高效液相色谱法测定司美格鲁肽原料药中游离脂肪酸侧链的含量

目的建立高效液相色谱法检测司美格鲁肽原料药中的游离脂肪酸侧链[(S)-9,18,23-三氧代-2,5,11,14-四氧杂-8,17,22-三氮杂三十九烷-1,21,39-三羧酸]的含量。方法采用Kinetex C8(4.6 mm×150 mm,2.6μm)色谱柱;流动相A为0.1%三氟乙酸-水溶液;流动相B为0.1%三氟乙酸-乙腈溶液;洗脱梯度(0 min,30%B;20 min,70%B;21min,30%B;30 min,30%B),流速0.7 mL·min^(-1);柱温35℃;检测波长210 nm。考察方法的专属性、线性范围、定量限与检测限、准确度和耐用性等。采用该方法检测3批司美格鲁肽原料药中的游离脂肪酸侧链含量。结果脂肪酸侧链与司美格鲁肽的分离度为4.05,在1.00~50.15μg·mL^(-1)与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=0.2584X-0.0936,R^(2)=0.9999;检测限和定量限分别为0.392μg·mL^(-1)和0.784μg·mL^(-1)。结论建立的方法具有良好的专属性和准确度,可用于司美格鲁肽原料药中游离脂肪酸侧链含量的测定。