饲料中添加发酵豆粕对湘云鲫生长性能、肠道及肝脏健康的影响

为研究饲料中添加发酵豆粕对湘云鲫幼鱼生长性能、肠道及肝脏健康的影响,试验以豆粕含量26%、鱼粉含量20%的饲料作为基础鱼粉组(FM组)饲料,在FM组饲料的基础上添加12%发酵豆粕等蛋白替代10%豆粕和2%鱼粉制成发酵豆粕替代组(FSM组)饲料,对初始体重为(37.26±0.16)g的湘云鲫幼鱼进行为期56 d的养殖试验。结果显示:与FM组相比,FSM组增重率、特定生长率、尾均摄食量、饵料系数、肥满度、脏体比、肝体比、干物质沉积率、蛋白质沉积率及脂肪沉积率均无显著变化(P>0.05);肌肉粗蛋白质含量显著提高(P<0.05),粗灰分含量显著降低(P<0.05),全鱼粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分以及肌肉粗脂肪含量没有显著变化(P>0.05)。在肠道健康方面,FSM组肠道绒毛数目和绒毛高度和FM组间无显著差异(P>0.05);与FM组相比,FSM组血浆D-乳酸含量显著降低了21.5%(P<0.05),血浆内毒素含量和二胺氧化酶活性在FSM组和FM组间无显著差异(P>0.05);FSM组肠道脂肪酶活性较FM组显著提高了10.2%(P<0.05),胰蛋白酶、淀粉酶和Na+-K+ATP酶活性在两组间差异不显著(P>0.05);与FM组相比,FSM组肠道总超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量无显著差异(P>0.05)。在肝脏健康方面,发酵豆粕添加对湘云鲫肝脏结构无明显影响,两组均肝细胞索明显,排列较整齐,肝细胞结构完整;与FM组相比,FSM组血浆谷丙转氨酶活性和总胆固醇含量显著降低(P<0.05),其中谷丙转氨酶活性显著降低11.3%,总胆固醇含量降低23.1%,溶菌酶活性和免疫球蛋白M含量显著提高(P<0.05),两组间甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量以及谷草转氨酶活性均无显著差异(P>0.05)。

湘云鲫夏花鱼种培育技术

湘云鲫夏花鱼种培育阶段常遇低温多雨天气,对苗种培育成活率不利,想要提高成活率除严格按照常规鱼苗、鱼种培育规程操作外,另需强化以下几方面。一、消毒及解毒水花养殖池塘清塘要彻底,周边环境须干净,不能有杂鱼、杂草、杂物及敌害生物,水深0.5~0.8米带水清塘,放苗后3~5天不加水。

脂砚的确是湘云

脂砚斋文本角色为史湘云,是周汝昌先生平生治红“最得意、最精彩”且“最重要”的考证结论。据《脂砚斋重评石头记》校笺本整理尤其后三十回文献辑佚过程中所获得的系列文献证据,可以推知,周先生此一考论结果的确可信。确认脂砚即湘云并揭示其命运轨迹,不仅可为《红楼梦》成书过程研究与《红楼梦》文本研究指出一条特殊路径,也可以为曹学、版本学、脂学、探佚学四大学科分支提供学术基点。

低蛋白质饲料对湘云鲫幼鱼生长性能及肠道、肝脏健康的影响

本试验旨在研究低蛋白质饲料对湘云鲫幼鱼生长性能及肠道、肝脏健康的影响。选择初始体重为(37.15±0.46)g、体质健壮的湘云鲫幼鱼360尾,随机分为6组,每组3个重复,每个重复20尾。各组分别饲喂蛋白质水平分别为37%、36%、35%、34%、33%、32%的6种等能饲料。试验期8周。结果表明:1)32%、33%和34%蛋白质水平组的终末均重和特定生长率显著低于37%蛋白质水平组(P<0.05),32%、33%、34%和35%蛋白质水平组的增重率显著低于37%蛋白质水平组(P<0.05),32%、33%、34%和35%蛋白质水平组的饲料系数显著高于37%蛋白质水平组(P<0.05)。33%蛋白质水平组的脏体比显著低于37%蛋白质水平组(P<0.05)。32%、33%、34%、35%和36%蛋白质水平组的全鱼粗蛋白质含量显著低于37%蛋白质水平组(P<0.05),32%、33%、34%和35%蛋白质水平组的内脏团和肌肉粗脂肪含量显著高于37%蛋白质水平组(P<0.05)。2)32%、33%和35%蛋白质水平组的肠道胰蛋白酶活性显著低于37%蛋白质水平组(P<0.05)。32%蛋白水平组的肠道绒毛高度显著低于37%蛋白质水平组(P<0.05)。32%和33%蛋白质水平组的血浆二胺氧化酶活性显著高于37%蛋白质水平组(P<0.05)。3)32%、33%和34%蛋白质水平组的血浆甘油三酯含量显著高于37%蛋白质水平组(P<0.05)。32%、33%、34%和35%蛋白质水平组的肝脏总抗氧化能力显著低于37%蛋白质水平组(P<0.05),32%蛋白质水平组的肝脏丙二醛含量显著高于37%蛋白质水平组(P<0.05)。综上所述,适当降低饲料蛋白质水平(36%)的可在不影响生长性能和肝脏健康的前提下,提高肠道代谢和屏障功能,但饲料蛋白质水平过低(≤35%)会引起生长性能下降,肠道和肝脏健康受损。在本试验条件下,综合考虑生长性能与健康状况,饲料蛋白质水平为36%时,不影响湘云鲫幼鱼生长性能和肝脏健康,且有助于激活肠道功能,在实现蛋白质节约的同时保障湘云鲫幼鱼的健康生长。

浅析湘云鲫3号鱼种分级培育新模式

湘云鲫3号是由湖南湘云生物科技有限公司技术团队在原湘云鲤、鲫育种生物技术路线基础上,通过改良培育出的新三倍体鲫鱼品种。因其具备生长速度更快、饵料系数更低、耐低氧、抗病能力强、肌间刺少等特性受到了更多养殖户的推崇与消费者的喜爱,近几年湘云鲫3号销售市场也不断扩增。

湘云鲫2号肠道干细胞标志物LGR6分子特征及其多克隆抗体制备

【目的】克隆湘云鲫2号肠道干细胞标志物LGR6(3nLGR6)并制备多克隆抗体,为从肠道干细胞角度揭示湘云鲫2号的抗病机制提供技术支持。【方法】通过PCR扩增3nLGR6基因开放阅读框(ORF)序列,采用InterProScan、TMHMM Server 2.0、ExPASy Proteomics Server、SignalP 5.0、PSORTⅡPrediction、SoftBerry-Psite、SWISS-MODEL及MEGA 11.0等在线软件进行生物信息学分析;利用原核表达系统表达融合蛋白,以纯化的融合蛋白免疫BALB/c雌性小鼠制备多克隆抗体,基于免疫组织化学分析3nLGR6在湘云鲫2号肠组织中的分布情况。【结果】3nLGR6基因ORF序列全长2874 bp,共编码957个氨基酸残基;3nLGR6蛋白理论分子量约105.4 kD,理论等电点(p I)为5.44,在其N端有1个亮氨酸重复序列结构域,C端存在1个7次跨膜结构的GPCR结构域,且在18Gly与19Ser间存在信号肽切割位点(Sec信号肽)。3nLGR6与其他硬骨鱼类的LGR6氨基酸序列高度同源,其中与二倍体斑马鱼的相似性为92.28%。与鱼类LGR6作用密切的基因有LGR4、RNF43、RSPO2、CTNNB1、APC和CTNNA1,主要涉及Wnt信号通路和Adherens junction信号通路。以纯化得到的融合蛋白3nLGR6免疫BALB/c雌性小鼠,能成功制备出小鼠抗3nLGR6多克隆抗体,且免疫组化试验结果显示该抗体可特异性识别湘云鲫2号肠道组织中的3nLGR6。【结论】3nLGR6与其他物种的LGR6氨基酸序列高度同源,其结构和功能相对较保守。制备获得的小鼠抗3nLGR6多克隆抗体能特异性识别湘云鲫2号肠道内源性3nLGR6,为后续深入研究LGR6在硬骨鱼组织中的表达情况及揭示LGR6在肠道黏膜稳态中的作用机制提供了技术支撑。

湘云鲫、湘云鲤消化道的组织学研究

采用石蜡切片法和显微测量法研究了新型三倍体鱼—湘云鲫 (CarassiusauratusTriploid)、湘云鲤(CyprinuscarpioTriploid)消化道的组织结构 ,并探讨了消化道组织结构和食性之间的关系。结果表明 :湘云鲫、湘云鲤食道和肠道壁均由粘膜层、粘膜下层、肌层、浆膜层 4层组成 ,缺乏粘膜肌 ;二者消化道的组织结构与其各自的食性一致 ;二者食道粘膜上皮由单层柱状细胞和杯状细胞组成 ,这与其它鱼类的不同 ;湘云鲫比湘云鲤具有对食物更强的消化吸收能力 ;湘云鲫、湘云鲤肠道可分为前肠、中肠、后肠 3段。

四倍体湘鲫F_3 F_4、三倍体湘云鲫、湘云鲤及有关二倍体的DNA含量

用流式细胞仪测定湘鲫Ｆ２ 、湘云鲫、湘云鲤、湘鲫Ｆ３Ｆ４ 、湘江野鲤、红鲫、白鲫的红细胞、肌肉细胞中的ＤＮＡ 含量。结果表明：湘鲫Ｆ２ 的ＤＮＡ 含量与白鲫、红鲫、湘江野鲤的ＤＮＡ 含量很接近，其ＤＮＡ含量比与１∶１ 的比例没有显著差异（Ｐ＞ ０－０５） ；湘云鲫和湘云鲤的ＤＮＡ含量都是湘江野鲤的ＤＮＡ含量的１－５ 倍，其比值与１－５∶１ 的比例没有显著的差异（Ｐ＞ ０－０５） ；湘鲫Ｆ３ 和Ｆ４ 的ＤＮＡ含量都是湘江野鲤或湘鲫Ｆ２ 的ＤＮＡ含量的２ 倍，其比值与２∶１ 的比例没有显著的差异（Ｐ＞ ０－０５） ．上述结果提供了湘鲫Ｆ３ 、Ｆ４ 代为四倍体和湘云鲫及湘云鲤为三倍体的证据。

湘云鲫和湘云鲤的形态特征

采用常规测量法和解剖法测定了湘云鲫、湘云鲤的形态特征 .湘云鲫的主要性状为 :背鳍条 3,17～2 0 ,臀鳍条 3 ,6 ,胸鳍条 1,14,腹鳍条 1,8.侧线鳞式 2 9～ 32 66 -V.第一列鳃弓外列鳃耙数 5 0～ 5 2 .下咽齿一行 ,4～ 4,铲齿 .体长为体高的 ( 2 .79± 0 .38)倍 ,为头长的 ( 3.75± 0 .2 5 )倍 ,为尾柄长的 ( 5 .5 9± 0 .33)倍 .头长为吻长的 ( 3.6 8±0 .46 )倍 ,为头高的 ( 1.2 4± 0 .11)倍 .尾柄长为尾柄高的 ( 1.2 3± 0 .11)倍 .湘云鲤的主要性状为 :背鳍条 3,17～ 19,臀鳍条 3 ,6 ,胸鳍条 1,13～ 14,腹鳍条 1,7～ 8.侧线鳞式 32～ 345～ 65～ 6 -V.第一列鳃弓外列鳃耙数 31～ 32 .下咽齿二行 ,2 ,4～ 4,2 ,臼齿 .体长为体高的 ( 3.0 9± 0 .17)倍 ,为头长的 ( 3.71± 0 .19)倍 ,为尾柄长的 ( 5 .70± 0 .6 9)倍 .头长为吻长的 ( 3.0 3± 0 .36 )倍 ,为头高的 ( 1.2 7± 0 .0 8)倍 .尾柄长为尾柄高的 ( 1.2 2± 0 .17)倍 .

三倍体湘云鲫繁殖季节的性腺结构观察

在繁殖季节解剖 ３７尾 １龄和 １６尾 ２龄湘云鲫，用光镜和电镜观察了湘云鲫的性腺结构。在湘云鲫的性腺部位有三种类型的结构：（１）精巢型：精巢小叶内分布有许多精子细胞，精子细胞呈退化现象，没有发现有正常成熟精子。（２）卵巢型：该类型性腺的大部分为体积较小、分化程度较低的呈囊状排列的细胞，在这些小细胞中镶嵌着少量初级卵母细胞和体积较大的退化的卵母细胞。（３）脂肪型：该类型的性腺部位仅有两条脂肪组织，既没有卵巢结构，也没有精巢结构。上述三种性腺结构证明三倍体湘云鲫是不育的。

饲料中添加天蚕素抗菌肽对湘云鲫生长性能、非特异性免疫功能及抗病力的影响

本研究旨在探讨饲料中添加不同水平的天蚕素抗菌肽对湘云鲫生长性能、非特异性免疫功能与抗病力的影响.试验选取了1 242尾湘云鲫[初均重（46.14±0.13） g],随机分成6组,每组3个重复,分别饲喂在基础饲料中添加4 mg/kg金霉素及0（对照）、100、150、200和250 mg/kg天蚕素抗菌肽的6种等氮（粗蛋白质32.27％）等能（消化能12.85MJ/kg）试验饲料.试验期为8周,试验结束后测定湘云鲫生长、免疫、形体指数等指标.结果表明：1）与对照组比,150 mg/kg天蚕素抗菌肽组湘云鲫末均重、增重率和特定生长率均显著高于对照组（P＜0.05）,分别提高了15.0％、37.4％和27.5％.2）150 mg/kg天蚕素抗菌肽组湘云鲫肥满度显著高于对照组（P＜0.05）.3）与对照组相比,饲料中添加200和250 mg/kg天蚕素抗菌肽能显著提高湘云鲫的血清超氧化物歧化酶活性（P＜0.05）;添加150和200mg/kg天蚕素抗菌肽均显著降低了血清丙二醛含量（P＜0.05）;添加各水平天蚕素抗菌肽均显著提高了血清溶菌酶活性（P＜0.05）,但各添加水平组之间差异不显著（P＞0.05）.4）饲料中添加250 mg/kg天蚕素抗菌肽组的湘云鲫肌肉粗脂肪含量显著低于对照组（P＜0.05）.但各组肌肉水分和粗蛋白质含量没有显著性差异（P＞0.05）.5）采用嗜水气单胞菌进行攻毒后,湘云鲫48 h内死亡率较低,攻毒48～72 h是死亡的高峰期,天蚕素抗菌肽组的成活率明显高于对照组,其中对照组成活率最低.由此得出,本试验条件下,在饲料中添加天蚕素抗菌肽对湘云鲫有促生长效果,且150和2C0 mg/kg添加组效果较佳,同时提高了鱼体的非特异性免疫功能和抗病力.

三倍体湘云鲫性腺指数分析

对三倍体湘云鲫和作为对照的二倍体日本白鲫的性指数进行了比较分析。三倍体湘云鲫的卵巢指数、精巢指数、脂肪型“性体”指数都分别低于日本白鲫的卵巢指数、精巢指数及两者的平均值。日本白鲫的卵巢指数是湘云鲫卵巢指数的 2 .85倍 ,日本白鲫的精巢指数是湘云鲫精巢指数的 1.94倍 ,日本白鲫卵巢和精巢的平均指数是湘云鲫脂肪型“性体”指数的 5 .6 0倍。具脂肪型“性体”的湘云鲫生长速度最快 ,其次是雌性湘云鲫 ,最后是雄性湘云鲫。根据性体指数对照 ,说明三倍体湘云鲫的性腺发育受到不同程度的抑制 ,其中脂肪型“性体”中生殖细胞的发育完全被抑制 ;卵巢发育的抑制程度大于精巢 ,其主要抑制效应表现在具有卵黄的卵母细胞的大幅度减少。无论从生殖角度还是生长角度来考虑 ,具有脂肪型“性体”

四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫染色体减数分裂观察(英文)

用精巢细胞直接制片法观察了异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和二倍体红鲫、湘江野鲤精母细胞染色体第一次减数分裂中期配对情况 ;作为对照 ,观察了上述四种鱼肾细胞的有丝分裂中期染色体。在精母细胞第一次减数分裂中 ,异源四倍体鲫鲤同源染色体两两配对 ,形成 10 0个二价体 ,没有观察到单价体、三价体和四价体 ;三倍体湘云鲫精母细胞形成 5 0个二价体和 5 0个单价体 ;红鲫和湘江野鲤精母细胞分别形成 5 0个二价体。肾细胞检测表明异源四倍体的染色体数目为 4n =2 0 0 ;湘云鲫为 3n =15 0 ;红鲫和湘江野鲤分别为 2n =10 0。减数分裂时染色体分布情况与肾细胞染色体检测结果相吻合。具有四套染色体的异源四倍体鲫鲤在减数分裂中只形成 10 0个二价体 ,而不形成 2 5个四价体或其它形式 ,为产生稳定一致的二倍体配子提供了重要的遗传保障 ,也为人工培育的异源四倍体鲫鲤群体能够世世代代自身繁衍下去提供了重要的遗传学证据。三倍体湘云鲫在减数分裂过程中出现二价体、单价体共存 ,同源染色体在配对和分离中出现紊乱 ,导致非整倍体生殖细胞的产生 。

三倍体湘云鲫及其亲本线粒体DNA的比较研究

用人工选育的异源四倍体鲫鲤 (♂ )与白鲫 (♀ )杂交获得具有明显生长优势的三倍体湘云鲫。采用差速离心和核酸酶处理等方法 ,从三倍体、白鲫和异源四倍体鲫鲤肝组织中提取线粒体DNA ,并用 9种限制性内切酶进行单酶酶切分析。经琼脂糖凝胶电泳后计算出各酶切片段的大小 ,测得三倍体、白鲫和异源四倍体鲫鲤mtDNA的分子大小分别为 16 .2 4kb、16 .6 0kb和 16 .2 0kb。根据各单倍型间的酶切片段共享度 ,估算出 3个群体间的遗传距离 ,说明了mtDNA母系遗传的特性。

异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和它们父母本线粒体DNA12SrRNA基因遗传变异的分析

采用质粒克隆测序方法 ,获得了异源四倍体鲫鲤 5个个体、异源四倍体鲫鲤雌核发育二倍体后代 2个个体、三倍体湘云鲫 2个个体及红鲫、湘江野鲤和日本白鲫各 1个个体的线粒体DNA 12SrRNA基因的全序列。经对比发现 ,异源四倍体 5个个体共享 2种单元型 ,异源四倍体鲫鲤雌核发育二倍体后代 2个个体、三倍体湘云鲫 2个个体以及红鲫、湘江野鲤和日本白鲫各 1个个体分别共享 1种单元型。用MEGA 1 0软件分析了它们的碱基组成和核苷酸序列差异 ,用邻接法构建系统进化树。它们间的序列同源性在 95 %～ 99%之间 ,异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和它们母本 (分别为红鲫和日本白鲫 )之间的序列同源性大于异源四倍体鲫鲤、三倍体湘云鲫和它们父本(分别为湘江野鲤和异源四倍体鲫鲤 )之间的序列同源性 ,结果表明 :异源四倍体鲫鲤和三倍体湘云鲫在线粒体DNA 12SrRNA基因上具有母性遗传特征。另一值得注意的地方是异源四倍体鲫鲤经过 9代 (F3 F11)繁殖后 ,在 5个个体中发现了 2种单元型 ,说明在四倍体基因库中存在遗传多样性 ,为四倍体基因库的繁殖。

L-苹果酸对湘云鲫生长性能、体组成、消化和抗氧化能力的影响

本试验旨在研究L-苹果酸对湘云鲫生长性能、体组成、消化和抗氧化能力的影响.选取均重为（16.25±0.03）g的湘云鲫450尾,随机分为6组（每组3个重复,每个重复25尾）,分别饲喂在基础饲料中添加0（对照组）、1、2、4、8和16 g/kg L-苹果酸的试验饲料,试验期90 d.结果表明：饲料中添加L-苹果酸可显著降低饲料pH和系酸力（P＜0.05）.饲料中添加L-苹果酸可提高湘云鲫的摄食量和增重率,降低饲料系数,并在添加水平为4 g/kg时达到最佳生长性能.饲料中L-苹果酸添加水平为0 ～8 g/kg时,全鱼水分含量逐渐下降,粗蛋白质、粗脂肪和粗灰分含量逐渐增加,且4和8 g/kg组均与对照组差异显著（P＜0.05）.饲料蛋白质沉积率在4 g/kg组达到最高,脂肪和灰分沉积率则在8 g/kg组最高,并均与对照组差异显著（P＜0.05）.肠道淀粉酶活性在4g/kg组达到最高,脂肪酶、胰蛋白酶和Na＋/K＋-ATP酶活性均在8 g/kg组达到最高,并均与对照组差异显著（P＜0.05）.饲料中添加L-苹果酸可提高肝脏超氧化物歧化酶和苹果酸脱氢酶活性,降低丙二醛含量,且上述指标均在4 g/kg组达到最佳值,并与对照组差异显著（P＜0.05）.由此得出,饲料中适量添加L-苹果酸可促进湘云鲫的生长,降低饲料系数,增加鱼体营养物质沉积,提高消化和抗氧化能力;L-苹果酸在湘云鲫饲料中的适宜添加量为4～8 g/kg.

湘云鲫2号肌肉营养成分和氨基酸组成分析

利用鱼类远缘杂交和雌核发育相结合的方法获得了改良四倍体鲫鲤(G×AT)并培育出改良二倍体红鲫(IRCC),两者交配制备出一种改良三倍体鲫鱼—湘云鲫2号(ITCC).运用生化分析方法对湘云鲫2号及其父母本的含肉率以及肌肉营养成分和氨基酸质量分数进行了定量分析.结果表明:湘云鲫2号含肉率高达50.37%,肌肉中蛋白质质量分数为19.65%,水分质量分数为77.09%,脂肪质量分数为2.14%,灰分质量分数为1.23%;肌肉干样中氨基酸总质量分数为77.79%,人体必需氨基酸质量占氨基酸总质量的25.26%,4种呈味氨基酸质量占氨基酸总质量的32.49%.通过对比湘云鲫2号与其父母本肌肉中氨基酸成分,发现4种呈味氨基酸含量远远高于其父母本中相应的4种氨基酸含量,同时也远远高于其他许多淡水鱼类.综合分析表明湘云鲫2号是一种高蛋白、低水分、氨基酸含量丰富、营养价值高的优质淡水鱼类.相关营养指数为湘云鲫2号良种种质标准提供了依据.

丁酸钠对湘云鲫蛋白质代谢及其相关基因表达的影响

本试验旨在研究丁酸钠对湘云鲫蛋白质代谢及其相关基因表达的影响.试验在室内养殖系统中进行,将450尾初始体质量为（6.02±0.16）g的湘云鲫随机分为5组（每组设3个重复,每个重复30尾）,分别饲喂在基础饲料中添加0（对照）、1.0、2.5、5.0和7.5 g/kg丁酸钠（30％微囊包膜丁酸钠）的等氮等能试验饲料,试验持续7周.结果表明：饲料中添加1.0～7.5 g/kg丁酸钠显著提高了湘云鲫血清总蛋白、白蛋白、球蛋白的含量（P＜0.05）;亦提高了血清白球比、谷草转氨酶活性和葡萄糖含量,但仅2.5和5.0g/kg丁酸钠组的血清白球比、2.5 g/kg丁酸钠组的血清谷草转氨酶活性和5.0 g/kg丁酸钠组的血清葡萄糖含量与对照组相比达到了显著水平（P＜0.05）.与对照组相比,各添加组血清游离非必需氨基酸含量有增有减,变化规律不明显.随着丁酸钠添加水平的增加,血清中其他游离必需氨基酸基本上都表现为先增加后降低,在丁酸钠添加水平为2.5 g/kg时达到最高,而唯独赖氨酸表现为持续下降.与对照组相比,1.0和2.5 g/kg丁酸钠组肠道氨肽酶N（APⅣ）基因的相对表达量显著降低（P＜0.05）,2.5、5.0和7.5丁酸钠组肠道谷氨酸脱氢酶（GDH）基因的相对表达量显著升高（P＜0.05）.上述结果表明,饲料中添加适量的丁酸钠可提高湘云鲫的蛋白质代谢水平及其相关基因的表达,结合生长指标和生产成本,推荐添加剂量为2.5 g/kg.