PEG化重组人白细胞介素-6制品游离PEG测定方法的研究

为了建立PEG化学修饰的重组人白细胞介素-6(PEG-rhIL-6)的部分质量控制方法,参照2005年版《中华人民共和国药典》三部附录III B高效液相色谱法,以RP-HPLC方法分离PEG-rhIL-6原液中的不同成分,用蒸发光散射监测器检测游离PEG,用外标法测定计算样品中残留PEG的含量。PEG修饰rhIL-6结构稳定;制品中的游离PEG含量符合要求。RP-HPLC法检测游离PEG结果可靠。

聚氧丙烯-聚氧乙烯共聚醚分子结构及其游离聚氧丙烯醚、聚氧乙烯醚的测定

应用反相高效液相色谱法 ,选择了micro -BondapakC18(30cm× 3 9cmi d 10 μm)色谱柱 ,2 10nmUV检测 ,流动相甲醇 /水 (V/V ) :70 /30 (4 0min)～ 70 /30 (5min)～ 80 /2 0 (30min)线性梯度洗脱(1 0mL/min) ,分离并测定了聚氧丙烯 -聚氧乙烯 (PO -EO)共聚醚中游离聚氧丙烯醚、聚氧乙烯醚 (PEG与PPG)。同时 ,根据游离PEG、PPG与PO -EO共聚醚的色谱分离条件 ,应用制备液相色谱法 ,制备提纯出PO -EO共聚醚纯品 ,并进行了GPC、NMR测试 ,排除了游离PEG、PPG对上述测定的干扰 ,确定了其相对分子质量与分子结构 ,建立了一套完整准确的PO

聚乙二醇化重组人干扰素α2b注射液中游离聚乙二醇含量的测定

目的建立测定聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)化重组人干扰素α2b(Peg-IFNα2b)注射液中游离PEG含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测方法,并进行方法的验证。方法以Sepax Bio-C18为固定相,流动相A为0.1%三氟乙酸-水溶液,流动相B为0.1%三氟乙酸-90%乙腈-10%水溶液,梯度洗脱,蒸发光散射检测器检测不同浓度PEG对照品及Peg-IFNα2b注射液样品,建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法,并对方法进行专属性、线性范围、检测限及加样回收率验证。结果高效液相色谱显示,PEG对照品与混有PEG对照品的Peg-IFNα2b注射液色谱峰分离度良好,且无其他色谱峰干扰;PEG对照品在6.25~100.00μg/mL范围内线性良好,R2=0.9903;最低检测限约为1.56μg/mL;低、中、高3个浓度的PEG对照品加样回收率分别为107.51%、103.52%和95.99%。结论建立的方法简单、准确、快速,可用于测定Peg-IFNα2b注射液中游离PEG含量。