微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白在皮肤屏障功能修复中的应用效果

目的探究微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白治疗因皮肤炎性衰老导致的皮肤屏障功能下降的有效性及安全性。方法选取2020年6月至2021年5月在本院接受面部皮肤治疗的30例患者作为研究对象,采用随机数字表法将其分为对照组(重组Ⅲ型人源化胶原蛋白)与治疗组(微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白),各15例。治疗后定期对患者进行随访,分别进行主观疗效评价及客观疗效评价。结果治疗后4、8、12周,治疗组的满意度显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,治疗组的皮肤皱纹、纹理、红区、毛孔、弹性、皮肤经皮失水及皮肤含水量改善明显(P<0.05);对照组治疗后油脂改善明显(P<0.05)。治疗后12周,治疗组的总症状评分显著低于对照组(P<0.05)。结论微针导入重组Ⅲ型人源化胶原蛋白对皮肤修复有较好的疗效,可增强皮肤屏障功能,为改善皮肤屏障功能、治疗因皮肤屏障受损引起的炎性衰老提供了新选择。

跟网型和构网型逆变器的阻抗无源化方法综述

相比传统同步机主导的电力系统,由并网逆变器所主导的新能源并网发电系统动态特性发生了根本性变化。近年,国内外报道了多次新能源并网发电系统振荡事件,振荡现象具有宽频域特征,动态行为具有非线性、时变性和复杂性。并网逆变器的端口阻抗无源性是保证并网发电系统稳定的充分条件,适用于复杂电网下的稳定性优化。文中针对跟网型和构网型逆变器,分别从控制器优化设计、串并联虚拟阻抗和其他无源化方法这三个方面,对两类逆变器的中高频阻抗无源化改善方法进行了总结和梳理,最后探讨了当前研究的不足与现存的挑战。

人源化六基因编辑猪红细胞治疗恒河猴急性失血性休克的疗效观察

背景临床上血液制品短缺是一项世界难题,猪红细胞与人类红细胞有诸多相似之处,有望解决这一难题。目的将人源化基因编辑猪(GTKO/β4GalNT2KO/CMAHKO/hCD55/hCD46/hTBM)的红细胞输注至非人灵长类动物恒河猴体内,探讨异种输血的可能性。方法采用盐水介质交叉配血法,检测六基因编辑猪红细胞(6GE-pRBC)与恒河猴的血液凝集情况。通过IgG、IgM结合实验和补体介导的细胞毒性实验验证异种输血安全性,从恒河猴体内抽取25%血容量血液后输注等量的异硫氰酸荧光素标记6GE-pRBC,通过流式细胞分析术监测在其体内的存活状态,并定期采集受体血液样本验证异种输血的有效性,观察6GE-pRBC输注治疗失血性休克恒河猴的可能性。结果6GE-pRBC与恒河猴主次侧交叉配血试验均为阴性;其基因表型鉴定符合预期结果;恒河猴血清与6GE-pRBC的IgG、IgM结合实验结果显示IgG(3.35%)、IgM(4.13%)表达量较低;6GE-pRBC的补体介导细胞毒作用(CDC)显著低于野生猪红细胞(P<0.0001)。输血后60 h 6GEpRBC在恒河猴体内仍存活;血细胞比容失血后为28.6%,60 h升高至35%;血红蛋白含量失血后为92 g/L,60 h升高至116 g/L并维持于失血前正常水平。结论6-GE-pRBC输注给恒河猴在一定时间内能有效地纠正恒河猴休克症状,且未发现免疫排斥反应。随着基因编辑技术不断创新,基因编辑猪红细胞有望替代人红细胞治疗人类急性失血性休克。

人源化肝嵌合小鼠模型的研究进展与展望

在人体药物代谢研究和肝病造模及药物筛选研究中,主要依赖于细胞培养做体外验证,实验动物模型做体内分析。然而离体环境下细胞状态不稳定;实验动物与人类之间存在种属差异,使得2种模型在预测体内药物代谢情况以及模拟人体肝病特征方面存在一定局限性。而人源化肝嵌合小鼠模型通过移植人肝细胞入活体小鼠的肝脏中并扩增,使其能发挥与人类肝脏相似的特异性功能。这一功能满足了多种研究需求,包括小鼠体内肝炎病毒的复制、肝脏代谢疾病的模拟、肝细胞靶点治疗药物的筛选,以及药物肝毒性评价等。因此,人源化肝嵌合小鼠是候选药物临床前药效验证和安全性评估的理想模型之一。本文针对三类代表性人源化肝嵌合小鼠模型,对其分类、构建原理、受限因素以及应用现状进行总结与展望,以期为人源化肝嵌合小鼠模型的选用提供一定参考。

治疗性抗体人源度评价与人源化的计算方法研究进展

治疗性抗体已成为全球生物制药行业不可或缺的组成部分。如何从海量非人源抗体中选择出或者基于非人源的先导抗体设计出人源化程度高的抗体从而降低其免疫原性,这一问题已成为当今抗体药物开发领域的研究热点之一,相应的经验、实验及计算方法统称为抗体人源化技术。已有研究证明,在保持抗体特异性、亲和力和稳定性等特征的前提下,提高抗体人源度能够有效降低其免疫原性。抗体人源化相关计算方法主要涉及人源化抗体的设计、抗体人源度的计算与评价等。当前,许多计算工具已被证实为抗体人源化和人源度评价的有效工具。该文系统性概述了抗体人源化的理论依据以及基于此开发出的计算方法的发展历程,并讨论了相关计算方法研究的最新进展。

抗幽门螺杆菌UreB重组全人源化单域抗体的基因工程表达及分子改造

为了构建针对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)脲酶的单域抗体的基因工程表达系统。首先利用Pymol、ITASSER和ClussPro2等AI辅助工具分析比较了不同抗体与Hp脲酶亚单位B(UreB)之间的分子间作用力,确定了VL全人源化单域抗体UreBAb作为重点研究对象。根据大肠埃希菌密码子偏好性优化了UreBAb基因序列,并将其分别插入pET28a、pE-SUMO等表达载体,转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)获得了重组表达菌株,通过IPTG诱导制备重组抗体蛋白,并利用提取的Hp脲酶作为抗原,分析验证了重组表达抗体的活性。SDS-PAGE检测结果显示UreBAb和SUMO-UreBAb均获得了正确的表达,纯化后的蛋白产率分别为0.34和0.41 mg/mL。单向免疫扩散实验结果证实这两种重组表达抗体均与Hp UreB抗原具有良好的亲和力,对脲酶的抑制率分别为51.27%和74.07%。进而,结合AlphaFold2、cluspro2、mCSM-AB、OSPREY和FoldX等人工智能工具,评估分析了影响抗原-抗体复合物稳定性的关键位点及其突变策略,随后进一步构建了9个UreBAb进化突变体表达菌株,活性分析结果显示,这些突变体与抗原的结合活性均得到了提高,其中以I107W突变体的活性提升最为显著,相较于野生型UreBAb,提高了24.95%。本研究为Hp全人源化单域抗体的开发奠定了良好的基础。

重组Ⅰ型人源化胶原蛋白“福活因子”的生物合成及其结构表征研究

目的:筛选获得含胶原蛋白保守序列hCol.1基因的重组人源化Ⅰ型胶原蛋白高效表达基因工程菌和高产创新融合蛋白,并通过检测其理化特征验证表达产物。方法:将His6-SUMO-hCol.1重组基因大肠杆菌高密度发酵后经镍亲和层析和离子交换层析两步纯化浓缩获得重组蛋白,检测理化测试特征。结果:测序证明克隆基因与hCol.1序列高度一致,Blast比对蛋白序列与人Ⅰ型胶原蛋白高度同源,折叠结构与人Ⅲ型胶原蛋白高度类似。表观分子量55~60kD,产量36.4mg/L,纯度>95%。等电点检测、氨基酸组成和圆二色谱等实验结合高级结构预测分析,证明其理化性状与蛋白结构符合胶原蛋白特征。结论:成功将人Ⅰ型胶原蛋白保守功能结构域hCol.1与SUMO等肽段重组融合表达并命名为福活因子(FHTFF),筛选出基因工程菌pET21a(+)-FHTFF/BL21,纯化产物“福活因子”的理化特性、序列和结构与人Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白肽段高度相似,属于重组人源化胶原蛋白新生物材料。

基于机器学习Rosetta的全人源化Spastin重组抗体的设计和验证

目的:基于机器学习软件Rosetta实现人源化Spastin重组抗体的设计、体外制备及验证。方法:使用Rosetta设计出针对人Spastin蛋白抗原表位的全人源化抗体,获得其抗体Fab段轻链及重链可变区的氨基酸序列,优化密码子后转化为核苷酸序列得到轻、重链的全长cDNA;随后将全人源化抗Spastin的轻、重链序列分别构建于重组表达载体;在293FT真核表达体系中表达并纯化该抗体;使用Western blot方法鉴定该抗体识别人Spastin重组蛋白信号的能力;通过Rosetta建模模拟抗体与抗原的结合及构象。结果:成功构建了全人源化Spastin重组抗体;该Spastin重组抗体能够在真核系统成功表达;构建的重组抗体轻、重链能够形成完整抗体,且能够特异性识别出人Spastin蛋白信号。结论:借助Rosetta软件成功设计了一种能够特异识别Spastin的重组全人源化抗体。

免疫系统人源化小鼠及其在肿瘤免疫治疗中的应用

肿瘤免疫治疗的有效性多借助于小鼠模型进行评价。但由于物种差异,传统小鼠模型不能完全模拟人体免疫应答的真实情况,导致大部分基于小鼠的研究成果不适用于人体。近年随着免疫缺陷小鼠的出现和品系改良,基于免疫缺陷小鼠构建的免疫系统人源化小鼠有望帮助研究者克服这一难题。本文就免疫缺陷小鼠模型和免疫系统人源化小鼠模型的最新研究进展和存在的问题以及免疫系统人源化小鼠在肿瘤免疫研究中的应用进行总结,为后续人源化小鼠模型的完善及其在肿瘤免疫治疗中的应用提供参考。

抗人Ⅰ型干扰素受体亚基1人源化单克隆抗体的制备和鉴定

Ⅰ型干扰素在系统性红斑狼疮(SLE)等自身免疫性疾病的发病机制中发挥重要作用,采用抗体阻断其信号转导通路具有潜在的治疗作用。本研究以人Ⅰ型干扰素受体亚基1(IFNAR1)重组蛋白为抗原免疫新西兰白兔,采用B细胞克隆技术筛选兔抗人IFNAR1单克隆抗体,经过人源化改造获得QX006N。体外研究结果显示,QX006N能特异性地结合人IFNAR1,亲和力约108 pmol/L,可阻断Ⅰ型干扰素信号通路及其介导的生物学效应。本研究为开发靶向干预Ⅰ型干扰素信号途径用于治疗SLE的抗体药物提供了坚实的基础。

17-DMAG对PD-1人源化小鼠肝癌移植瘤的抑制作用

目的 探讨17-二甲基胺乙基-17-去甲氧基格尔德霉素(17-DMAG)对PD-1人源化小鼠人肝癌移植肿瘤生长的抑制作用。方法 选取30只PD-1人源化小鼠,将HepG2细胞悬液注射于小鼠右侧腹股沟皮下组织,构建人肝癌移植瘤模型;将荷瘤人源化小鼠随机分为3组(每组10只):(1)模型组(注射生理盐水10 mg/kg);(2)17-DMAG组(按25 mg/kg腹腔注射17-DMAG,3次/周);(3)顺铂组(腹腔注射20 mg/kg, 2次/周),实验持续4周。注射结束后测量人源化小鼠移植瘤的长、短径计算体积,测量肿瘤质量计算抑瘤率,同时采用免疫组化方法检测肿瘤组织中CD31(以阳性细胞数计算肿瘤微血管密度(MVD))及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 17-DMAG组和顺铂组的肿瘤体积和质量均较模型组显著减小(P<0.05),17-DMAG组的抑瘤率略高于顺铂组,但17-DMAG组和顺铂组肿瘤质量和体积以及抑瘤率均不存在显著性差异。17-DMAG组和顺铂组MVD标记微血管数量及VEGF表达均低于模型组(P<0.05),且17-DMAG组又低于顺铂组(P<0.05)。结论 17-DMAG可显著降低肝癌移植瘤中VEGF的表达,抑制新生血管在肿瘤中发生发展,从而对人源化小鼠肝癌移植瘤发挥抑制作用。

重组人源化胶原蛋白与护肤原料

胶原蛋白作为人体内含量最多且最重要的蛋白,功能性凸显,应用领域广泛。近两年来,重组人源化胶原蛋白逐渐在胶原蛋白护肤市场显露锋芒。为了更好的研发新的护肤原料,从生物合成的角度出发围绕重组人源化胶原蛋白近十年来的研究进展,讨论有关重组人源化胶原蛋白的原料研发及功效、美肤品应用的相关内容。

基于公共信息资源的p185抗体人源化设计

通过计算机辅助分子设计的手段 ,综合序列分析和结构分析的结果对抗体的结构完成了计算机模拟 ,并对其进行了人源化的模建和改造 ,从而建立了一套快速可行的抗体人源化设计方案 .对一株抗p1 85neu/Her 2 单克隆抗体进行了克隆测序 ,并采用此方案进行了人源化设计 .此设计方案完全使用可公共访问的生物信息学工具和数据库 ,具有良好的实用性和推广价值 .

内外部知识源化、非研发对创新绩效影响的空间计量研究——以高技术产业为例

封闭式创新向开放式创新转型过程中,正确选择技术创新路径对创新转型至关重要。在考察高技术产业开展内、外部知识源化和非研发创新路径发展特征的基础上,运用空间计量经济学方法,探讨2008-2014年高技术产业内外部知识源化、非研发和创新绩效的空间相关性及分布结构,并将地理空间因素纳入多种创新路径驱动创新绩效机理框架下进行比较分析,实证考察其对创新绩效的影响机理。结果表明,高技术产业外部知识源化与非研发投入所占比重远远小于内部知识源化,技术创新路径非均衡性发展特点显著;高技术产业内外部知识源化、非研发与创新绩效存在较为显著的空间自相关性,内外部知识源化、非研发与创新绩效一定程度上呈现为相似值在空间上趋于集聚的分化态势,相邻地区空间溢出效应显著;高技术产业外部知识源化对创新绩效起到显著正向促进作用,而现阶段内部知识源化和非研发规模对创新绩效分别呈现微弱的正向和负向影响,没有充分发挥促进效应。

换流站机械式直流断路器的无源化改造方法

针对机械式有源型直流断路器存在控制保护逻辑执行过程复杂、器件维护成本高的问题,提出一种换流站机械式直流断路器无源化改造方法,简化控制保护系统中与直流断路器相关的逻辑,取消辅助隔离开关和充电装置,不需要搭建电感器,由转移回路导线上的杂散电感提供所需的电感值,按照无源系统设计对电容器进行升级改造,不仅缩短了开关电流转化时间,减少了避雷器转换能量,同时提高了电容器的使用寿命,降低了直流断路器的故障率。最后,利用MATLAB/Simulink搭建了直流系统仿真平台,仿真结果与理论分析一致,进一步验证了所提直流断路器无源化改造方法的正确性和有效性。

新型生物医用材料A型重组Ⅲ型人源化胶原蛋白

胶原蛋白是人体重要的细胞外基质成分,具有着特殊的“三螺旋”结构,既是结构蛋白又是功能蛋白,也是 重要的生物医用材料。目前市场主流的胶原蛋白主要是通过动物组织提取获得,无法避免种属差异带来的免疫原 性及动物病原体风险,同时,低丰度胶原蛋白无法通过动物组织提取获得。利用合成生物制备重组胶原蛋白是胶 原蛋白产业发展趋势,尤其是通过功能区策略制备的重组人源化胶原蛋白,不仅能够避免免疫原性,还可保障胶原 良好的生物相容性与活性。本文重点介绍山西锦波生物医药股份有限公司 A 型重组Ⅲ型人源化胶原蛋白新材料 的研发历程,同时分析其可能的创新应用场景。首先,通过高通量筛选获得具有 164. 88°特殊三螺旋结构的人Ⅲ型 胶原蛋白核心功能区。随后对该功能区进行 16 次线性重复,获得 A 型重组Ⅲ型人源化胶原蛋白,其氨基酸序列中 无任何外源非人胶原蛋白序列。经多种方法检测,其具有三螺旋结构,与细胞互作时不进入细胞,通过改善细胞外 基质,有效发挥修复再生功效,有望在皮肤损伤修复、妇科、心血管科、骨科、口腔科等领域发挥重要作用。目前,其 在重组胶原注射领域占据主要市场地位,突破 40 年仅有动物胶原注射的时代。

重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶在老年萎缩性阴道炎患者中的效果观察

研究对老年萎缩性阴道炎患者采取重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗后的效果。方法 摘取我院皮肤科收治的老年萎缩性阴道炎患者60例进行研究,摘取时间范围2022年11月至2023年5月,以电脑随机数字表法将摘取的患者分成参考组和凝胶组,两组均有患者30例,参考组患者采取局部抗炎治疗。凝胶组在参考组的基础上实施重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗,将两组的治疗效果、阴道pH值、阴道症状和体征评分相比较。结果 ①就治疗效果而言,参考组稍差,凝胶组更高,差异体现统计学差异(P<0.05)。②对比患者阴道pH值可知参考组更差,组间差异体现统计学(P<0.05)。③比较组间患者的体征以及相关症状,可知参考组更差,组间数据差异体现出统计学意义(P<0.05)。结论 老年萎缩性阴道炎患者采取重组Ⅲ型人源化胶原蛋白妇科凝胶治疗后,患者的阴道pH值、阴道症状和体征评分均明显改善,治疗效果比较明显,可在临床上加大力度推广。

重组人源化胶原蛋白鼻腔黏膜修复敷料联合地氯雷他定治疗过敏性鼻炎的效果分析

目的探讨过敏性鼻炎患者接受重组人源化胶原蛋白鼻腔黏膜修复敷料联合地氯雷他定治疗的效果,并分析其对患者生活质量的影响。方法选取2022年1月至2024年1月东莞康华医院收治的126例过敏性鼻炎患者为研究对象,按照随机数字表法分为常规组与联合组,各63例。给予常规组患者生理盐水喷鼻联合地氯雷他定治疗,给予联合组患者重组人源化胶原蛋白鼻腔黏膜修复敷料联合地氯雷他定治疗。比较两组患者疗效、炎症因子水平与鼻炎相关生活质量问卷(RQLQ)评分。结果联合组患者整体疗效优于常规组,总有效率高于常规组(均P<0.05)。治疗后,两组患者白细胞介素(IL)-4、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)均低于治疗前,且联合组均低于常规组(均P<0.05)。治疗后,两组患者RQLQ各维度评分均低于治疗前,且联合组均低于常规组(均P<0.05)。结论重组人源化胶原蛋白鼻腔黏膜修复敷料联合地氯雷他定治疗过敏性鼻炎患者的效果较好,可降低炎症因子水平,提高患者生活质量。

重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料在激光术后创面修复中的疗效观察

分析重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料在激光术后创面修复中的疗效。方法 选取我院在2022年6月~2023年8月期间实施激光术治疗的78例患者,随机分为两组,即对照组和实验组。对照组仅接受激光术治疗、实验组在激光术治疗后外用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料,对其应用情况进行比较分析。结果 实验组治疗总有效率和对照组相比较高(P <0.05);干预后的面部症状评分低于对照组(P <0.05);创面愈合时间短于对照组(P <0.05)。结论 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白修护凝胶敷料对激光术后创面修复的效果较好,能减轻患者的不适症状,促进其创面更快愈合,患者的认可度较高,所以值得应用。

人源化小鼠模型构建和应用的研究进展

人源化小鼠是指带有功能性的人类基因、细胞或组织的小鼠模型,通常被用于人类疾病体内研究的活体替代模型,是利用转基因或同源重组的方法将人类基因"放置"在小鼠模型上所制备的模型,这类小鼠模型在模拟某些人类疾病时有效性较高。人源化小鼠模型在艾滋病、癌症、传染病和血液病研究领域等均有广泛的应用。具有人造血免疫系统组成的人源化小鼠模型已经被证明在解码人类疾病奥秘中具有巨大的优势和广泛的应用前景。本文从免疫系统人源化小鼠模型演变的历史过程、具体的分类方法及模型的应用等几个方面进行综述。