反相聚合柱分离测定人血清结合型游离型胆汁酸

采用国外新向世的反相聚合柱分离测定了人血清结合型和游离型胆汁酸。研究了胆汁酸在PRP-1柱的保留特性;使用pH10。0的磷酸缓冲液、乙腈,甲醇组成的三元淋洗剂,确保15种胆汁酸的分离。还进行了方法回收率、重复性、最低检知量、线性范围试验,方法可靠、精确。分析了60例血清胆汁酸,获得各种肝胆疾病患者血清胆汁酸特征图谱。

发酵对胆南星中胆汁酸类成分的影响及胆南星中3种游离胆汁酸含量测定研究

考察以猪胆汁为原料的胆南星发酵炮制品及混合蒸制炮制品中主要胆汁酸类成分的组成,建立发酵制胆南星中胆汁酸类成分的含量测定方法。以猪胆汁及天南星、制天南星为原料分别制备发酵法胆南星及混合蒸制法胆南星,采用HPLC-ELSD检测比较2种胆南星中胆汁酸类成分的差异;以3种游离胆汁酸类成分为指标,采用HPLC-ELSD检测发酵制胆南星炮制品中的胆汁酸类成分的含量。采用Agilent Eclipse XDB C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.1%冰醋酸水(55∶45)为流动相,流速为1 mL·min^-1,柱温为30℃,ELSD:漂移管温度为90℃,氮气流量为2.2 mL·min^-1。结果显示混合蒸制法胆南星中主要含有结合型胆汁酸类成分,发酵制胆南星中未见有结合型胆汁酸类成分,主要含游离型胆汁酸类成分。发酵制品中的3种游离型胆汁酸类成分猪胆酸(HCA)、猪去氧胆酸(HDCA)和鹅去氧胆酸(CDCA)均在定量范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率在95.99%104.3%,加样回收符合要求。研究结果表明,胆南星发酵过程可使得胆汁中的结合型胆汁酸类成分转化为游离型胆汁酸。所建方法可以有效控制发酵制胆南星中胆汁酸类成分的含量。