湿地松×加勒比松杂种松扦插繁殖技术研究

1999年冬 ,在广东台山红岭种子园内进行湿×加杂种松嫩枝扦插繁殖试验。采用 5个插前穗条浸渍处理、2个荫棚环境 (各设 3个重复 )进行扦插试验。结果表明 ,在合适条件下 ,湿×加杂种松扦插生根率高 ,平均可达 95 .0 %以上 ,扦插苗根系、抽梢生长良好。荫棚环境、遗传因素对生根率、每株不定根数、抽梢长均有显著的影响 ,微型荫棚与大型荫棚相比 ,所扦插苗木的这 3个指标要分别高出 2 .2个百分点、1.39条、8.6 5cm ,但大型荫棚生根较微型荫棚要快 ;家系间这 3个指标的极差分别为 4 .2个百分点、1.4 1条、4 1.75cm。插前采用 1g·L- 1多菌灵水溶液或 5 0mg·L- 1的ABT 1号生根粉 + 1g·L- 1多菌灵水溶液浸泡穗条 4 7h可有效地提早生根时间和增加扦插苗的高生长。广东中、南部地区冬、春季荫棚内 ,插后 4 0d穗条已全部愈合 ,插后 5 1 73d、84

湿地松×加勒比松F_1杂种的扦插苗与实生苗早期生长比较

利用湿地松与加勒比松的7个杂交组合的扦插苗和实生苗营建对比试验林,扦插苗和实生苗的造林成活率分别为97 19%和97 55%;造林后第4年,杂种松无性群体和实生群体相对于湿地松种子园种的树高、胸径、材积现实增益分别达29%与26%、34%与34%、133%与135%;杂种的无性群体在种植后的1～3a内生长比实生群体慢,但年生长量逐年增大,到第4年时可超过实生群体。初步的试验结果表明,优良杂种的扦插苗可在我国南方地区推广应用。

湿地松×加勒比松的杂种合子胚和雌配子体组织不同发育时期的金属元素分析

金属元素是种子发育过程的必要营养,不仅可直接作为胚胎发育所必需的养分,而且还是一些生理生化过程酶促反应的关键辅助因子。本实验用电感耦合等离子发射光谱(inductively coupled plasma emission spectroscopy,ICPES)对湿地松(Pinus elliottii E.)×加勒比松(Pinus caribaea M.)杂交组合种子发育过程中合子胚和雌配子体组织不同发育时期的重要元素进行分析。结果表明,K和Na在种子发育早期雌配子体中的量最高;Zn、Cu和Mg在雌配子体发育过程中呈小幅度上升;P和Fe随着雌配子体发育呈较大幅度上升趋势;微量元素Co和Ni在初期未检测到,而后大体上呈两个阶段上升趋势;Mn、Ni、B、Na、Al和K在胚胎发育早期合子胚中值最高;P、Mg和Fe呈相似的变化趋势,在6月26日的量最低而后随胚发育逐渐上升;Ca在合子胚发育早期的含量较高,随后下降,在7月15日呈最低值而后大幅度上升,在合子胚发育后期达到最大值。合子胚和雌配子体元素的分析将为体胚发生的条件培养基组分优化提供一定的启示。

湿地松与加勒比松杂种第一代生长研究初报

湿地松与加勒比松杂交子代具有显著大于湿地松纯种的生长量优势，与湿地松种子园后代相比，湿地松×洪都拉斯加勒比松杂种的树高、材积平均增益分别为３５．８％，２４４．６％；湿地松×本种加勒比松杂种的树高、材积增益分别为４０．８％，２１０．９％。从中选择出的８个优良杂交组合，其树高、材积平均增益分别达５０．８％和３４９．５％。文中还从理论上探讨了控制杂种优势的遗传因素、湿地松一般配合力与一般杂交力的关系。

湿地松与加勒比松杂种第一和第二代木材基本密度比较

从湿地松×洪都拉斯加勒比松Ｆ１和Ｆ２各１５个家系中取样，测定和分析其木材基本密度发现，Ｆ１和Ｆ２木材全木芯基本密度的总平均值间没有显著差异，木材密度的变幅Ｆ２比Ｆ１的略大，而幼龄材与成熟材的基本密度之间的差异Ｆ２比Ｆ１小。

湿地松×加勒比松杂种木材密度QTL定位分析

以湿地松1个无性系为母本,加勒比松1个无性系为父本,杂交产生F1代的86个单株,采用JoinMap~?3.0软件构建包含ESTP、SSR、AFLP标记和PAL1基因在内的加勒比松多标记复合遗传图谱。该图谱总长度为1 734 cM,包括70个SSR,125个AFLP,3个ESTP标记和PAL1基因,分成32个连锁群,标记平均间距(10.6±7.8)cM,覆盖加勒比松基因组的92%。用作图软件MapQTL 4.0~?对86个单株的平均木材密度进行QTL定位,共检测到6个木材密度相关的连锁群,且呈相对集中分布。获得在连锁群H2_Pc7上的PR117M和PR256M的区段内解释表型方差在20%以上的效应值较大的QTL位点,并且在两个连锁群上相对狭窄的范围内连锁或重叠,呈一因多效模式。

湿地松×洪都拉斯加勒比松F_1杂种的多性状综合评价

根据1块种植于广东省台山市红岭种子园的湿地松×洪都拉斯加勒比松F1杂种测定林的7年生数据,就杂种的生长量、树干通直度、分枝习性与湿地松、加勒比松进行了比较分析。结果表明,F1杂种的生长优势突出,树高、胸径、材积分别为9.18 m、14.96 cm、0.086 45 m3,相对于湿地松、洪都拉斯加勒比松和古巴加勒比松种子园混合种的材积现实增益分别为315.23%、46.35%、114.89%。此外,杂种的树干通直度得分、冠幅、枝角、枝径、枝数分别为1.54分、3.45 m、68.93°、1.84 cm、3.35条,其树干通直度得分与母本湿地松接近而显著低于父本洪都拉斯加勒比松,冠幅和枝径与父本相似而显著大于母本,枝角介于父、母本之间,枝数与父、母本没有显著差异。

湿地松与洪都拉斯加勒比松的杂交效果分析

利用种植于广东省台山市的1块9年生杂种松测定林的生长数据，分析了湿地松与洪都拉斯加勒比松杂种家系（PEE×PCH）、湿地松全同胞家系（PEE×PEE）和自由授粉家系（PEE（op））的生长量差异，估算了杂交亲本的一般配合力（GCA）、一般杂交力（GHA）和亲本间的特殊杂交力（SHA），探讨了GCA与GHA、GHA和SHA与杂种子代生长表现的相关关系。结果表明：类型间生长量存在极显著差异，从大到小的排列顺序为PEE×PCH〉PEE×PEE〉PEE（op）〉CK，杂种家系的平均材积比CK大221．36％；根据生长性状选择出国产的优良杂种家系15个，其树高、胸径、材积、每公顷蓄积量分别为10．96～12．57m、17．42～21．25cm、0．1562～0．2367m^3、141．75～233．82m^3，相对于CK的材积现实增益为216．19％～379．15％；选择出GHA效应大、可靠性高的杂交亲本4个，可用于大量制种；湿地松无性系树高性状的GCA与树高、胸径、材积性状的GHA存在极显著的正相关关系；PEE×PCH杂种家系的生长表现与其亲本的GHA密切相关，尤其与双亲的GHA之和的相关系数最大，达到0．8918以上。

湿地松林和加勒比松林的土壤特性研究

研究比较了湿地松Pinus elliottii林和加勒比松Pinus caribaea林的土壤特性.研究表明,湿地松土壤容重略大于加勒比松,土壤毛管孔隙度、总孔隙度和毛管持水量分别比后者小14%、3%和16%,而非毛管孔隙度比后者大9%.湿地松林的土壤有机质、全N、全P、土壤水解N含量分别比加勒比松高170%、90%、71%和27%,而土壤全K和速效K含量分别比后者低30%和14%,二者的速效P含量相近.湿地松土壤细菌、真菌和放线菌数量和脲酶活性分别为加勒比松的1.2、3.8和3.8倍,脲酶活性比后者高43%,而土壤磷酸酶和过氧化氢酶活性分别比后者低15%和8%.

适用于微卫星标记的湿地松、加勒比松DNA快速提取法

以湿地松(Pinuselliottii,PEE),包括古巴加勒比松(P.caribaea var.caribaea,PCC)、洪都拉斯加勒比松(P.caribaea var.hondurensis,PCH)、巴哈马加勒比松(P.caribaeavar.bahmaensis,PCB)3个变种在内的加勒比松,侧枝顶芽为试验材料,使用RETSCHMM400混合球磨仪破碎植物组织,然后利用改良CTAB法提取基因组DNA,完成48个样品仅用1h,1个工作日可提取300个样品以上,DNA分子量大于20kb,0.3g样品可提取DNA20-60μg,能够满足几百次PCR反应;利用所提DNA进行SSR分析,条带清晰,多态性好,说明该方法提取的DNA完全可以满足SSR反应的需要。本研究为SSR标记用于湿地松、加勒比松分子标记辅助选择育种提供了经济、高效、可靠的DNA提取方法。

昆士兰湿地松×加勒比松杂种子代10～11龄生长评价

对湿地松×加勒比松杂种 ,分布在4个试验点的82个F2 家系10～11年生的生长、干形和分枝特性作了评价 ,据这些家系的表现 ,选出10个F1 代亲本 ,参加营建杂种种子园 ,以生产F2 代杂种种子。

加勒比松、湿地松苗期生长及叶绿素荧光特性

以加勒比松(Pinus caribaea)16个种源、湿地松(P.elliottii)4个种源2.5 a生营养袋苗木为材料,定期开展生长调查,于2016年7—8月、2017年2月开展叶绿素荧光参数的测定,分析加勒比松、湿地松针叶叶绿素荧光参数对树种、种源、不同测量时间的响应。结果表明,不同种源加勒比松/湿地松的株高、地径生长均存在显著差异(P<0.01);测量时间与树种对最大PSⅡ的光能转换效率(Fv/Fm)有显著影响(P<0.01),二者互作效应不显著,与7、8月相比,测量值均在第2年2月显著提高;两个树种的实际量子产量(ΦPSⅡ)、光化学淬灭(q P)与表观量子传递速率(ETR)对测量时间的响应模式相反;加勒比松与湿地松叶绿素荧光参数受种源影响不显著;相关性分析表明,加勒比松与湿地松的株高和地径生长与2月Fv/Fm、PSⅡ有效光化学效率(Fv′/Fm′)测量值呈一定的负相关关系;高光强抑制了湿地松、加勒比松的叶绿素荧光参数,但抑制效果与生长无明显相关关系;低温造成的胁迫主要抑制了加勒比松的光化学反应,并与其生长表现有一定的负相关关系。可考虑将2月份测量的叶绿素荧光参数作为加勒比松耐寒个体的筛选指标。

湿地松×洪都拉斯加勒比松生长性状遗传参数年度变化趋势及相关分析

利用种植于广东省台山市红岭种子园的2块湿地松(Pinus elliottii var.elliottii)×洪都拉斯加勒比松(P.caribaea var.hondurensis)杂种(简称湿加松EH杂种)测定林2~21 a间多个年度的生长性状观测数据,研究了树高、胸径、单株材积的遗传效应、早晚相关、及早期选择的最佳年龄,结果如下:(1)父本效应、母本效应、以及父母本的互作效应均对杂交子代的树高、胸径、单株材积生长有一定程度的影响,为获得优良的杂交组合,需要选育优良杂交亲本,并开展广泛的交配与测定;(2)树高、胸径、单株材积多个观测年度的单株狭义遗传力为0.157~0.762、家系平均遗传力为0.609~0.920,显示对湿加松EH杂种开展家系选择和单株选择是有效的;(3)早期的树高、胸径、单株材积与21 a或18 a生的单株材积间存在极显著的遗传相关,说明对生长性状开展早期选择是可行的,在考虑单位时间效益的前提下,单株选择和家系选择的最佳年龄分别是5~6 a和3~4 a;(4)针对测定林在生长中、后期保存率偏低的情况,讨论了遗传测定的适宜评价年龄。

湿地松、加勒比松育苗立地类型与基质种类选择研究

选用6种育苗基质在2种立地类型下开展湿地松(Pinus elliottii)、本种加勒比松(P.caribaea var.caribaea)、洪都拉斯加勒比松(P.caribaea var.hondurensis)育苗试验。结果表明:(1)立地类型显著影响3个树种/变种苗木保存率和苗木质量(P<0.05),光照和水分供应充足的平地苗圃适合培育湿地松苗木,排水和环境卫生良好的山坡地更有利于培育加勒比松苗木;(2)湿地松的最佳基质是:20%火烧土+30%阔叶林腐殖土+47%黄心土+3%过磷酸钙、20%泥炭土+30%阔叶林腐殖土+47%黄心土+3%过磷酸钙;本种加勒比松最佳基质是:30%火烧土+20%松林表土+47%黄心土+3%过磷酸钙、30%阔叶林腐殖土+20%松林表土+47%黄心土+3%过磷酸钙;洪都拉斯加勒比松的最佳基质是:20%松林表土+30%阔叶林腐殖土+47%黄心土+3%过磷酸钙。

湿地松×加勒比松F_2子代苗高生长规律

湿加松F2子代1年生实生苗的高生长节律可用Logistic曲线准确描述,苗高(Y)依生长天数(X)的生长模型Y=36.71/(1+53.93513e-0.02971X),其回归和相关均达极显著水平,决定系数r2=0.9930,据此将苗高年生长过程划分为生长前期、生长高峰期、生长后期.分析了5-11月苗高净生长量与主要气象因子的关系.

加勒比松和湿地松形态、密度与抗风能力分析

为了具体分析加勒比松和湿地松抗风能力,对遭受台风袭击的加勒比松和湿地松的树高、枝下高、胸径、冠幅和密度等进行测定,并对这些指标进行主成分分析。结果显示:形态和密度指标主成分分析导出的综合得分分值(F)与受损等级相关性极显著,表明可利用易测量的形态和密度指标,间接判断加勒比松和湿地松的抗风能力;6项指标对抗风能力的权重大小依次为:冠幅>密度3>枝下高>平均密度>胸径>树高,形态指标对抗风能力的权重大小依次为:枝下高>冠幅>胸径>树高;加勒比松和湿地松形态和密度指标的具体差异不大,但加勒比松的抗风能力远优于湿地松,可以推断抗风能力不受某几个重要指标的左右,而是多个指标共同作用的结果。

湿地松、加勒比松种质资源遗传多样性分析

应用SSR与SRAP分子标记技术分析22份湿地松和28份加勒比松种质资源（其中包括15份洪都拉斯加勒比松样品、9份古巴加勒比松样品、4份巴哈马加勒比松样品）的遗传多样性，结果表明，在SSR分析中，14对SSR引物产生的多态性比率为89％，平均每对引物获得多态性条带4．3条；SRAP分析中，12对SSR引物产生的多态性比率为72％，平均每对引物获得多态性条带2．8条；SSR和SRAP标记综合分析表明，参试材料遗传距离变化范围为0．075-0．633，种质资源间存在丰富的遗传多样性。

湿地松、加勒比松SRAP反应体系的优化及引物筛选

采用正交设计L9(34)对影响湿地松、加勒比松SRAP反应体系的DNA浓度、dNTPs浓度、引物用量、Taq DNA聚合酶浓度4个因素进行了优化试验,结果表明:扩增反应体系5优于其他体系,即25μL体系中含有DNA 40 ng、dNTPs 1 mmol/L、引物10μmol/L、DNA聚合酶1.0 U。在此基础上,通过单因素试验确定了湿地松、加勒比松SRAP反应关键因子的最适浓度,即25μL反应体系中含有DNA 40 ng、dNTPs 1 mmol/L、引物5μM及Taq DNA聚合酶1.0 U。利用优化反应体系从216对引物组合中筛选出扩增条带清晰、稳定、多态性好的引物42对。优化的SRAP反应体系将为湿地松、加勒比松种质资源遗传多样性评价、分子标记辅助选择、遗传连锁图谱构建研究提供基础。

湿地松、加勒比松改进的SSR-PCR实验方法

在开展分子标记辅助湿加松亲本选配研究过程中,为了获得较好的PCR扩增产物,尝试利用了三种不同的PCR实验方法。首先,利用梯度PCR确定不同微卫星引物的最优退火温度,再用降落PCR最大限度地扩增特异产物,最后,当有些反应在电泳中没有检测到产物时,尝试利用巢式PCR再重新扩增,但由于巢式PCR敏感性高,会把特异和非特异的产物放大很多倍,辨别特异谱带时要非常小心。

湿地松 加勒比松苗期矿质营养缺乏的病症

用水培法进行了湿地松、加勒比松苗期缺乏矿质营养元素培养试验.经过3个月的观察,描述了各矿质营养元素缺乏时幼苗的典型症状,同时分析了元素缺乏对苗木高生长及其生物量的影响,以及缺矿质营养元素对苗木体内各元素含量的影响.