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化瘀祛痰方药对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1、CD36表达的影响 被引量:18
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作者 贾连群 杨关林 +5 位作者 赵钢 李学涛 张哲 张会永 杜莹 曹媛 《辽宁中医杂志》 CAS 2013年第2期234-237,共4页
目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。方法:体外培养THP-1细胞,佛波酯(PMA)使之巨噬化,氧化型低密度脂... 目的:观察化瘀祛痰方药及其拆方对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、CD36表达的影响,探讨该方药的作用机制,并比较方药全方及各拆方的疗效及调控作用。方法:体外培养THP-1细胞,佛波酯(PMA)使之巨噬化,氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)使巨噬细胞泡沫化。细胞随机分为空白对照组、模型组、补气组、化瘀组、祛痰组和全方组。油红O染色观察细胞浆脂滴变化,酶法测定细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)、胆固醇酯(CE)的含量,并计算CE/TC值。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)定量分析ABCA1、CD36 mRNA水平。结果:模型组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著高于对照组(P<0.01);与模型组相比,全方组和祛痰组细胞TC、FC、CE含量及CE/TC值均显著降低。RT-PCR结果提示模型组细胞ABCA1、CD36 mRNA水平显著升高;而化瘀祛痰方药及祛痰拆方含药血清可显著升高ABCA1 mRNA,显著降低CD36 mRNA水平。结论:化瘀祛痰方药及祛痰方可抑制ox-LDL诱导的THP-1细胞泡沫化,该作用可能与其上调ABCA1基因、下调CD36基因表达,从而减弱THP-1细胞对ox-LDL摄取有关。 展开更多
关键词 化瘀祛痰复方 动脉粥样硬化 THP一1源性泡沫细胞 腺苷三磷酸结合盒转运体A1 胆固醇
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刺梨汁对巨噬细胞源性泡沫细胞形成的影响 被引量:10
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作者 张春妮 吉维民 +3 位作者 庄一义 陈大宁 刘小转 强红娟 《医学研究生学报》 CAS 2000年第6期366-368,共3页
目的 :探讨刺梨汁的抗动脉粥样硬化机制。 方法 :在刺梨汁参与下 ,氧化的极低密度脂蛋白 (Ox- VL DL)与小鼠腹腔巨噬细胞孵育一段时间 ,通过测定细胞胆固醇含量和观察细胞形态改变 ,分析刺梨汁对 Ox- VL DL 促泡沫细胞形成的影响。 结... 目的 :探讨刺梨汁的抗动脉粥样硬化机制。 方法 :在刺梨汁参与下 ,氧化的极低密度脂蛋白 (Ox- VL DL)与小鼠腹腔巨噬细胞孵育一段时间 ,通过测定细胞胆固醇含量和观察细胞形态改变 ,分析刺梨汁对 Ox- VL DL 促泡沫细胞形成的影响。 结果 :较低浓度的刺梨汁能明显抑制 Ox- VL DL 对小鼠腹腔巨噬细胞胆固醇酯的堆积 (P<0 .0 0 1) ,并呈浓度依赖性。刺梨汁浓度为 2 μl/m l和 4μl/ml时 ,Ox- VL DL 堆积的细胞胆固醇酯含量分别被抑制了 5 9.8%和 90 .1%。形态学观察显示 ,经刺梨汁处理的巨噬细胞猩红阳性染色显著减少。 结论 :刺梨汁通过抑制Ox- VL DL 的促泡沫细胞形成来实现其抗动脉硬化的功能。 展开更多
关键词 刺梨汁 极低密度脂蛋白 氧化修饰 巨噬细胞源性泡沫细胞 动脉粥样硬化
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松龄血脉康对THP-1源性泡沫细胞ABCA1蛋白表达及细胞内胆固醇含量的影响 被引量:5
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作者 苟连平 吕湛 +2 位作者 王玉兵 李卫东 胡龙江 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期2037-2038,共2页
目的观察松龄血脉康对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达及细胞内胆固醇含量的影响及其防治动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法培养THP-1细胞,160 nmol/L佛波脂(PAM)使之巨噬化,用50 mg/L氧化型低密度脂蛋白使... 目的观察松龄血脉康对THP-1源性泡沫细胞腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白表达及细胞内胆固醇含量的影响及其防治动脉粥样硬化(AS)的可能机制。方法培养THP-1细胞,160 nmol/L佛波脂(PAM)使之巨噬化,用50 mg/L氧化型低密度脂蛋白使巨噬细胞形成泡沫细胞。0.81 mg/L松龄血脉康、10μmol/L罗格列酮分别和泡沫细胞孵育6、12、24 h;0.40、0.81、1.6 mg/L的松龄血脉康、1、10、20μmol/L的罗格列酮与泡沫细胞孵育24 h。用流式细胞技术检测ABCA1蛋白表达的水平,并测定各组细胞内胆固醇含量。结果松龄血脉康组、罗格列酮组均增加ABCA1蛋白的表达,而细胞内胆固醇含量减少,与对照组相比,均有显著性差异(P<0.05),且有浓度、时间依赖性。松龄血脉康组与罗格列酮组无显著性差异(P>0.05)。结论松龄血脉康具有与罗格列酮增加ABCA1蛋白及降低胆固醇含量相似的作用。增加ABCA1蛋白表达,降低细胞内胆固醇含量可能是中药松龄血脉康抗AS的机制之一。 展开更多
关键词 松龄血脉康 THP-1源性泡沫细胞 腺苷三磷酸结合盒转运体A1 胆固醇
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巨噬细胞源性泡沫细胞适配子PM1的特异性 被引量:5
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作者 严鹏科 汪江波 +2 位作者 张慧 段才闻 李世煌 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期405-408,共4页
目的研究特异性寡核苷酸适配子PM1与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变结合的特异性,为动脉粥样硬化的体内靶向治疗提供实验依据。方法对适配子PM1进行FITC标记,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞、... 目的研究特异性寡核苷酸适配子PM1与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变结合的特异性,为动脉粥样硬化的体内靶向治疗提供实验依据。方法对适配子PM1进行FITC标记,荧光显微镜分别观察适配子与血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞、巨噬细胞源性泡沫细胞结合情况。采用高脂方法建立兔动脉粥样硬化模型,利用PCR方法和荧光显微镜观察适配子与动脉粥样硬化病变结合情况。结果适配子PM1与巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变组织高度特异性结合,但不结合血管平滑肌细胞、巨噬细胞、内皮细胞和正常动脉组织。结论筛选出的适配子PM1能特异性结合巨噬细胞源性泡沫细胞和动脉粥样硬化病变。 展开更多
关键词 适配子 巨噬细胞源性泡沫细胞 动脉粥样硬化病变
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脂欣康胶囊对血管平滑肌细胞源性泡沫细胞CD36表达的影响 被引量:4
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作者 朱莹 张文高 +1 位作者 郑广娟 姜浩 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2007年第7期481-483,共3页
目的探讨脂欣康胶囊对动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的可能调控机制,观察脂欣康胶囊及洛伐他汀干预大鼠血管平滑肌细胞源性泡沫细胞CD36mRNA表达的变化。方法用组织贴块培养法培养血管平滑肌细胞,以氧化型低密度脂蛋白使其泡沫化,并以脂... 目的探讨脂欣康胶囊对动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的可能调控机制,观察脂欣康胶囊及洛伐他汀干预大鼠血管平滑肌细胞源性泡沫细胞CD36mRNA表达的变化。方法用组织贴块培养法培养血管平滑肌细胞,以氧化型低密度脂蛋白使其泡沫化,并以脂欣康胶囊和洛伐他汀分别干预。采用流式细胞仪和原位杂交技术观察CD36mRNA表达的变化。结果与生理盐水组和空白对照组相比,脂欣康胶囊与洛伐他汀均能降低CD36mRNA的表达(P<0.01),且脂欣康组较洛伐他汀组下降更显著(P<0.05)。结论脂欣康与洛伐他汀均能抑制CD36的表达,并且其作用优于洛伐他汀。其作用机制可能为脂欣康的益气活血、解毒化浊之功使平滑肌细胞内蕴藏的痰浊瘀毒得以疏布排泄于外。这可能是其抑制血管平滑肌细胞增殖和泡沫化细胞形成的机制之一。 展开更多
关键词 内科学 脂欣康胶囊 血管平滑肌细胞源性泡沫细胞 CD36 流式细胞 原位杂交
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肥大细胞改变THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇含量及抑制胆固醇流出 被引量:3
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作者 赵战芝 杨永宗 +1 位作者 王佐 危当恒 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1457-1463,共7页
目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,探讨肥大细胞(MC)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量、分配和流出的影响及机制。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞在MC颗粒释放物存在或缺乏下与高密度脂蛋白3(HDL3)共育。高效液相... 目的:以THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,探讨肥大细胞(MC)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量、分配和流出的影响及机制。方法:THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞在MC颗粒释放物存在或缺乏下与高密度脂蛋白3(HDL3)共育。高效液相色谱检测泡沫细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和酯化胆固醇(EC)含量,用液体闪烁计数器检测细胞内胆固醇流出,运用逆转录聚合酶链反应检测三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)的mRNA水平,采用琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测HDL3及apoA-Ⅰ的降解。结果:MC组泡沫细胞内TC、FC明显高于对照组(TC对照组为527.3 mg/g,MC组为917.9 mg/g);EC/TC比值低于对照组(7.6%vs47.5%);细胞内胆固醇流出少于对照组(26.92%±2.6%vs40.98%±3.4%,P<0.05);而泡沫细胞ABCA1的mRNA水平与对照组无明显差异。MC颗粒释放物处理HDL3后,聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,约有28%的apoA-Ⅰ被降解,在分子量26 kD左右处出现了新的条带,产生了1个26 kD的小多肽。结论:肥大细胞可通过降解HDL3及apoA-Ⅰ抑制细胞内胆固醇流出而增加细胞内胆固醇蓄积,这个作用与ABCA1表达无直接关系。 展开更多
关键词 肥大细胞 THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇 脂蛋白类 HDL ATP结合匣式转运体
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脉心康对平滑肌细胞源性泡沫细胞过氧化体增殖物激活型受体γ与腺苷三磷酸结合盒转运体1 mRNA表达的影响 被引量:3
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作者 郑广娟 朱莹 +1 位作者 王婷 张文高 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期797-801,共5页
目的观察脉心康干预大鼠血管平滑肌细胞源性泡沫细胞中过氧化体增殖物激活型受体γ、腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)mRNA表达变化,以探讨脉心康对动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的可能调控机制。方法用组织块培养法培养大鼠血管平滑肌细... 目的观察脉心康干预大鼠血管平滑肌细胞源性泡沫细胞中过氧化体增殖物激活型受体γ、腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)mRNA表达变化,以探讨脉心康对动脉粥样硬化泡沫化细胞形成的可能调控机制。方法用组织块培养法培养大鼠血管平滑肌细胞,以氧化型低密度脂蛋白使其泡沫化,并以脉心康、罗格列酮分别干预。采用原位杂交技术观察过氧化体增殖物激活型受体γ、腺苷三磷酸结合盒转运体A1mRNA表达变化。结果脉心康与罗格列酮均能提高过氧化体增殖物激活型受体γ、腺苷三磷酸结合盒转运体A1mRNA表达,与生理盐水组、空白对照组相比,均有显著性差异(P<0.01),脉心康组优于罗格列酮组(P<0.01)。结论脉心康具有与罗格列酮相似的过氧化体增殖物激活型受体γ激动作用,且优于罗格列酮。其抗动脉粥样硬化作用的分子机制与过氧化体增殖物激活型受体γ调控途径有关,有望成为中医药领域中新的、特异性较高的过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂,为抗动脉粥样硬化和脂代谢异常提供更佳的药物选择。 展开更多
关键词 脉心康 血管平滑肌细胞源性泡沫细胞 过氧化体增殖物激活型受体Γ 腺苷三磷酸结合盒转运体A1 原位杂交
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脂欣康胶囊对大鼠血管平滑肌细胞源性泡沫细胞钙离子浓度的影响 被引量:4
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作者 朱莹 张文高 +1 位作者 郑广娟 姜浩 《中西医结合心脑血管病杂志》 2007年第2期123-124,共2页
目的观察脂欣康及洛伐他汀干预大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)源性泡沫细胞产生的细胞内钙离子([Ca2+]i)浓度变化,以探讨脂欣康对动脉粥样硬化(AS)泡沫化细胞形成的可能调控机制。方法用组织块培养法培养VSMC,以氧化低密度脂蛋白使其泡沫化,... 目的观察脂欣康及洛伐他汀干预大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)源性泡沫细胞产生的细胞内钙离子([Ca2+]i)浓度变化,以探讨脂欣康对动脉粥样硬化(AS)泡沫化细胞形成的可能调控机制。方法用组织块培养法培养VSMC,以氧化低密度脂蛋白使其泡沫化,并以脂欣康、洛伐他汀分别干预。以10μmol/L的Fluo-3孵育细胞后,用激光共聚焦显微镜扫描、记录图像,并作分析。结果脂欣康与洛伐他汀均能降低VSMC[Ca2+]i浓度,与生理盐水组、空白对照组相比,脂欣康组和洛伐他汀组均有统计学意义(P<0.01),但两组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂欣康具有与洛伐他汀相似的降低VSMC[Ca2+]i浓度的作用,这可能是其抑制VSMC增殖和泡沫化细胞形成的机制之一。 展开更多
关键词 脂欣康胶囊 洛伐他汀 血管平滑肌细胞源性泡沫细胞 细胞内钙离子浓度 激光共聚焦显微镜
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仙人掌多糖对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇蓄积及其相关基因表达的影响 被引量:3
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作者 李恒 罗齐军 +1 位作者 卢向阳 曾富华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期135-139,共5页
采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后... 采用PMA和ox–LDL构建THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,观察不同浓度(5、10、15 nmol/L)仙人掌多糖(ODP–Ia)对泡沫细胞内脂质、胆固醇蓄积以及介导胆固醇流出的ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达的影响。结果显示:THP–1巨噬细胞泡沫化后胞内蓄积了大量脂质,高剂量(15 nmol/L)ODP–Ia能够显著减少胞内脂质、胆固醇蓄积,并增强ABCA1、ABCG1、SR–BI m RNA及蛋白表达(与单独ox–LDL处理组比较,P<0.05),但效果均次于阳性对照依折麦布组(P<0.05),低、中剂量(5、10 nmol/L)ODP–Ia作用效果均不显著。本研究结果表明,ODP–Ia可通过增强ABCA1、ABCG1、SR–BI基因表达来减少胞内胆固醇蓄积。 展开更多
关键词 仙人掌多糖 THP–1巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇蓄积
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护心方对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞胆固醇流出及ABCA1表达的影响 被引量:3
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作者 曹海明 毛思颖 +1 位作者 陈仁华 江巍 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1298-1301,共4页
目的观察护心方对THP-1细胞源性泡沫细胞Apo AI介导的胆固醇流出及ABCA1表达的影响。方法 THP-1细胞诱导分化成巨噬细胞后,在ox-LDL刺激48 h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,以护心方含药血清作用24 h。采用液体闪烁计数法观察细胞内胆固醇... 目的观察护心方对THP-1细胞源性泡沫细胞Apo AI介导的胆固醇流出及ABCA1表达的影响。方法 THP-1细胞诱导分化成巨噬细胞后,在ox-LDL刺激48 h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,以护心方含药血清作用24 h。采用液体闪烁计数法观察细胞内胆固醇的流出,Western blot检测细胞ABCA1的蛋白表达水平,q PCR检测细胞ABCA1的mRNA表达水平。结果护心方含药血清可增加泡沫细胞胆固醇的流出且呈时间依赖性(P<0.05),同时能上调诱导后的泡沫细胞ABCA1蛋白水平(P<0.05),但对ABCA1 mRNA的表达水平无影响。结论护心方可通过提高泡沫细胞ABCA1蛋白表达水平,增加细胞内Apo AI介导的胆固醇流出,是其临床治疗动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 护心方 巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇逆向转运 ATP结合盒转运体A1
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血管紧张素-(1-7)通过AC-cAMP途径增加THP-1源性泡沫细胞ABCA1的表达并减少细胞胆固醇含量 被引量:3
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作者 阎丰 杨志明 刘娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期1012-1017,共6页
目的:构建THP-1源性泡沫细胞模型,探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]和腺苷酸环化酶抑制剂MDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白——ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达和胆固醇含量的影响。方法:将THP-1源性单核细胞诱导为巨噬细胞,... 目的:构建THP-1源性泡沫细胞模型,探讨血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]和腺苷酸环化酶抑制剂MDL对THP-1源性泡沫细胞胆固醇逆转运相关蛋白——ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达和胆固醇含量的影响。方法:将THP-1源性单核细胞诱导为巨噬细胞,加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)建立泡沫细胞模型。实验分为4组:正常泡沫细胞组、MDL组、Ang-(1-7)组和MDL+Ang-(1-7)组。处理24 h后,分别通过ELISA法、荧光定量PCR法和Western blotting检测各组细胞cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量,闪烁计数法检测各组细胞胆固醇流出率,高效液相色谱法检测各组细胞胆固醇含量。结果:(1)Ang-(1-7)组cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量较泡沫细胞组有明显升高(P<0.05),胆固醇流出率较泡沫细胞组明显增高(P<0.05),胆固醇含量较泡沫细胞组显著降低(P<0.05)。(2)MDL组cAMP表达水平、ABCA1 mRNA相对表达量和蛋白含量较泡沫细胞组有明显降低(P<0.05),胆固醇流出率较泡沫细胞组明显降低(P<0.05),胆固醇含量较泡沫细胞组增高(P<0.05)。(3)MDL+Ang-(1-7)组数值介于Ang-(1-7)组与泡沫细胞组之间。结论:(1)Ang-(1-7)能促进泡沫细胞ABCA1的表达增加,促进胆固醇外流,减少泡沫细胞胆固醇含量,逆转泡沫细胞的形成。(2)MDL可以抑制腺苷酸环化酶的活性,减少cAMP的生成,从而部分拮抗Ang-(1-7)的上述作用,但不能完全阻断Ang-(1-7)的作用。 展开更多
关键词 血管紧张素-(1-7) ATP结合盒转运子A1 THP-1源性泡沫细胞 环AMP
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脂联素对巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1及胆固醇含量的影响及机制 被引量:3
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作者 郭晓红 边云飞 +2 位作者 梁斌 白瑞 肖传实 《中国医药指南》 2014年第25期46-48,共3页
目的探讨脂联素对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1及胆固醇含量的影响及其可能的机制。方法体外培养RAW264.7细胞,加入20 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共同孵育48 h,将其诱导成泡沫细胞,加入不同浓度(0、1、5、10μg/mL)的脂联素干... 目的探讨脂联素对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1及胆固醇含量的影响及其可能的机制。方法体外培养RAW264.7细胞,加入20 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共同孵育48 h,将其诱导成泡沫细胞,加入不同浓度(0、1、5、10μg/mL)的脂联素干预24 h,RT-PCR测定ABCA1 mRNA的表达,高效液相色谱测定细胞内胆固醇含量。观察脂联素对泡沫细胞中ABCA1表达的影响。结果脂联素显著增加RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞ABCA1 mRNA的表达(P<0.05),并增加细胞内胆固醇含量,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论脂联素可以增加巨噬源性泡沫细胞ABCA1转录水平,促进胆固醇流出,延缓AS的发生发展。 展开更多
关键词 脂联素 巨噬细胞源性泡沫细胞 ABCA1 胆固醇含量
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脉心康对血管平滑肌细胞源性泡沫细胞脂质化的影响 被引量:1
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作者 郑广娟 张文高 +2 位作者 张增敏 朱莹 姜浩 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2007年第7期550-550,共1页
关键词 内科学 脉心康 血管平滑肌细胞源性泡沫细胞 过氧化体增殖物激活型受体Γ 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 原位杂交
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Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子的初步研究 被引量:4
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作者 汪江波 李艳红 严鹏科 《中国医药科学》 2012年第24期25-28,共4页
目的利用Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子。方法通过80mg/L氧化性低密度脂蛋白诱导THP-1巨噬细胞为泡沫细胞;聚合酶链反应扩增文库;生物素-链霉亲和素磁珠分离法构建单链DNA文库;以巨噬细胞源性泡沫细胞为靶细胞,巨噬细... 目的利用Cell SELEX技术筛选巨噬细胞源性泡沫细胞适配子。方法通过80mg/L氧化性低密度脂蛋白诱导THP-1巨噬细胞为泡沫细胞;聚合酶链反应扩增文库;生物素-链霉亲和素磁珠分离法构建单链DNA文库;以巨噬细胞源性泡沫细胞为靶细胞,巨噬细胞和血管平滑肌细胞为反筛细胞,利用Cell SELEX技术筛选与巨噬细胞源性泡沫细胞结合的寡核苷酸序列,并对最后一轮筛选结果进行克隆测序。结果 PCR的退火温度对PCR产物的量有显著的影响,退火温度由65℃提高为72℃时的产物量明显增加。利用生物素-链霉亲和素磁珠分离法获得了纯度高、产量大的ssDNA文库;经过18轮筛选后,成功获得了28个与预期大小相同的ssDNA序列。结论利用Cell SELEX技术筛选出了巨噬细胞源性泡沫细胞的适配子,为研发用于动脉粥样硬化的早期无创诊断试剂和靶向治疗药物奠定了基础。 展开更多
关键词 CELL SELEX技术 巨噬细胞源性泡沫细胞 适配子 随机ssDNA文库
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巨噬细胞源性与肌源性泡沫细胞的不同特性研究 被引量:6
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作者 谭健苗 杨永宗 +2 位作者 袁中华 任为 刘兵 《广州医学院学报》 2001年第2期25-29,33,共6页
目的:动脉粥样硬化损伤中的泡沫细胞来源于巨噬细胞和平滑肌细胞,本实验在离体细胞培养的基础上探讨了两种来源泡沫细胞的不同特性。方法与结果:选择C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞与猪主动脉平滑肌细胞,在氧化低密度脂蛋白(O... 目的:动脉粥样硬化损伤中的泡沫细胞来源于巨噬细胞和平滑肌细胞,本实验在离体细胞培养的基础上探讨了两种来源泡沫细胞的不同特性。方法与结果:选择C57BL/6J小鼠腹膜巨噬细胞与猪主动脉平滑肌细胞,在氧化低密度脂蛋白(Oxidized low density lipoprotein,OLDL)环境中孵育一定时间后,可形成特征性的泡沫样细胞。其中,巨噬细胞源性泡沫样细胞的形成环境为 10 mg·L OLDL,作用时间为 96 h,细胞内总胆固醇含量为 77.6±8.3mg·g,胆固醇酯在总胆固醇中的构成比为53.1% ,胆固醇含量受消斑肽影响不大,第8d开始大量死亡;而肌源性泡沫样细胞则不同,形成环境为 15 mg·LOLDL,作用时间为 72 h,总胆固醇含量为 187.3±9.2 mg·g,胆固醇酯构成比为 64.1%,胆回醇含量受消斑肽影响较大,第 6 d开始大量死亡。结论:两种来源的泡沫细胞在产生环境、形成速度、胆固醇含量、生存时间和逆转性等方面可能存在着一定的差异。 展开更多
关键词 巨噬细胞 平滑肌细胞 源性泡沫细胞 病理学 动脉粥样硬化
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同型半胱氨酸对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇流出的影响 被引量:2
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作者 金萍 张华 +1 位作者 丛广志 贾绍斌 《宁夏医学杂志》 CAS 2015年第6期498-501,F0002,共5页
目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的形成及细胞内胆固醇流出的影响。方法首先以160 nmol·L-1的佛波酯(PMA)刺激THP-1单核细胞48 h使其分化为巨噬细胞,继之用含0、50、100、200μmol·L-1的Hcy和100 mg... 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞的形成及细胞内胆固醇流出的影响。方法首先以160 nmol·L-1的佛波酯(PMA)刺激THP-1单核细胞48 h使其分化为巨噬细胞,继之用含0、50、100、200μmol·L-1的Hcy和100 mg·L-1的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)共孵育24 h,使其转化为泡沫细胞。采用油红O染色进行泡沫细胞定性分析,泡沫细胞面积计数法进行半定量分析,总胆固醇和游离胆固醇测定法进行定量分析。结果经PMA处理48 h后,呈簇集状悬浮状态的单核细胞分化为形态不规则、有伪足并贴壁的巨噬细胞,继之经Hcy和ox-LDL处理后的细胞中出现了大量红染的脂滴,细胞呈现泡沫化改变;细胞面积计数法显示实验组较对照组而言泡沫细胞阳性率升高(P<0.05),以100μmol·L-1Hcy组最明显(P<0.05);酶终点法测定胆固醇流出结果显示,实验组的胆固醇酯相对值明显高于对照组(P<0.05)。结论成功建立THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞模型,Hcy减少了细胞内胆固醇的流出,在动脉粥样硬化的发生发展中扮演重要作用。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 同型半胱氨酸 巨噬细胞源性泡沫细胞 胆固醇流出
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巨噬细胞源性泡沫细胞是动脉粥样硬化治疗的新靶点 被引量:1
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作者 廉馨 王绿娅 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2004年第4期478-478,480,489,共3页
关键词 巨噬细胞源性泡沫细胞 动脉粥样硬化 治疗 新靶点 免疫介质
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血管紧张素Ⅱ对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1表达的调控作用
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作者 王彦富 陈志坚 +3 位作者 廖玉华 梅春丽 彭红玉 郭和平 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2006年第6期1095-1098,共4页
目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达的调控作用。方法以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)温育人巨噬细胞系THP-1源性巨噬细胞48h为对照,同时分别加入10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L的AngⅡ... 目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对THP-1源性泡沫细胞ATP结合盒转运子A1(ABCA1)表达的调控作用。方法以50mg/L的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)温育人巨噬细胞系THP-1源性巨噬细胞48h为对照,同时分别加入10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L的AngⅡ,采用RT-PCR和Westernblotting法分别检测THP-1源性泡沫细胞中ABCA1mRNA与蛋白的表达,采用酶法检测细胞内胆固醇含量,应用液体闪烁计数仪检测胆固醇流出的变化。结果与对照组比较,10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/LAngⅡ组ABCA1mRNA和蛋白表达均下降(P<0.05),胞内胆固醇含量增加(P<0.05),胆固醇流出率减少(P<0.05)。结论AngⅡ可下调THP-1源性泡沫细胞ABCA1的表达,促进泡沫细胞形成。 展开更多
关键词 血管紧张素Ⅱ THP-1源性泡沫细胞 ATP结合盒转运子A1 胆固醇含量 胆固醇流出
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血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1特异性小发夹RNA表达载体的构建及其对巨噬细胞源性泡沫细胞氧化应激的影响
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作者 杨慧宇 边云飞 +3 位作者 杨志明 张娜娜 高奋 肖传实 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期590-590,共1页
关键词 血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体l 发卡样siRNA 巨噬细胞源性泡沫细胞 氧化应激
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右归丸含药血清对THP-1源性泡沫细胞胆固醇代谢的影响及机制研究
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作者 徐安莉 赵敏 +1 位作者 陈会敏 周艳艳 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2114-2117,共4页
目的观察右归丸含药血清对THP-1源性泡沫细胞内SREBP-1c和ABCA1因子表达的影响,以探讨右归丸对泡沫细胞内胆固醇代谢的影响及机制。方法 THP-1细胞诱导分化成巨噬细胞后,在ox-LDL刺激48 h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,给予右归丸大、中、... 目的观察右归丸含药血清对THP-1源性泡沫细胞内SREBP-1c和ABCA1因子表达的影响,以探讨右归丸对泡沫细胞内胆固醇代谢的影响及机制。方法 THP-1细胞诱导分化成巨噬细胞后,在ox-LDL刺激48 h,使巨噬细胞转化为泡沫细胞,给予右归丸大、中、小剂量含药血清干预,通过油红O染色检测细胞内脂滴的形态,大小和数量;比色法检测不同浓度和不同时间干预后泡沫细胞内总胆固醇(TC)、游离胆固醇(FC)和胆固醇酯(CE)的含量;RT-PCR检测不同浓度和不同时间干预下泡沫细胞内SREBP1c、ABCA1mRNA表达和蛋白的影响。结果利用巨噬细胞源性泡沫细胞成功复制高胆固醇细胞模型,与正常组比较,模型组油红O染色可见大量橘红色染色的脂滴,脂滴密集,体积较大,与模型组比较右归丸含药血清作用细胞内脂滴颜色变浅、弥散;与正常组比较,模型组明显增加细胞内TC、FC和CE的含量(P<0.05),而随着右归丸浓度的增加,细胞内胆固醇的含量明显下降(P<0.05)。与对照组比较,模型组能明显增加细胞中SREBP1c mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05),抑制ABCA1mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05),当加入右归丸含药血清后与模型组比较,SREBP1c mRNA和蛋白的表达明显降低(P<0.05),ABCA1mRNA和蛋白的表达水平明显降低升高(P<0.05),且右归丸大剂量血清组SREBP1c、ABCA1变化最为明显。结论巨噬细胞源性泡沫细胞模型可能是通过抑制SREBP1c基因促进其下游ABCA1基因表达,有利于加速胆固醇的流出进而起到调节血脂的功能,这可能是右归丸治疗高脂血症的机制,为预防和治疗高脂血症提供新的靶点。 展开更多
关键词 THP-1源性泡沫细胞 SREBP-1C ABCA1 胆固醇代谢
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