鼻咽癌患者血浆游离爱泼斯坦-巴尔病毒DNA定量测定的临床应用价值

目的 分析血浆游离爱泼斯坦 巴尔病毒 (Epstein Barrvirus,EBV)DNA定量测定在鼻咽癌诊治中的临床应用价值。方法 采用荧光定量聚合酶链反应 (fluorescencequantitativepolymerasechainreaction ,FQ PCR)技术 ,测定 6 6份治疗前或治疗后的鼻咽癌患者血浆EBV DNA含量 ,并与 30例健康对照者相比较。分析该含量与鼻咽癌分期、淋巴结转移灶负荷以及治疗后短期疗效之间的相关性。结果 鼻咽癌患者血浆EBV DNA阳性率 (6 6 7% ,2 8/ 4 2例 )和复制 (中位数 5 2 2 0拷贝 /ml)均明显高于健康对照者 (阳性率 10 % ,3/ 30例 ;复制中位数 0 ) ;治疗前组中 ,Ⅲ～Ⅳ期患者复制量 (中位数3130 0拷贝 /ml)高于Ⅰ～Ⅱ期 (中位数 4 0 0 0拷贝 /ml) ,N2 3患者 (中位数 32 5 0 0拷贝 /ml)高于N0 1(中位数 4 0 0 0拷贝 /ml)。而且 ,治疗后患者 (中位数 0 )低于治疗前 (中位数 5 2 2 0拷贝 /ml)。治疗后短期疗效评估发现 ,病灶有残留者DNA含量 (中位数 2 0 83 0拷贝 /ml)高于病灶消退良好者 (中位数0 )。结论 血浆游离EBV

爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏期膜蛋白2AcDNA的克隆及序列分析

目的 :克隆爱泼斯坦 巴尔病毒 (EBV)潜伏期膜蛋白 2A(LMP2A)基因 ,进一步研究其基因工程疫苗。方法 :用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)扩增出EBVB95 8株LMP2A全部编码蛋白的基因 ,并克隆至载体pGEM T中 ,通过α 插入失活、PCR及EcoRⅠ、SmaⅠ限制性内切酶双酶切等鉴定重组质粒 ;采用Sanger双脱氧终止法测定cDNA片段的核苷酸序列。结果 :克隆出LMP2A第 1个外显子到第 8个外显子的全部编码蛋白的cDNA ,测序结果与EB病毒B95 8原型株LMP2AcDNA作同源比较 ,完全一致。结论 :本实验克隆了LMP2A基因的全部编码蛋白的cDNA全长片段。

爱泼斯坦-巴尔病毒潜伏膜蛋白1的结构和信号转导

爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)是具有致瘤潜能的疱疹病毒,与多种恶性肿瘤的发生相关。近年来,对EBV潜伏感染膜蛋白1(LMP1)的结构、功能及其介导的信号转导通路的研究取得了显著进展。作者就LMP1通过核因子-κB(NF-κB)、活化蛋白1(AP-1)、双面联胎激酶(JAK)/信号转导和转录激活子(STAT)、Ets1、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)/激活转录因子2(ATF2)途径和细胞周期依赖性激酶(Cdk)途径等,对细胞的生长、增殖、转化、分化、运动和凋亡的调控作一综述。

慢性牙周炎与爱泼斯坦-巴尔病毒和人疱疹病毒6型的相关性

慢性牙周炎是一种最常见的多因素、炎症性和破坏性疾病,其发病与微生物、宿主和环境等多种因素有关,但其发病机制至今不明。研究显示,疱疹病毒与慢性牙周炎的发生发展有一定的相关性。爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)、人疱疹病毒(HHV)-6型均属疱疹病毒,本文就EBV、HHV-6以及二者间的关系,EBV和HHV-6引发慢性牙周炎的相关机制,EBV与慢性牙周炎,HHV-6与慢性牙周炎等研究进展作一综述。

从阴阳理论初探中医治疗爱泼斯坦-巴尔病毒相关疾病的思路

从阴阳理论出发简要分析爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)相关疾病的中医辨证思路。基于阴阳理论中“交”与“变”的特性分析认为,EBV本身就是阴阳之交的结合体,而EBV相关疾病如传染性单核细胞增多症、鼻咽癌、恶性淋巴瘤,除具有各自的特性外,还表现出EBV所共有的阴伏阳动的共性,宜根据阴阳盛衰及阴伏阳动之势而定治法。

EB病毒IgM、IgG及DNA检测在儿童呼吸道感染性疾病中的诊断研究

目的探析爱泼斯坦-巴尔病毒(EB病毒,EBV)免疫球蛋白(Ig)M、IgG及脱氧核糖核酸(DNA)检测在儿童呼吸道感染性疾病中的诊断价值。方法选取400例呼吸道感染性疾病患儿作为观察组,同时选取100例无呼吸道感染患儿作为对照组。对两组患儿EBV-IgM、EBV-IgG及EBV-DNA进行检测。比较观察组不同年龄段患儿EBV-IgM、EBV-IgG及EBV-DNA阳性率,两组EBV-IgM、EBV-IgG及EBV-DNA检测结果;分析各项指标的诊断价值。结果观察组不同年龄段患儿EBV-IgM、EBV-IgG阳性率比较,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组不同年龄段患儿EBV-DNA阳性率比较无明显差异(P>0.05)。EBV-IgM检测中,观察组化学发光值(11.39±2.12)高于对照组的(9.54±1.35),阳性率50.50%(202/400)高于对照组的5.00%(5/100),差异有统计学意义(P<0.05);EBV-IgG检测中,观察组吸光度值(11.33±2.15)高于对照组的(9.03±1.06),阳性率58.00%(232/400)高于对照组的12.00%(12/100),差异有统计学意义(P<0.05);EBV-DNA检测中,观察组循环数Ct值(34.13±4.88)低于对照组的(43.75±11.62),阳性率57.00%(228/400)高于对照组的6.00%(6/100),差异均具有统计学意义(P<0.05)。EBV-DNA对呼吸道感染性疾病患儿的诊断价值最高[曲线下面积(AUC)=0.644],其次依次是EBV-IgM(AUC=0.618)、EBV-IgG(AUC=0.584),EBV-IgM对呼吸道感染性疾病患儿的诊断特异度最高,为96.12%。结论EBV-IgM、EBV-IgG、EBV-DNA检测在儿童呼吸道感染性疾病的诊断中具有重要的指导意义。

广州地区鼻咽癌筛查人群EB病毒感染状况与影响因素研究

目的研究广州地区鼻咽癌筛查人群中爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)的感染状况,并对EBV感染的影响因素进行分析。方法收集2021年1~12月在广州市干部和人才健康管理中心进行EBV抗体VCA-IgA和NA1-IgA检测的鼻咽癌筛查人群的资料,年龄20岁以上,了解EBV感染状况,并通过logistic回归分析其感染情况及影响因素。结果共收集研究对象55311例,其中男35429例(64.05%),女19882例(35.95%),总体EBV感染率为8.0%,不同性别的差异无统计学意义(P>0.05);随着年龄增加,EBV感染率增高,20~39岁感染率7.07%,40~59岁感染率7.86%,60~79岁感染率10.11%,≥80岁感染率10.99%(χ^(2)=85.487,P<0.01),logistic回归分析结果表明:随着年龄的增长,感染EBV的风险显著增加,40~59岁人群感染EBV的风险较20~39岁人群高10.6%(OR=1.106,95%CI:1.028~1.190);60~79岁人群感染EBV的风险较20~39岁人群高42.2%(OR=1.422,95%CI:1.288~1.569);80岁以上人群感染EBV的风险较20~39岁人群高53.1%(OR=1.531,95%CI:1.230~1.906),有高血压病史的感染风险较无高血压者高10.5%(OR=1.105,95%CI:1.003~1.218);是否有糖尿病史不会显著影响EBV感染结果(P>0.05)。结论广州地区EBV总体感染率为8.00%,年龄增加和高血压病史是EBV感染的危险因素,相关部门需要进一步加强EBV易感人群的筛查与防控。

EBV下调miR-34c促进鼻咽癌细胞增殖、迁移的作用及机制研究

目的:探究爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)下调miR-34c促进鼻咽癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及机制。方法:采用qPCR检测EBV阴性鼻咽癌SUNE1、CNE2、HK1细胞和EBV阳性C666-1细胞中miR-34c表达水平。构建miR-34c模拟物以分析miR-34c对鼻咽癌细胞生物学功能的影响。使用CCK-8、划痕愈合试验以及Transwell细胞侵袭试验检测鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。Western blotting测定细胞中迁移、侵袭相关蛋白以及Erk1/2信号通路蛋白的表达水平。结果:miR-34c在EBV阳性C666-1细胞表达下调(P<0.05)。CCK-8结果显示,miR-34c组C666-1细胞在16、24、48 h的活力明显低于EBV组(P<0.01)。划痕试验和Transwell试验结果显示,与miR-34c组比较,EBV组C666-1细胞迁移和侵袭能力均明显增强(P<0.01)。Western blotting结果显示,与miR-34c组比较,EBV组C666-1细胞迁移和侵袭相关蛋白Vimentin、Snail、MMP-2、MMP-3及Erk1、Erk2蛋白表达均明显升高(P<0.01)。结论:miR-34c在EBV阳性鼻咽癌细中表达下调,EBV下调miR-34c可增强鼻咽癌细胞增殖、侵袭和迁移能力及激活Erk1/2信号通路。

鼻咽癌患者血浆Epstein-Barr病毒DNA定量分析

目的 探讨鼻咽癌患者血浆游离 EBV - DNA水平测定的临床应用价值。方法 采用荧光定量 PCR技术测定鼻咽癌患者治疗前 2 3例、治疗后 2 3例以及正常对照者 30例血浆 EBV- DNA水平 ,并用免疫酶法检测血清VCA - Ig A水平。结果 鼻咽癌患者血浆游离 EBV- DNA水平高于正常对照者 ,治疗后低于治疗前。结论 (1)血浆EBV- DNA的实时定量 PCR分析对鼻咽癌的筛选检查有实用价值 ;(2 )血浆 EBV- DNA水平可能是当前反映鼻咽癌局部肿瘤负荷和治疗效果的较理想指标。

整合在鼻咽癌细胞株SUNE-1中的EB病毒LMP-1基因的缺失性改变

目的 :研究EBVLMP - 1基因在SUNE - 1细胞染色体上的整合情况。方法 :采用PCR方法检测整合于SUNE - 1染色体的LMP - 1基因 ;限制性内切酶酶切和PCR方法初步验证部分LMP - 1基因发生缺失 ;DNA测序进一步确定LMP - 1基因的缺失情况。结果 :LMP - 1基因在SUNE - 1细胞染色体上的整合有完整与缺失两种情况 ;其缺失发生于其两个内含子部分。结论 :整合于SUNE - 1染色体DNA上的EBVLMP - 1,有部分发生了内含子 1与

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂在器官移植受者病毒感染中的作用

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)抑制剂是目前器官移植受者术后常用的免疫抑制药,主要包括西罗莫司(雷帕霉素)和依维莫司。mTOR抑制剂除通过抑制T细胞增殖达到免疫抑制作用外,还具有抗衰老、抗肿瘤、抗病毒感染等多种潜在作用。病毒感染是器官移植术后最常见并发症之一,目前抗病毒治疗的方法较为有限且疗效欠佳。本文对mTOR通路在病毒感染中的作用、常见mTOR抑制剂的作用机制及mTOR抑制剂在不同病毒感染中的作用进行综述,旨为mTOR抑制剂在器官移植受者的临床应用及后续研究提供参考。

应用流式-荧光原位杂交协助鉴别诊断EB病毒感染的淋巴细胞亚群

目的:建立流式细胞术-荧光原位杂交联用技术(Flow-FISH),探讨Flow-FISH技术在临床EB病毒(Epstein-Barr virus)感染性疾病中感染细胞亚型鉴定的临床前诊断价值。方法:通过Ficoll-paque离心分离法收集重庆医科大学附属儿童医院招募的9例EBV感染患者的外周血标本中单个核细胞;通过qRT-PCR检测细胞EBER1及EBER2表达;通过荧光标记抗体对细胞表面标志物进行检测,经固定破膜剂对标记后细胞进行固定及破膜处理后与FISH探针37℃条件下过夜杂交,通过流式细胞仪、荧光显微镜检测细胞状态、表面抗原染色以及FISH探针与靶mRNA的结合。结果:优化固定破膜剂配方,建立0.2%Tween-20 4℃破膜15 min为破膜条件,此条件对细胞状态及表面抗原影响小,不干扰流式细胞术对细胞亚群判定。优化杂交液配方,探明20%甲酰胺和7%硫酸葡聚糖在37℃过夜条件下杂交为最优杂交条件,此条件下细胞形态及流式分群好,探针杂交效果佳。通过使用Flow-FISH技术能特异性区分各EBV;以及EBV;淋巴细胞系。通过Flow-FISH技术,成功鉴定临床外周血标本中的EBV;淋巴细胞亚群。结论:初步建立流式细胞术-荧光原位杂交联用检测EBV感染细胞亚群技术,为其进一步的临床前实验奠定基础。

T细胞淋巴瘤中爱泼斯坦-巴尔病毒感染情况的研究

目的 通过检测不同类型T细胞淋巴瘤中爱泼斯坦 巴尔病毒 (EBV)基因编码产物EBERs的表达 ,探讨EBV与T细胞淋巴瘤的关系。方法 应用原位杂交的方法 ,对 6 0例经组织学和免疫组织化学确定的T细胞淋巴瘤中EBV编码的小RNAEBERs进行检测 ,并采用 1994年淋巴瘤REAL分类方案对 6 0例T细胞淋巴瘤进行分类 ,以进一步分析与EBV相关的T细胞淋巴瘤的临床病理特征。结果 发现 6 0例T细胞淋巴瘤中EBERs的检出率为 6 1.7% ,外周T细胞淋巴瘤的检出率为6 9 8%。结外淋巴瘤的检出率高于结内淋巴瘤 (P <0 .0 1)。EBERs在T细胞淋巴瘤中的血管中心性T细胞淋巴瘤、血管免疫母T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤中的检出率分别为 17 18,2 2和 4 6 ,与外周T细胞淋巴瘤非特异型 (5 1.9% ,14 2 7)相比 ,差异有非常显著意义 (P <0 .0 1)。EBERs与T细胞淋巴瘤患者的性别、年龄和临床分期无关 (P <0 .0 5 )。结论 外周T细胞淋巴瘤与EBV感染有关 ,尤其是外周T细胞淋巴瘤中的血管中心性T细胞淋巴瘤、血管免疫母T细胞淋巴瘤和间变性大细胞淋巴瘤。

EBV通过抑制IFN-α蛋白表达逃逸免疫应答促进免疫性血小板减少症发生的机制

目的 研究爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)逃逸免疫应答促进免疫性血小板减少症(ITP)发生的机制。方法 从ITP患儿和健康儿童外周血中提取并培养单核细胞,并用EBV对外周血单核细胞进行感染,然后用酶联免疫吸附试验和Western blot检测干扰素-α(IFN-α)蛋白的表达情况。结果 与对照组比较,EBV感染后可抑制人外周血单核细胞分泌IFN-α(P<0.01)。与健康儿童比较,EBV刺激人外周血单核细胞后,IFN-α蛋白表达量显著降低,且ITP患儿外周血单核细胞IFN-α蛋白表达量也明显降低,SOCS3蛋白表达量显著增高(P<0.01)。siRNA靶向SOCS3转染实验结果中,与健康儿童比较,siSOCS3的敲除率高于70%,且敲除SOCS3后再用EBV感染,EBV抑制IFN-α蛋白分泌的作用显著减弱(P<0.01)。转染ZTA质粒后,ZTA蛋白及SOCS3蛋白表达均显著增高。结论 EBV能够通过调控ZTA蛋白表达,从而抑制IFN-α的表达,逃逸免疫应答促进ITP的发生。

呼吸道感染患儿病毒载量表达及其与脏器功能损伤的关系探讨

观察小儿呼吸道感染爱泼斯坦-巴尔病毒(EBV)- DNA (DNA)在小儿呼吸道感染中的表达,并探讨其与肝、肾脏损害之间的相关性。方法 采用EBV-DNA载量测定法,对不同性别、年龄的婴幼儿EBV-DNA载量进行比较,并按EBV-DNA载量的大小,将其分为EBV-DNA载量组(21)、中载量组(n=61),比较不同EBV-DNA载量(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、胱抑素 C (CysC)、β2- MG (β2- MG)的含量,并与EBV-DNA载量的相关性进行比较。结果 EBV– DNA在1-3、3-6岁组中的表达率在性别上没有显著性差异(P<0.05),且EBV-DNA在各年龄组之间的表达率均有显著性(P<0.05);EBV- DNA载量组、中载量组和高载量组分别为19.67%、48.57%、66.67%、13.11%、42.86%、52.38%;随着 EBV- DNA载量的增加,血清 ALT、 AST、 CysC、β2- MG含量增加(P<0.05),EBV-DNA的含量与 ALT、 AST、 CysC、β2- MG的含量均有显著的相关性(P<0.05)。结论小儿呼吸道感染EBV-DNA载量增高,易导致肝、肾损害,1~6岁小儿 EBV– DNA的阳性率明显高于1~6岁,EBV-DNA的含量可作为评价呼吸道感染患儿肝、肾功能损害的重要依据。

爱泼斯坦-巴尔病毒操控鼻咽癌细胞HONE-1的miR-590-5p逃避免疫的机制研究

目的探讨爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV)操控鼻咽癌细胞HONE-1的miR-590-5p以实现逃避免疫的机制研究.方法通过miRDB在线分析miR-590-5p与泛素E3连接酶(itchy E3 ubiq-uitin protein ligase,ITCH)的匹配情况,然后通过荧光素酶报告系统检测miR-590-5p是否靶向ITCH;使用miR-590-5p mimics过表达或者miR-590-5p inhibitor敲低miR-590-5p的情况下,通过免疫印迹检测ITCH与其底物MAVS的表达量,通过酶联免疫吸附试验检测鼻咽癌细胞HONE-1上清液中干扰素γ(interferon-γ,IFNγ)的表达量,同时检测EBV的复制情况.结果EBV感染鼻咽癌细胞HONE-1后miR-590-5p的表达量显著下降(P<0.05),并且miR-590-5p靶向ITCH的3′UTR.过表达miR-590-5p后,发现鼻咽癌细胞HONE-1的ITCH表达量降低,线粒体抗病毒信号蛋白(mitochondrial antiviral signaling protein,MAVS)泛素化水平下降,MAVS的表达量升高,IFNγ表达升高(P<0.05),EBV复制水平下降(P<0.05).敲低miR-590-5p后,发现鼻咽癌细胞HONE-1的ITCH表达量上升,MAVS泛素化水平上升,MAVS的表达量下降,IFNγ表达下降(P<0.05),EBV复制水平上升(P<0.05).过表达miR-590-5p的同时敲低MAVS或敲低miR-590-5p的同时过表达MAVS后,EBV病毒的复制没有明显差异(P>0.05).结论EBV通过抑制miR-590-5p的表达量以提高MAVS的泛素E3连接酶ITCH的表达量,降低鼻咽癌细胞HONE-1的IFNγ表达量,最终实现自身复制的增强.

EB病毒感染所致肺部感染患者的胸部高分辨CT特征分析

目的总结爱泼斯坦-巴尔病毒(Epstein-Barr virus,EBV)感染所致肺部感染的胸部高分辨CT(high resolution CT,HRCT)特征,并探讨其临床诊断价值。方法回顾性分析2017年11月至2020年2月首都医科大学附属北京友谊医院收治的16例EBV感染所致肺部感染患者的临床资料,包括性别、年龄、临床诊断、症状、体征、实验室检查、EBV-DNA拷贝数、EBV抗体及胸部HRCT表现等。结果16例患者中男10例,女6例,年龄11~62岁;临床诊断包括嗜血细胞综合征12例(75.0%)、慢性活动性EBV感染1例(6.2%),EBV感染2例(12.5%)及乳腺癌术后维持化疗1例(6.2%)。患者外周血EBV-DNA均阳性,拷贝数>5.0×10;拷贝/ml,7例EBV相关抗体阳性,提示EBV急性感染或机体存在EBV复制。胸部HRCT主要表现为磨玻璃密度斑片影(87.5%)、淋巴管周围结节(81.2%)、小叶间隔不规则增厚(68.8%)、支气管血管束旁结节(56.2%)、胸膜下结节影(50.0%)、支气管血管束增粗(43.8%)和小叶内间隔增厚(37.5%),其他表现有胸腔积液(25.0%)和纵隔/肺门淋巴结肿大(6.2%)。结论EBV感染所致肺部感染主要表现为间质性肺炎,病变沿肺内淋巴管走行分布,以多种形态混合多见。胸部HRCT表现具有一定特征,可为临床诊断提供一定参考。

EB病毒编码小RNA多态性与鼻咽癌的关系

目的 探讨 EB病毒编码小 RNA (EBERs)多态性与鼻咽癌发病趋势的联系。方法 巢式 PCR扩增 E-BER- 1和 EBER- 2序列 ,直接测序 ,比较鼻咽癌高发区广东地区鼻咽癌组织、正常人鼻咽黏膜组织和鼻咽癌低发区哈尔滨地区正常人漱口液感染的 EB病毒 EBERs序列差异。结果 广东地区鼻咽癌组织感染的 EBERs具备 1型病毒的特征。与原型株 B95 .8相比 ,广东地区鼻咽癌组织来源的 EBER- 2基因存在 8处碱基替换和 2处碱基缺失。但是 ,广东正常人鼻咽黏膜组织和哈尔滨地区正常人漱口液来源的 EBERs也有相同的碱基替换和缺失。结论 鼻咽癌高发区和低发区流行的 EB病毒 EBERs序列呈现高度一致性。

过敏性紫癜及紫癜肾与病毒感染关系探讨

目的 探讨太原地区过敏性紫癜及紫癜肾与病毒感染的关系。方法 对 52例过敏性紫癜患儿及 35例正常儿童用多聚酶链反应 (PCR)技术检测血人微小病毒B1 9DNA阳性率 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测EBV IgM及乙肝病毒 (HBV)两对半阳性率。结果 ①人微小病毒B1 9阳性率为 2 1 .1 % ,EBV为 1 7.3 % ,HBV为 3 .8%。正常对照组分别为 5 7%、2 9%、5 .7% ,与HSP组比较 ,三组均有显著性差异 (P <0 0 2 5) )。②病毒感染组与无感染组肾损比较有显著性差异 (P <0 0 2 5)。结论 此三种病毒感染是太原地区过敏性紫癜发病的重要原因 。