异系数4.9%～10.6%。测定了101例临床血样,其中正常人46例,实测范围2.5～11.1pmol/L,均值为5.1±2.0pmol/L;27例甲亢病人,实测范围9.7～37.3pmol/L,均值为20.5±7.1pmol/L;20例甲低病人,实测范围0.9～3.8pmol/L,均值为2.0±0.9pmol/L;8例孕妇,实测范围为3.4～8.5pmol/L,均值为6.0±2.5pmol/L。通过对临床血样的检测,本法与化学发光法(CIA)及放免法(RIA)的测定结果有良好的相关性。应用本法可有效地诊断甲状腺疾病,具有操作简便、灵敏、快速的特点,适于临床检测和科研应用。

游离三碘甲状腺原氨酸(FT_3)放射免疫分析的临床应用

血液循环中的三碘甲状腺原氨酸(T2)未与甲状腺素结合球蛋白(TBG)相结合者为游离三碘甲状腺原氨酸(Free Trnodothyronine，简移FT3)。FT3对于机体的物质代谢、生长发育、组织成熟同样具有广泛的主要的活性作用，直接测定FT3浓度，可真实地应映甲状腺功能状态，对临床具有重要意义。

化学发光酶免疫法测定游离三碘甲腺原氨酸

以辣根过氧化物酶为三碘甲腺原氨酸类似物的标记物，鲁米诺为化学发光反应底物，建立了一种高灵敏度化学发光免疫检测游离三碘甲腺原氨酸的方法。该法线性范围为0．90～80ng／L，批内变异小于12．1％，批间相对标准偏差均小于15％，其余各项指标均良好。利用本法对血清样品进行了测定，关于甲状腺机能亢进组病人的临床诊断符合率达到83．3％。与其它化学发光免疫分析方法比较所得相关系数为0．9005。在方法条件选择上，以尽可能保持游离激素和蛋白结合激素之间的平衡为原则，提高游离三碘甲腺原氨酸浓度测定的准确性。

急性心肌梗死患者的临床特点与低游离三碘甲腺原氨酸的相关性研究

目的探讨急性心肌梗死（acute myocardial infarction,AMI）患者的临床特点与低游离三碘甲腺原氨酸（freetriiodothyronine,FT3）的关系。方法选择2012年10月～2013年3月中日友好医院收治的AMI并行冠状动脉造影（coronary angiography,CAG）的患者共106例。收集研究对象的临床和CAG资料,对其进行回顾性研究。结果 106例患者中54例（50.9%）FT3减低,52例（49.1%）FT3正常。低FT3组和正常FT3组糖尿病的发生率分别为40.74%、19.23%（P=0.000）;左室射血分数分别为（50.00±11.90）%、（56.67±12.84）%（P=0.045）;血红蛋白分别为（129.27±19.31）、（139.64±17.99）g/L（P=0.041）;与正常FT3组比较,低FT3组心功能差,KillipⅠ级患者比例少,KillipⅣ级患者比例多,梗死相关动脉多为前降支（left anterior descending,LAD）,右冠状动脉病变少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 AMI患者发生低FT3比例高,低FT3组糖尿病发生率高、心功能差、血红蛋白低、冠脉LAD病变多。

血清3,5,3’-三碘甲腺原氨酸酶联免疫分析试剂盒的研制

以辣根过氧化物酶标记链亲合素（SA）,T3抗体包被微孔,T3生物素化,四甲基联苯胺（TMB）为底物,建立了3,5,3’-三碘甲腺原氨酸（T3）生物素-亲合素酶联免疫分析（T3-BA-EL1SA）方法。结果显示,本方法分析灵敏度为0.2μg/L,批内、批间变异系数分别为7.1%－8.3%和6.5%－10.5%,回收率为98.1%－107.2%;高浓度T3血清样品系列倍比稀释后,测定值与稀释度呈线性相关,相关系数为0.995 7。本试剂盒操作简便、快速,适用于临床检测和科研应用。

急性脑梗死患者胱抑素C、游离脂肪酸和游离三碘甲腺原氨酸的临床变化分析

目的:探讨急性脑梗死患者血清胱抑素cysC、游离脂肪酸FFA和游离三碘甲腺原氨酸FT3的变化。方法:采用全自动生化仪Aeroset和雅培发光仪ARCHITECT检测145例急性脑梗死患者血清胱抑素cysC、游离脂肪酸FFA、FT3和FT4,随机取健康体检者100例作为实验正常对照组。结果:急性脑梗死患者血清胱抑素cysC、游离脂肪酸FFA与对照组比较均存在差异有显著意义(P<0.05),且高于正常对照组。FT3与对照组比较存在差异有显著意义(P<0.05),且低于正常对照组,FT4与对照组比较差异无显著意义。结论:联合检测cysC、FFA和FT3对脑梗死的预防、治疗和预后提供一定的临床参考价值。

联合检测血清脑钠肽及游离三碘甲腺原氨酸对于慢性心力衰竭患者的预后评价

心力衰竭是任何心脏病的终末期改变，交感神经兴奋及多种内分泌功能异常参与且影响了心衰的进程。目前的研究表明血清喝水平的下降、BNP水平的增高均可作为慢性心力衰竭病人危重程度的独立预测因子。本文通过对慢性心力衰竭患者及健康对照组血清BNP及凡水平同时检测，同时对比左室射血分数（EF）及左室内径（LV），

抗三碘甲腺原氨酸(T_3)和甲状腺素(T_4),单克隆抗体(McAb)的研制及T_3、T_4放射免疫分析的研究

放射免疫分析(RIA)技术是具有高度灵敏和高度特异性的核医学体外检测技术。抗体的质量是建立RIA技术的关键之一。抗体的亲和力则直接影响方法的灵敏度。而抗血清(PcAb)的制备具有周期长。

新型游离三碘甲腺原氨酸人工抗原的合成与表征

利用快速、温和的"Click Chemistry(点击化学)"反应,在游离三碘甲腺原氨酸(FT3)的羧基上引入一个带有三唑环的羧基"间接臂",生成半抗原(FT3C)。再用N-羟基琥珀酰亚胺活性酯法,将半抗原(FT3C)分别与牛血清白蛋白(BSA)和钥孔戚血蓝素(KLH)偶联,合成了免疫抗原(FT3C-BSA)和包被抗原(FT3CKLH)。免疫抗原(FT3C-BSA)的紫外吸收光谱相对于FT3C和BSA有明显差异,表明成功实现了偶联,经计算得到偶联比为7∶1;用FT3C-BSA免疫Balb/c小鼠,获得高效价的抗FT3血清。采用间接ELISA法检测抗体的IC50值为0.37 mg/L,抗血清效价可达6.24×104,是制备FT3人工抗原的一种新方法。

三碘甲腺原氨酸(T3)采用放射免疫分析法测定过程中四种数学拟合曲线的比较

三碘甲腺原氨酸(T3)是由人体甲状腺分泌物之一,能够部分反应甲状腺的功能。测定其在血清中含量,对甲状腺功能检查有重要的意义。

鼠脑少突胶质细胞三碘甲腺原氨酸（T＿3）受体的─过性表达

本实验采用三碘甲腺原氨酸（Ｔ３）核受体单抗和半乳糖脑苷酯（ＧＣ）多抗的双抗体免疾细胞化学法，观察了体外次生培养的大鼠脑少突胶质细胞成熟过程中核Ｔ３受体的表达。结果发现核Ｔ３受体主要存在于未成熟的少突胶质细胞中（阳性率约８０％），而在成熟的少突胶质细胞中仅占４４％。这一现象可能是甲状腺激素在脑成熟过程中具有一段关键作用时期的分子机理之一。

游离三碘甲腺原氨酸与冠状动脉粥样硬化狭窄程度的关系

目的根据冠状动脉造影结果,讨论游离三碘甲腺原氨酸和冠状动脉粥样硬化狭窄程度之间的相关性。方法回顾性分析2016年4月13日至2019年3月31日于南京中医药大学第二附属医院(江苏省第二中医院)行冠状动脉造影检查患者的游离三碘甲腺原氨酸和冠状动脉各节段狭窄程度之间的关系。采用单因素分析比较组间基线资料差异,采用相关分析探讨游离三碘甲腺原氨酸和冠状动脉粥样硬化狭窄程度之间的相关性。采用Logistic回归分析探讨游离三碘甲腺原氨酸对冠状动脉粥样硬化狭窄程度的影响。结果共计纳入565例患者。行Mann-Whitney检验显示,有冠状动脉粥样硬化狭窄组和无冠状动脉粥样硬化狭窄组患者的游离三碘甲腺原氨酸浓度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。行Spearman相关分析显示,游离三碘甲腺原氨酸和冠状动脉某些节段粥样硬化狭窄程度(左前降支近端、中段、远端,左回旋支近端、中段,右冠状动脉近端、中段、远端,后降支)有相关性,且呈负相关(相关系数均小于1,P均<0.05)。行二元单因素Logistic回归分析显示,游离三碘甲腺原氨酸与冠状动脉某些节段粥样硬化狭窄(左前降支远端,左回旋支近端,右冠状动脉远端,后降支)存在相关性,且呈负相关(OR均<1,P均<0.05)。结论游离三碘甲腺原氨酸与冠状动脉某些节段粥样硬化狭窄(左前降支远端,左回旋支近端,右冠状动脉远端,后降支)存在相关性。

中重度颅脑损伤后血清三碘甲腺原氨酸水平变化与预后的关系

目的研究中重度颅脑损伤后血清三碘甲腺原氨酸水平变化与预后的关系。方法应用酶联免疫定量分析法多次检测164例中重度颅脑损伤患者游离三碘甲腺原氨酸(FT_3)、三碘甲腺原氨酸(T_3)水平的动态变化,同时记录GCS评分,观察分析血清FT_3及T_3水平变化与GCS变化的关系。结果不同程度的中重度颅脑损伤患者,其中恢复较好的患者在第7天和第14天检测的血清T_3和FT_3水平显著高于恢复较差的患者血清T_3和FT_3水平。结论中重度颅脑损伤T_3和FT_3的变化与预后密切相关,提高T_3和FT_3水平有望成为治疗中重度颅脑损伤的重要切入点。

入院游离三碘甲腺原氨酸水平与心力衰竭急救患者临床结局的关系

目的探索入院游离三碘甲腺原氨酸水平与心力衰竭急救患者临床结局的关系。方法选取184例心力衰竭急救患者,检测患者入院第1和7天的三碘甲腺原氨酸水平,将88例三碘甲腺原氨酸<3.1pmol/L为观察组,96例3.1~6.8pmol/L为对照组。比较两组临床结局,并分析心力衰竭患者住院时间的影响因素。结果两组服用升压药率、再入院率及病死率差异均无统计学意义(均P>0.05),观察组住院时间、有创机械通气率均高于对照组(均P<0.05),年龄、脑钠肽水平均高于对照组(均P<0.05),血清白蛋白、游离三碘甲腺原氨酸及游离甲状腺素均低于对照组(均P<0.05)。多因素分析显示,低水平游离三碘甲腺原氨酸是影响心力衰竭患者住院时间的独立危险因素(P<0.05)。结论低水平游离三碘甲腺原氨酸是影响心力衰竭患者住院时间的独立危险因素。

血清FT_(3)、FT_(4)、TSH单项及联合检测对临床诊断甲状腺功能的效能

目的探讨血清游离三碘甲腺原氨酸(FT_(3))、游离四碘甲状腺素(FT_(4))、促甲状腺激素(TSH)单项指标及三项联合检测对临床诊断甲状腺功能的效能。方法选取2019年3月至2021年3月在本院就医并确诊为甲状腺功能障碍的患者共80例,根据患者甲状腺功能障碍程度分为亚甲减组(n=42)及甲减组(n=38);另选取同期在本院接受体检的健康受试者30例纳入正常对照组。纳入本研究的所有对象均取其清晨空腹静脉血,离心结束后将获得的各上清样本置于Cobas e411全自动电化学发光免疫分析仪对血清中FT_(3)、FT_(4)、TSH水平进行检测。对比各组血清FT_(3)、FT_(4)、TSH指标水平;采用Spearman相关系数分析上述三项指标与甲状腺功能障碍程度的相关性;采用ROC分析上述三项指标与甲状腺功能障碍的相关性。结果各组血清FT_(3)、FT_(4)、TSH水平对比均具有统计学差异(P<0.05),随着甲状腺功能障碍的加剧,患者血清FT_(3)、FT_(4)水平呈低表达趋势发展,患者血清TSH水平呈高表达趋势发展(均P<0.05);采用Spearman相关系数分析显示血清FT_(3)、FT_(4)与甲状腺功能减退呈负相关(均P<0.05),血清TSH与甲状腺功能减退呈正相关(P<0.05);采用ROC对血清FT_(3)、FT_(4)、TSH进行分析,结果显示3项指标单项诊断效能对比TSH的AUC值更高,但3项指标联合检测的AUC值最高(均P<0.05)。结论血清FT_(3)、FT_(4)、TSH联合检测对评估和诊断甲状腺功能障碍等具有重要意义,对临床准确评估病情并制订相应的诊疗方案提供有效依据。

游离三碘甲腺原氨酸/游离甲状腺素比值对住院心力衰竭患者预后的影响

目的探讨游离三碘甲腺原氨酸(FT3)/游离甲状腺素(FT4)比值对心力衰竭(心衰)患者预后的影响。方法回顾性分析2009年3月至2018年6月在中国医学科学院阜外医院心衰中心住院的3527例心衰患者的临床资料。根据FT3/FT4比值的中位数分为低FT3/FT4比值组(1764例,FT3/FT4<2.15)和高FT3/FT4比值组(1763例,FT3/FT4≥2.15)。收集患者临床资料,患者出院后进行系统的门诊复查或电话随访,研究主要终点定义为全因死亡或心脏移植或植入左心室辅助装置的复合终点。比较基线时不同FT3/FT4比值组患者临床资料差异,采用多因素Cox比例风险回归模型分析FT3/FT4比值与住院心衰患者预后的相关性。结果3527例患者的年龄为(56.8±16.0)岁,男性为2544例(72.1%);随访时间[M(Q 1,Q 3)]为2.79(1.00,5.03)年,最终随访时共记录了1542例患者的终点事件。低FT3/FT4比值组和高FT3/FT4比值组患者的年龄分别为(58.8±16.5)和(54.8±15.2)岁(P<0.001),随访期间累积生存率分别为38.4%、61.9%(P<0.001)。FT3(HR=0.72,95%CI:0.63~0.84,P<0.001)、FT3/FT4比值(HR=0.76,95%CI:0.65~0.87,P<0.001)是心衰患者全因死亡、心脏移植或植入左心室辅助装置复合终点的相关因素;FT3/FT4比值预测左心室射血分数(LVEF)为<40%、40%~49%、≥50%患者复合终点风险的HR值(95%CI)分别为0.91(0.77~1.08),0.83(0.50~1.39),0.65(0.50~0.85)(P交互=0.045)。结论低FT3和低FT3/FT4比值是住院心衰患者不良预后的相关因素;在LVEF≥50%患者中FT3/FT4比值具有更显著的预测作用。

高敏甲状腺功能试验—FT_3、FT_4、HS-TSH联合检测在肝癌患者中的应用

高敏促甲状腺激素（HS-TSH）、游离甲状腺素（FT4）、游离3,5,3’—三碘甲腺原氨酸（FT3）检测是继总T4总T3甲状腺功能检测之后,又一次甲状腺功能检测的重大技术进步。1989年秋,我们在临床上开始试用,并进行了一系列的临床观察研究,曾观察了一组原发性肝癌患者血HS-TSH、FT4、FT3结果,现分析报道如下。材料和方法本组肝癌患者36例系我院门诊或病房经临床和实验室检查而确诊的患者,男30例,女6例,年龄中值为54.52岁,范围10个月～76岁。164例正常对照组来自我院健康职工和助血员,男68名,女96名,年龄中值为41.14岁,范围为17～76岁。所有观察者均隔夜空腹、清晨采取静脉血,及时分离血清,贮低温冰箱,由专人进行HS-TSH、FT4、FT3检测。 HS-TSH试剂盒由中美合资天津德普（DPC）公司提供,系TSH免疫放射法（IRMA）分析试剂。 FT3、FT3试剂盒由上海核技术开发公司提供,系T4（T3）-X衍生物一步法（oneStep法）试剂。操作按放免分析室工作常规和试剂盒要求进行。γ-放射免疫测量仪为西安核仪器厂FJ—2008型系列。测得数据均经加样对数转换后统计分析和显著性测验。

血清FT3、FT4水平对甲减患者左旋甲状腺素治疗预后的影响

目的观察血清游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)在甲状腺功能减退(简称甲减)患者中的表达,并分析二者对患者左旋甲状腺素治疗预后的影响。方法选择2019年1月-2020年12月南阳市中心医院收治的62例甲减患者,均接受左旋甲状腺素治疗,观察并记录患者治疗3个月后的临床疗效作为短期预后观察指标,分为预后不良与预后良好组,调查并比较患者基线资料及入院时血清FT3、FT4水平,分析血清FT3、FT4水平对甲减患者左旋甲状腺素治疗预后的影响。结果预后不良组入院时血清FT3、FT4水平低于预后良好组,入院时血清促甲状腺激素(TSH)水平高于预后良好组(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,入院时血清FT3、FT4低表达、入院时血清TSH高表达是甲减患者左旋甲状腺素治疗预后不良的影响因子(OR>1,P<0.05)。结论血清FT3、FT4低表达提示甲减患者左旋甲状腺素治疗预后不良风险较大。