溃结康调控PERK-elF2α-ATF4-CHOP信号通路干预内质网应激治疗溃疡性结肠炎的机制研究

目的:探讨溃结康(KJK)调控PERK-elF2α-ATF4-CHOP通路改善溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:C57BL/6小鼠分为空白组、模型组、阳性对照组、KJK(6.4 g/kg、12.8 g/kg)组,制备DSS诱导的UC小鼠模型,造模同时给予对应药物治疗7 d后处死小鼠,测量结肠长度;HE染色观察结肠病理损伤;western blot法检测PERK-elF2α-ATF4-CHOP信号通路蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠DAI评分、Geboes评分明显升高(P<0.001);结肠长度明显缩短(P<0.01);结肠组织中GRP78、CHOP、ATF4、p-PERK、p-elF2α蛋白表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,KJK 6.4 g/kg及12.8 g/kg组小鼠DAI评分及Geboes评分明显降低,结肠长度明显缩短(P<0.05,P<0.01);结肠组织中GRP78、CHOP、ATF4、p-PERK蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:KJK可抑制PERK-elF2α-ATF4-CHOP通路信号转导,改善UC小鼠症状。

溃结康对溃疡性结肠炎小鼠NLRP3炎性体基因表达及下游炎性因子影响

目的探讨溃结康对溃疡性结肠炎小鼠NLRP3炎性体及下游炎性因子的影响。方法建立葡聚糖硫酸钠诱导小鼠实验性溃疡性结肠炎(急性期、缓解期)模型,实验分为正常对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶组(0.45 g/kg)、溃结康(12.8、6.4、3.2 g/kg)组。第8天(急性期)及第21天(缓解期)实验结束时,采集结肠组织,量取各组小鼠结肠长度,HE染色观察小鼠结肠病理变化,免疫组化染色法检测结肠组织MPO表达,酶联免疫法检测结肠组织IL-18、IL-33含量变化,实时荧光定量PCR检测结肠NLRP3、ASC、Caspase-1mRNA表达。结果模型组单位结肠长度显著缩短,结肠组织损伤明显,MPO表达显著增加,结肠IL-18,IL-33水平明显升高,NLRP3、ASC、Caspase-1mRNA表达显著上调(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,急性期时,柳氮磺胺吡啶组及溃结康高剂量组单位结肠长度明显增加,MPO表达显著降低,IL-18释放减少,NLRP3及Caspase-1mRNA表达显著下调(P<0.05或P<0.01),同时,溃结康中剂量组IL-18水平也显著降低,NLRP3 mRNA显著下调(P<0.05);溃结康低剂量组Caspase-1mRNA表达明显降低(P<0.05)。缓解期时,柳氮磺胺吡啶组及溃结康高、中剂量组单位结肠长度均明显增加(P<0.05或P<0.01);溃结康高剂量组NLRP3及Caspase-1mRNA表达显著增加,溃结康中剂量组IL18、IL-33含量明显增加,ASC、Caspase-1mRNA表达明显上调,低剂量组IL-33含量也明显增加(P<0.05),NLRP3 mRNA表达上调(P<0.05或P<0.01)。结论溃结康可能通过调节UC小鼠发病不同时期(急性期、缓解期)NLRP3炎性体(NLRP3、ASC、Caspase-1)基因表达及下游炎症因子的释放抑制炎症反应,促进缓解期时结肠黏膜修复。

溃结康胶囊治疗溃疡性结肠炎的实验研究

为了探讨溃疡性结肠炎的发病机制和治疗机理,我们用免疫法制成大鼠溃疡性结肠炎实验模型,并用中药溃结康胶囊进行复健治疗,现将研究结果报告如下。材料和方法1 动物系河北医科大学实验动物中心提供的 Wistar 雄性大白鼠,共60只,体重150～180g。实验期间喂以定量配方饲料,自由饮水。2 药物溃结康胶囊(简称溃结康,由河北省中医药研究院制剂室提供,内含黄精、灵芝、忍冬藤、青黛、徐长卿、白花蛇舌草等,每10粒含生药5g)研细粉,用蒸馏水配制成浓度为15%、7.5%的混悬液。补脾益肠丸(广州陈李济药厂生产。

HPLC法同时测定溃结康微丸中芍药苷和黄芩苷的含量

目的:建立溃结康微丸中芍药苷和黄芩苷的 HPLC 含量测定方法。方法:采用 Kromasil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),0.2%磷酸溶液(A)和乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速:1.0 mL·min^(-1),检测波长:230 nm,柱温为25℃。结果:芍药苷在1.749～17.49μg·mL^(-1)(r=0.9996)、黄芩苷在13.33～133.3μg·mL^(-1)(r=0.9998)范围内呈良好的线性关系,平均回收率(n=6)分别为98.2%和97.4%,RSD 分别为1.5%和1.9%。结论:本法简便、快速、准确,可用于溃结康微丸中芍药苷和黄芩苷的同时测定。

溃结康胶囊的抗炎作用机制

目的:研究溃结康胶囊的抗炎作用及其可能的机制。方法:通过小鼠耳肿胀、大鼠角叉菜胶足跖肿胀、大鼠棉球肉芽肿等实验观察其抗炎作用,并测定小鼠足爪中前列腺素E2(PGE2)、丙二醛(MDA)的含量。结果:溃结康胶囊能明显抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀,角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀以及棉球肉芽肿的增生,并减少PGE2、MDA在炎症组织中的产生;对摘除肾上腺的小鼠亦可抑制二甲苯所致的耳肿胀。结论:溃结康胶囊具有一定的抗炎作用,其作用与抑制PGE2合成及脂质过氧化有关。

溃结康胶囊对TNBS诱导大鼠结肠炎治疗作用的研究

目的:探讨溃结康胶囊对TNBS诱导大鼠结肠炎的治疗作用。方法:制备TNBS结肠炎大鼠模型,实验设正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组(柳氮磺吡啶, 0. 50g/kg)、溃结康给药组( 0. 64, 0 .32, 0 .16g/kg),采用灌胃方式给药,给药时间从制备模型6d后开始,连续12天。实验结束后观察大鼠结肠粘膜损伤指数(CMDI)、粪便隐血(OB)、髓过氧化物酶(MPO)活性和粘膜病理组织学情况,并检测结肠组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH- Px)含量;胸腺、脾脏称重。结果:溃结康可减轻TNBS结肠炎大鼠的CMDI和OB程度,降低MPO水平,可改善结肠粘膜病理损伤;并可明显对抗胸腺萎缩和脾脏肿大;同时溃结康可明显降低MDA含量,增加SOD和GSH- Px水平。结论:溃结康对TNBS诱导的大鼠结肠炎有良好的治疗作用,其机理可能与抗炎、免疫调节和抗氧化损伤有关。

中药溃结康丸治疗急性期溃疡性结肠炎(脾虚湿蕴证)临床效果观察及对血清炎症因子影响研究

目的:通过中药溃结康丸治疗急性期脾虚湿蕴型溃疡性结肠炎,观察临床治疗效果并从血清炎症因子角度探究治疗机制。方法:收集于2015年9月—2017年12月期间在辽宁中医药大学附属第二医院脾胃病科就诊的急性期脾虚湿蕴型溃疡性结肠炎病例患者80例,根据患者病历号采用随机数表法将所有患者随机分成西药对照组和中药治疗组,每组患者40例。西药对照组患者予以常规西药美沙拉嗪缓释片口服治疗,1 g/次,4次/d;中药治疗组在对照组治疗基础上予以院内制剂溃结康丸口服,1袋/次,3次/d。治疗30 d。观察比较两组患者的临床治疗总有效率、中医症状积分、焦虑抑郁评分量表评分、IBDQ生活质量评分量表评分,血清TNF-α、IFN-γ、IL-8、IL-17等炎症因子水平。结果:治疗30 d后,中药治疗组临床治疗总有效率、各项中医症状评分、焦虑抑郁评分、IBDQ生活质量评分改善效果优于西药对照组(P<0.05);中药治疗组患者血清TNF-α、IFN-γ、IL-8、IL-17等炎症因子水平改善明显优于对照组(P<0.05)。结论:中药溃结康丸联合西药治疗能够起到协同治疗作用,提高临床治疗效果,改善患者中医症状、调节患者心理状态、提高患者生活质量。中药溃结康丸治疗溃疡性结肠炎能够通过调节患者血清TNF-α、IFN-γ、IL-8、IL-17等炎症因子起到治疗作用。

溃结康肠溶片的制备及体外释放度考察

目的:制备用于治疗溃疡性结肠炎的pH依赖-时间双重控制型结肠定位释药片,并建立其体外释放度检查方法。方法:以葛根素和盐酸小檗碱体外释放度为指标,对制剂的包衣处方进行筛选,采用体外释放度测定法考察该制剂的体外释放性能。结果:该制备工艺得到的片剂体外释放测定结果表明:在人工胃液中2 h时溶出度未检出葛根素和盐酸小檗碱,在人工小肠液4 h时两指标累计释放率均低于10%,而在人工结肠液1 h时葛根素和盐酸小檗碱累积溶出90.07%和89.87%。结论:制备得到pH依赖-时间双重控制型结肠定位释药片具有比较好的结肠定位释药目的。

溃结康保留灌肠治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎(湿热瘀阻证)的临床研究

目的:评价溃结康治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎(湿热瘀阻证)的有效性和安全性。方法:采用随机双盲双模拟平行对照的方法,选择门诊治疗的慢性非特异性溃疡性结肠炎(湿热瘀阻证)患者120例,随机分为2组,接受溃结康或柳氮磺吡啶肠溶片治疗,疗程8周。结果:治疗后,溃结康组在显效率上明显优于柳氮磺吡啶肠溶片组,在完全缓解率、好转率及无效率上两组无显著性差异。两组药物不良反应发生率分别为1.6%、28.8%。结论:溃结康保留灌肠能有效治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎(湿热瘀阻证),安全性上优于柳氮磺吡啶肠溶片。

溃结康片的研制

目的研制用于结肠靶向给药的溃结康片。方法以果胶为载体,采用单因素考察和均匀设计优选溃结康片芯的最佳处方。用Eudragit R-Eudragit S(1∶1)混合膜材包衣,考察包衣增重对骨架片芯释药的影响。以芍药苷和黄芩苷体外释放度为指标,评价释药性能。结果溃结康片的骨架材料组成为:果胶30%,HPMC K4M14%,硬脂酸16%。衣膜增重12%。该包衣骨架片经历0.1 mol.L-1HCl 2 h,PBS6.8 2 h基本不释药,变换介质为PBS7.5中释放1 h后,芍药苷和黄芩苷的累积释放度均小于20%,再置PBS 6.0果胶酶溶液中4 h,9 h累积释药80%以上。而转入不含酶的PBS 6.0者,9 h两成分的累积释放度均小于50%。结论研制的溃结康片具有结肠酶解释药特点。

溃结康保留灌肠治疗慢性非特异性溃疡性结肠炎临床研究

慢性非特异性溃疡性结肠炎（UC）是常见的结直肠炎性病，迁延难愈，其中中医分型属湿热瘀阻证的患者最为多见。目前报道治疗UC的中西方药较多，但获得国家食品药品监督管理局批准治疗UC的有效且安全的药品尚缺乏。为此，本研究与临床常用的柳氮磺吡啶肠溶片比较，评估中药溃结康保留灌肠治疗UC湿热瘀阻证的有效性和安全性。

溃结康胶囊质量标准研究

溃结康胶囊是由白术、吴茱萸、补骨脂、茯苓、山药、肉豆蔻等10味药组成的复方制剂,具有益气健脾、涩肠止泻的功效。本文采用薄层层析法对其中的吴茱萸、补骨脂、肉豆蔻、炙甘草进行了定性鉴别,采用单波长薄层扫描法对其中的异补骨脂素进行了含量测定,可作为该制剂的质量控制指标。

溃结康微丸的制备和体外溶出度考察

目的:制备溃结康微丸并进行处方优化,考察微丸的体外溶出度。方法:用挤出滚圆造粒机制备溃结康微丸,优化制剂处方组成;采用高效液相色谱法以黄芩苷和芍药苷为指标,对其体外溶出度进行考察。结果:制得微丸圆整度好,大小均匀,收率在75%以上。黄芩苷和芍药苷的溶出度45min内均达80%以上。结论:本法研制的溃结康微丸,处方合理,工艺可行。

溃结康胶囊治疗溃疡性结肠炎128例临床观察

目的探讨溃结康胶囊治疗溃疡性结肠炎的临床疗效。方法选取我院就诊的溃疡性结肠炎患者共128例,随机分为观察组和对照组,每组各64例,对照组患者入院之后给予SASP常规治疗;观察组患者使用溃结康胶囊进行治疗。结果观察组总有效率为87.5%;对照组患者总有效率为57.8%,观察组患者治疗总有效率和痊愈率要明显高于对照组患者,组间治疗效果比较具有明显差异,P<0.05。结论临床上在治疗溃疡性结肠炎时,可以采用溃结康胶囊治疗,能有效改善患者治疗效果,提高预后质量,获得非常理想的治疗效果,值得在临床上大力推广。

复方溃结康灌肠液对葡聚糖硫酸钠诱导溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的保护作用

目的研究复方溃结康灌肠液对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导溃疡性结肠炎大鼠结肠黏膜的保护作用。方法将大鼠随机均等分为正常组、模型组、复方溃结康灌肠液低剂量组(787.5 mg/kg)、复方溃结康灌肠液中剂量组(1575 mg/kg)、复方溃结康灌肠液高剂量组(3150 mg/kg)、美沙拉嗪组(5 mL/kg),除正常组外,自由饮用4.5%DSS溶液7 d制备溃疡性结肠炎模型,各治疗组给予相应药物行灌肠干预,每日称取大鼠体质量,检测便潜血,评估疾病活动指数(DAI);干预结束后,处死大鼠,取结肠组织,观察大鼠病理损伤及进行结肠组织病理学(HS)评价,同时应用化学比色法来检测髓过氧化物酶(MPO)的活性。结果与正常组相比,DSS诱导的UC大鼠毛色、活动度、潜血、大便性状等一般情况较差,体质量下降明显,DAI指数最大,病理损伤明显,HS评分最重,MPO活性较正常组更高(P<0.01),经过7 d的干预后,各治疗组均有不同程度的好转,能够降低DAI指数和HS评分,下调MPO活性水平(P<0.01)。结论复方溃结康灌肠液对DSS诱导溃疡性结肠炎大鼠有较好的治疗作用,能够明显改善腹痛腹泻、脓血等临床症状,还能降低结肠炎症细胞的浸润,保护结肠黏膜。

4种提取工艺制备溃结康栓对溃疡性结肠炎大鼠的治疗作用

目的研究4种提取工艺制备的溃结康栓对2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导溃疡性结肠炎(UC)大鼠的治疗作用。方法 SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、美沙拉秦栓组和4种提取工艺制备的溃结康栓组共7组,每组10只,用TNBS法复制UC大鼠模型,各给药组给予相应栓剂治疗,连续14 d。以各组实验大鼠疾病活动指数(DAI)、结肠黏膜损伤度、组织病理学改变、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-4(IL-4)等为指标,对其治疗疗效进行评价。结果模型组大鼠DAI评分、结肠黏膜损伤评分,血清中TNF-α、IL-1β及IL-4水平与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),美沙拉秦栓组、各工艺溃结康栓组DAI评分、结肠黏膜损伤评分显著降低,TNF-α、IL-1β及IL-4水平与模型组比较有统计学意义(P<0.05);美沙拉秦栓组与工艺Ⅰ溃结康栓组、工艺Ⅳ溃结康栓组DAI评分,TNF-α、IL-1β及IL-4水平比较无统计学意义。结论 4种提取工艺制备的溃结康栓均对TNBS诱导的UC模型大鼠有治疗作用,其中以提取工艺Ⅳ制备的溃结康栓疗效尤为显著,可为溃结康栓制剂研究提供工艺基础。

挤出滚圆法制备溃结康微丸及其性质

目的:应用挤出滚圆法制备溃结康微丸。方法:用挤出滚圆造粒机制备溃结康微丸,采用单因素考察优化工艺条件;并考察了微丸的粉体学性质和体外溶出度。结果:制得微丸圆整度好,大小匀匀,收率在80%以上。结论:用挤出滚圆造粒机制备溃结康微丸,工艺简便,制得的微丸质量好。