溃结灵IV号对溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜Claudin-2、ZO-1、ICAM-1、TLR2基因表达的影响

目的:观察溃结灵IV号保留灌肠对三硝基苯磺酸(TNBS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠黏膜claudin-2、ZO-1、ICAM-1、TLR2基因表达的影响,探讨其治疗UC的可能机制。方法:实验于2015年6~8月在哈尔滨工业大学生命科学与工程学院实验室进行。SD大鼠60只,留取10只作为空白对照(BC)组,其余大鼠利用TNBS溶液灌肠法诱导制作UC大鼠模型,造模后随机分为模型对照(MC)组,溃结灵IV号低剂量(LD)组、中剂量(MD)组、高剂量(HD)组和阳性对照组美沙拉嗓(PC)组。HD、MD、LD组分別采用溃结灵IV号高(40 g/kg)、中(20 g/kg)、低(10 g/kg) 3个剂量保留灌肠给药,PC组使用美沙拉嗪(0.4 g/kg)进行灌肠给药,BC组及MC组给等体积的蒸馏水,检测大鼠结肠黏膜claudin-2、ZO-1、ICAM-1、TLR2基因表达,观察溃结灵IV号保留灌肠对TNBS诱导的UC大鼠结肠组织的影响。结果:1) 闭合蛋白-2 (claudin-2),mRNA的表达:经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳后,在200 bp至250 bp位置可见电泳条带(Cldn2 244 bp)。结果表明溃结灵IV号高剂量、中剂量组及美沙拉嗪组claudin-2的mRNA表达明显增强,与空白组的表达接近,甚至略强于空白组的表达,模型组、溃结灵IV号高低剂量组claudin-2的mRNA略有的表达,表达不明显。2) 细胞粘附分子-1 (intercellular adhesion molecule, ICAM-1) mRNA的表达:经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳后,在200 bp至250 bp位置可见电泳条带(ICAM-1 211 bp)。结果表明正常组ICAM-1的mRNA表达不明,美沙拉嗪组ICAM-1的mRNA表达较正常组弱,溃结灵IV号高剂量、中剂量、低剂量及模型组ICAM-1的mRNA表达明显增强,明显高于空白组的表达。3) TLR2 (toll样受体2, Toll-like receptors 2) mRNA的表达:经PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳后,在200 bp至250 bp位置可见电泳条带(TLR2 246 bp)。结果表明正常组TLR2的mRNA表达较弱,美沙拉嗪组、溃结灵IV号高剂量、中剂量组TLR2的mRNA表达较模型组和溃结灵IV号低剂量组明显减弱,模型组和溃结灵IV号低剂量组TLR2的mRNA表达明显增强,明显高于正常组的表达。