食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1的毒性研究

目的:考察食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后的体内毒性,探索安全剂量范围,为后续临床试验提供参考信息。方法:30只食蟹猴随机分成3组,包括溶媒对照组和低、高剂量(1.0×10^(8)、4.0×10^(8)pfu)组,每组10只,雌雄各半。采用肌肉注射给药,每周给药2次,连续给药6周,恢复期8周。试验期间,每天观察动物的临床症状和摄食量,每次给药后1~2天观察注射部位症状,每周称量体重。分别在检疫期、首次给药后、给药期结束、恢复期结束的不同时间点进行安全药理(体温、血压、心电图)测定、临床病理(血液学、血凝、血清生化、尿生化)检查、免疫学(T淋巴细胞、细胞因子、免疫原性)测定、组织病理学检查和脏器称重。结果:给药后,动物未见异常症状、注射部位刺激性、体重和摄食量改变,未见安全药理和临床病理指标有意义的变化。与溶媒对照组比较,第41天,低剂量会引起动物CD3^(+)CD4^(+)T细胞比例升高,高剂量未见明显变化。第13至97天,低、高剂量均能引起动物产生抗载体结合抗体、抗抗体,以及个别动物检出hPD-1表达产物。证明药物在体内产生免疫活性和介导免疫原性。组织病理学检查显示,给药期结束时,低、高剂量组动物注射部位极轻度至中度混合细胞浸润,高剂量组动物坐骨神经极轻度髓鞘/轴突变性;恢复期结束时注射部位病变减为极轻度,坐骨神经病变未见恢复趋势。低、高剂量组动物未见组织脏器重量改变。结论:食蟹猴重复给予溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1后,动物体内耐受良好,受试物未见毒性反应剂量(NOAEL)是1.0×10^(8)pfu。上述研究结果为药物开展临床试验提供了数据支持。

具NK细胞的溶瘤病毒疗法的模型分析

本文建立了一类包含自然杀伤细胞(NK细胞)免疫反应的肿瘤病毒相互作用模型。首先分析了系统的边界性态,将系统的平衡点进行完整的分类,讨论了边界平衡点的局部稳定性,并从数值上验证了周期解的存在性,最后讨论了NK细胞在病毒治疗中所起到的作用。数值结果表明:a)整体肿瘤大小与病毒感染率成反比,与肿瘤生长速率成正比;b)对于NK细胞相关参数,NK细胞从淋巴结的流入速率越大,最终肿瘤越小;若产生NK细胞增殖,当增殖速率比较小时,相较于无NK增殖时,最终肿瘤变大,即较小的NK细胞增殖对治疗产生负面的影响,但当NK细胞的增殖速率过高时,将会导致肿瘤和病毒的完全清除。

溶瘤病毒及免疫疗法治疗肝癌研究进展

肝癌是最常见的癌症之一,常见的手术治疗方法主要包括经导管动脉化学治疗栓塞术、射频消融术、肝移植手术等,然而这些手术方法对于中晚期肝癌患者的治疗效果不够理想。近年来,随着肿瘤基因治疗和肿瘤免疫学的不断发展,肿瘤治疗方法从传统治疗模式向溶瘤病毒靶向疗法跨越。溶瘤病毒具有复制快、杀伤肿瘤细胞而不破坏其他正常细胞等优点,可通过激活免疫系统、改善肿瘤微环境等机制靶向治疗肝癌。此外,免疫疗法可降低肿瘤复发和转移的能力,从而发挥对肝癌的治疗作用。本文就溶瘤病毒及免疫疗法治疗肝癌的研究进展进行综述,以期为肝癌的临床治疗提供参考。

表达外源基因SPAM1重组CAV-2溶瘤病毒的构建与拯救

旨在研究犬腺病毒-2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)作为溶瘤病毒的潜力并进一步探索精子黏附因子(SPAM1)协同CAV-2重塑肿瘤微环境在肿瘤免疫治疗中的应用价值。本研究以P15A-CAV-2反向遗传操作平台为基础,使用RED/ET同源重组系统构建携带SPAM1外源基因的中间载体,使用中间载体将CAV-2骨架载体E3区域缺失并替换SPAM1外源基因表达盒。再利用合成引物敲除kmccdB反向筛选表达盒构建P15A-CAV-2-mCMV-SPAM1-SV40 polyA感染性克隆质粒并在MDCK-E1A细胞系中拯救重组溶瘤病毒,对重组病毒体外溶瘤效应进行验证。根据测序与酶切验证结果证明,本研究成功构建并拯救出稳定表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒1株;IFA试验证明,重组毒株能够高水平稳定表达外源基因且外源蛋白具有可弥散分布于细胞间的特点。缺失E3区域表达外源基因SPAM1的重组溶瘤病毒通过光镜观察和CCK8检测发现具有对犬癌细胞系A72强烈的杀伤效应。综上,本研究成功构建1株具有良好溶瘤效应的重组CAV-2,为后续应用于宠物肿瘤治疗奠定了基础。

溶瘤病毒作为抗肿瘤药治疗肝癌的研究进展

肝癌是全球第六大最常诊断的癌症,也是第三大最常见的癌症死亡原因,据相关数据推测,预计到2025年,每年将有超过100万人受到肝癌的影响。现有的指南推荐治疗方案,仍然无法根治肝癌,临床也仍然面临着高复发率、高死亡率、高转移率等窘境。采用溶瘤病毒作为治疗肿瘤的药物,是一种全新的治疗方式,具有一定的可行性。溶瘤病毒是天然存在或经过改造的病毒,其具有高选择性地复制和诱导细胞病变效应的能力,这些特性使它们非常适合用于癌症的治疗。本文通过对目前的溶瘤病毒种类及其作用机制,目前存在的问题,进行归纳整理。以期能为肝癌的治疗研究提供参考,同时对于拓展新的疗法,帮助更多的患者具有重要意义。

溶瘤病毒联合化疗及免疫治疗在神经母细胞瘤治疗中的研究进展

神经母细胞瘤(NB)是儿童最常见的颅外实体瘤,占儿童癌症相关死亡率的15%,严重威胁儿童生命健康。针对高危NB患儿,虽然综合了包括手术、放化疗、免疫治疗及造血干细胞移植等多种手段,治疗效果仍欠佳。溶瘤病毒(OVs)是一种基因工程或天然存在的病毒,它可以选择性地复制和杀死癌细胞而不伤害正常组织。OVs是一种新型抗肿瘤疗法,由于其高安全性和多通路溶瘤机制,显示出巨大的应用前景。本文就OVs及其联合化疗、免疫疗法在NB治疗中的研究进展及应用前景进行综述。

溶瘤病毒在结直肠癌治疗中的研究进展

结直肠癌(CRC)是最常见的消化道恶性肿瘤之一,给全球公共卫生带来了严峻挑战。传统的CRC手术治疗主要以开腹手术为主,虽然部分患者能够达到根治的目的,但创伤较大,手术出血量较多、术后恢复时间较长,且术后并发症的发生率较高,对其预后造成严重影响。与传统治疗方式相比,溶瘤病毒具有杀伤肿瘤途径多、杀伤力强、靶向性好、不良反应小、低耐药性以及低成本等优势,在CRC的治疗上具有广阔的应用前景。

平渊教授团队开发基因编辑溶瘤病毒-T细胞嵌合体用于癌症治疗

2024年2月9日,浙江大学药学院/良渚实验室平渊教授团队在《自然·生物技术》(Nature Biotechnology)在线刊登了题为“An oncolytic virus-T cell chimera for cancer immunotherapy”(DOI:10.1038/s41587-023-02118-7)的研究论文,报道了一种名为ONCOTECH(溶瘤病毒-T细胞嵌合体)的递送技术,用以同时增强溶瘤病毒的靶向输送和改善肿瘤微环境。研究人员首先构建了一种能够编码CRISPR-Cas9基因编辑器的溶瘤腺病毒,并使用含有特定抗原表达的生物膜对该溶瘤腺病毒进行包被,最后通过T细胞受体与生物膜上的抗原结合,将膜包被的基因编辑溶瘤腺病毒(命名为eOA)装载至T淋巴细胞表面。该研究发现,T淋巴细胞能够增强eOA的实体瘤靶向输送,并通过携带的基因编辑器能够靶向破坏肿瘤内的免疫抑制细胞中的PD-L1基因,从而逆转肿瘤微环境的免疫抑制作用,改善肿瘤微环境,同时增强溶瘤病毒的肿瘤溶解作用和过继T细胞对肿瘤细胞的杀伤。研究结果表明,ONCOTECH能够有效地抑制多种类型肿瘤生长,并能够诱导长期抗肿瘤免疫记忆,防止肿瘤复发。

溶瘤病毒联合免疫治疗在恶性肿瘤治疗中的应用进展

溶瘤病毒(oncolytic virus,OV)疗法通过溶瘤病毒在感染的肿瘤细胞内复制、裂解杀死肿瘤细胞,并促进“冷”-“热”肿瘤转换重塑肿瘤免疫微环境,诱导机体免疫系统对肿瘤细胞展开攻击从而达到抗肿瘤治疗的目的。病毒种类、病毒自身特征、宿主免疫力、给药途径及瘤种选择是OV高效发挥抗肿瘤作用的关键。随着基因工程技术的发展,OV可以经过基因编辑改造提高其针对肿瘤细胞的靶向性,增强其复制和裂解细胞的潜能并增强宿主抗肿瘤免疫水平,同时通过联合其他治疗方式可以增强抗肿瘤疗效。肿瘤的异质性是提升肿瘤治疗效果需要突破的瓶颈。鉴于目前临床上单一应用OV疗法的疗效有限,而OV疗法与免疫治疗在抗肿瘤作用机制上存在互补,其联合应用可能为肿瘤治疗提供新的策略。本文从临床获批的OV以及处于研究阶段的天然的或经基因编辑的OV种类、特点及抗肿瘤机制方面展开,同时对处于临床试验阶段的OV治疗进行梳理,总结OV联合治疗策略,尤其是联合以免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitor,ICI)和过继细胞疗法(adoptive cell therapy,ACT)为代表的肿瘤免疫治疗进行深入阐述,结合本项目组在OV研究中积累的经验提出OV在抗肿瘤治疗中的思考和展望。

PD-1溶瘤病毒对小鼠卵巢癌的抗肿瘤活性

目的探讨程序性细胞死亡蛋白(PD)-1溶瘤病毒对卵巢癌的抗肿瘤活性。方法向C57BL/6J小鼠右前腋下注射人卵巢癌腺癌细胞系SKOV3构建卵巢癌小鼠模型,分别以不同滴度的PD-1溶瘤病毒,测量小鼠肿瘤体积,筛选最佳滴度。将构建好的卵巢癌模型小鼠随机分为模型组、PD-1抗体组、单独溶瘤病毒组、PD-1溶瘤病毒组,每组16只。同时设置对照组16只。测定小鼠肿瘤体积、肿瘤质量;流式细胞术检测T淋巴细胞亚群CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+);酶联免疫吸附法检测血清白细胞介素(IL)-2、IL-10、干扰素(IFN)-γ浓度;免疫组化法检测肿瘤组织中P53、Ki67阳性表达情况。结果不同PD-1溶瘤病毒滴度的卵巢癌小鼠肿瘤体积比较差异有统计学意义(P<0.01);随着PD-1溶瘤病毒滴度的升高肿瘤体积逐渐降低。当PD-1溶瘤病毒滴度达到5×10^(7)时卵巢癌小鼠肿瘤体积不再明显降低,与1×10^(8)时肿瘤体积之间比较差异无统计学意义(P>0.05),因此后续实验以PD-1溶瘤病毒滴度5×10^(7)处理卵巢癌小鼠。PD-1抗体组、单独溶瘤病毒组、PD-1溶瘤病毒组肿瘤体积、肿瘤质量、CD8^(+)、IL-10、P53、Ki67阳性率明显低于模型组,脾脏指数、胸腺指数、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-2、IFN-γ明显高于模型组(P<0.05);PD-1溶瘤病毒组脾脏指数、胸腺指数、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IL-2、IFN-γ水平明显高于PD-1抗体组、单独溶瘤病毒组,肿瘤体积、肿瘤质量、CD8^(+)、IL-10水平、P53、Ki67阳性率明显低于PD-1抗体组、单独溶瘤病毒组(均P<0.05)。结论PD-1溶瘤病毒能够明显改善免疫器官功能,激活免疫系统,提高抗肿瘤免疫活性;此外PD-1溶瘤病毒还可通过下调P53、Ki67表达来抑制卵巢癌的发展。

表达抗PD-1抗体的溶瘤病毒在结肠癌腹腔移植瘤模型中的抗肿瘤作用

为了研究表达小鼠抗PD-1抗体(VT1093M)的溶瘤病毒对结肠癌腹腔移植瘤模型的抗肿瘤作用,利用BALB/c小鼠成瘤的小鼠结肠癌CT26-luc细胞株建立了结肠癌腹腔移植瘤模型。接种后第8天进行分组,设置生理盐水(normal saline,NS)组、病毒VT09X组和VT1093M组,每组5只,注射剂量为2.5×10^(7)pfu/250μL,NS注射250μL,每隔一天注射一次,共注射5次。末次注射后6 d,脱颈处死小鼠,提取外周血中CD45^(+)细胞和腹水细胞,进行体外杀伤实验。治疗组初次出现荧光消失后第13天,进行再挑战实验。结果表明,造模实验确定最佳接种条件为200μL的2.5×10^(6)个/mL细胞悬液;药效实验中,VT09X组和VT1093M组较NS组具有明显的肿瘤抑制效果,VT1093M组治疗期间出现肿瘤消失情况,较VT09X组抑瘤效果明显,但差异无统计学意义;再挑战实验中,VT1093M组均未出现肿瘤再次生长;在体外杀伤实验中,注射病毒组的外周血CD45^(+)细胞在靶效比为1∶40时对CT26-luc杀伤效果明显,对4T1细胞,各组杀伤效果较差。因此,重组溶瘤病毒VT1093M在结肠癌腹腔转移瘤模型中具有显著的抗肿瘤作用,且能激发小鼠产生较为持久的特异性免疫反应。

溶瘤病毒联合离子液体对肿瘤的杀伤治疗研究

单纯疱疹病毒2型作为溶瘤病毒的一种,能在体外对肿瘤细胞产生杀伤效果,在体内对肿瘤组织起到抑制生长效果。香叶酸和胆碱碳酸氢盐离子液体具有促进药物吸收、在组织中滞留药物的效果。合成香叶酸-胆碱碳酸氢盐离子液体,采用盐复分解法制得,进行蒸馏、重结晶法进行提纯,与一定比例PBS溶液混合,置换单纯疱疹病毒2型原有的溶剂,通过对肿瘤组织细胞进行体外杀伤、体内治疗等实验,证明离子液体可以使溶瘤病毒更好地渗透进入肿瘤组织中,使溶瘤病毒长期存在肿瘤组织内,从而加强溶瘤病毒对肿瘤的抑制、杀伤效果。

溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1在食蟹猴体内生物分布研究

目的拟建立检测溶瘤病毒药物HSV-1/hPD-1在小鼠和食蟹猴各组织器官中生物分布的实时定量核酸扩增检测(q PCR)试验方法,并利用该方法对食蟹猴重复给药毒性研究中伴随生物分布(含排泄)研究收集的样本进行检测。方法针对药物的特异性基因序列,设计合成引物对和探针,摸索适宜的PCR反应条件,构建检测用标准曲线并进行方法学验证。对食蟹猴重复给药HSV-1/hPD-1长毒试验中收集的组织脏器,包括血液、性腺(睾丸/附睾或子宫/卵巢)、肾、肝脏、肺、心脏、脑、脾脏、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结、注射部位、泪腺、唾液腺、背根神经节、尿、粪进行qPCR检测,测定药物在各组织器官中拷贝数。结果成功建立标准曲线pMD18T-1093,可用于定量检测药物在小鼠或食蟹猴基因组中分布拷贝数,是通用型标准曲线。食蟹猴组织检测结果显示,药物主要分布在给药部位,少量分布至肺、脑,经过尿液排泄至体外,在其他组织脏器无分布。靶器官分布数量呈剂量依赖性增加,会伴随时间延长减少至消除,不会在体内蓄积。脑组织检出药物分布不排除与样本污染有关。结论本研究成功建立了在非临床阶段开展生物分布研究的检测技术方法。试验方法的建立过程和研究思路对于其他基因治疗药物开展生物分布研究具有一定的借鉴意义。

基因修饰的新型溶瘤病毒治疗肿瘤的转化应用研究进展

溶瘤病毒能够选择性地感染、破坏和裂解肿瘤细胞,并诱发和增强机体的抗肿瘤免疫反应。天然溶瘤病毒由于存在感染风险、低效率、容易引起免疫应答而被清除等问题,严重限制其在临床中的运用。近十年来,随着肿瘤免疫治疗的兴起,以及基因工程和生物工程技术的飞速发展,经相关基因修饰的新型溶瘤病毒展现出令人惊喜的溶瘤效应,其安全性、有效性、特异性均得到极大改善。目前全球已有超过百种相关产品处于研发或临床试验期,其中已有产品获得批准上市,并已取得良好的临床效果,展现出极具临床运用的前景。本文主要从溶瘤病毒基因修饰的新策略及其与肿瘤免疫治疗联合运用两个方面进行综述。

溶瘤病毒治疗非小细胞肺癌

自2015年溶瘤疱疹病毒T-VEC在美获批治疗恶性黑色素瘤后,医学界对于溶瘤病毒疗法的关注与日俱增。在对于非小细胞肺癌的治疗研究过程中,溶瘤病毒疗法同样占有一定地位。某些溶瘤病毒对非小细胞肺癌具有特异性靶向作用,在基因工程和蛋白质工程飞速发展的基础上,研究者们又设计出许多针对各种特异性位点的重组溶瘤病毒,进一步提高了溶瘤病毒的靶向性与溶瘤作用,以期能够缓解症状甚至治愈非小细胞肺癌患者。本文简介了溶瘤病毒的野生型和基因编辑型两大分类,及其如何实现特异性靶向和杀伤肿瘤细胞的溶瘤机制,重点介绍了溶瘤病毒单独应用治疗非小细胞肺癌,或联合化学疗法、免疫疗法,例如CAR-T细胞疗法、免疫检查点抑制剂等当前热点研究治疗非小细胞肺癌的研究进展,在此基础上总结分析其潜在的发展方向;同时对溶瘤病毒疗法学界关注度较高的靶向运输问题进行了归纳与讨论,指出以细胞外囊泡作为药物载体具有良好的发展潜力;最后结合现有基础与临床研究分析指出其现存的问题与未来的应用前景,以期拓展非小细胞肺癌治疗的新方法,使其不再局限于传统疗法。

溶瘤病毒在肝细胞癌治疗中应用的研究进展

溶瘤病毒(OV)是一类能特异性地在肿瘤细胞中复制,靶向杀死肿瘤细胞且不损伤正常细胞的病毒,可通过免疫介导机制发挥抗肿瘤作用。目前多种OV正被应用于肝细胞癌(HCC)的临床前研究,已有OV被认定为HCC治疗药物。OV治疗已成为肿瘤免疫疗法之一,在晚期HCC治疗中的临床应用前景广阔,但面临许多挑战,如病毒的传递、抗病毒免疫等,其安全性和有效性也需进一步研究,包括探索联合应用药物组合、调整给药方式和抑制肿瘤微环境等。该文就OV在HCC治疗中应用的研究进展作一综述。

溶瘤病毒药物的研究进展

目的进一步了解溶瘤病毒及其药物,为后续溶瘤病毒药物安全性评价提供参考。方法总结并分析近年来关于溶瘤病毒作用机制、相关药物临床研究及其联合疗法的研究进展。结果目前共有Rigvir(ECHO-7病毒)、安柯瑞(重组人5型腺病毒)、T-Vec(单纯疱疹病毒)、Delytact(单纯疱疹病毒)4款溶瘤病毒类药物上市,均具有良好的疗效。并且随着生物技术的发展,溶瘤病毒制备策略更加多样有效。结论溶瘤病毒疗法具有杀伤效率高、靶向性好、不良反应小、多种杀伤肿瘤途径避免耐药性和成本低廉等诸多优点,有望成为新型肿瘤治疗策略。

溶瘤病毒抗神经胶质瘤治疗研究中的问题与对策

神经胶质瘤是人脑中最常见的原发性肿瘤,占中枢神经系统恶性肿瘤的81%,当前标准疗法仍是手术切除及术后放化疗。因神经胶质瘤具有高侵袭性、分子异质性、治疗后耐药肿瘤干细胞可再生,以及化疗药物难以通过血脑屏障(BBB)达到足够高的治疗浓度等特点,导致其预后非常差,患者中位存活期仅为15个月。近年来,新兴的溶瘤病毒免疫疗法治疗神经胶质瘤的研究备受关注并取得一定进展,但依然面临诸如BBB、免疫“冷”微环境、宿主抗病毒反应和肿瘤高度异质性等挑战。这些问题限制了溶瘤病毒疗法的深入发展及进一步应用,但也给基础与临床研究者带来新的研究机遇。因此,本文从穿越BBB、改善肿瘤微环境(TME)、调控溶瘤病毒介导的宿主免疫反应和适应肿瘤异质性等四个方面,阐述溶瘤病毒在抗神经胶质瘤治疗研究中的存在问题及对策。

新型溶瘤病毒HSV-1-ab-VISTA的构建及其抗肿瘤作用

目的探讨携带免疫检查点VISTA抗体的溶瘤病毒HSV-1-ab-VISTA在小鼠(C57BL/6J)移植瘤模型中的抗肿瘤效果.方法利用CRIPSR-Cas9基因编辑技术制备携带VISTA分子抗体的HSV-1-ab-VISTA溶瘤病毒;琼脂糖凝胶电泳检测VISTA抗体的基因组片段大小;蛋白免疫印迹法检测VISTA抗体表达情况;构建小鼠移植瘤模型,游标卡尺测量溶瘤病毒治疗后瘤体大小的变化,且进行分析.结果成功构建了携带免疫检查点VISTA抗体的溶瘤病毒HSV-1-ab-VISTA,和野生病毒相比,病毒增殖和裂解癌细胞的能力没有差别,HSV-1-ab-VISTA溶瘤病毒治疗显著缩小了小鼠的肿瘤大小.结论HSV-1-ab-VISTA溶瘤病毒可抑制小鼠结直肠移植瘤的生长.

共表达IL-7和CCL19的VSVΔ51溶瘤病毒在肝癌中的抗肿瘤活性研究

目的:构建共表达白细胞介素7(interleukin-7,IL-7)和趋化因子配体19[chemokine(C-C motif) ligand 19,CCL19]的溶瘤病毒VSVΔ51(7×19 VSVΔ51),并探索其在肝癌中的抗肿瘤活性。方法:细胞的活力测定(MTS法)检测溶瘤病毒对肿瘤细胞的细胞毒性;ELISA法检测病毒感染上清及肿瘤组织匀浆中的IL-7和CCL19的含量;皮下移植瘤模型检测溶瘤病毒的肿瘤抑制能力;流式细胞术检测肿瘤浸润T细胞的表型;免疫组化法检测肿瘤浸润T细胞及IFN-γ的含量。结果:VSVΔ51和7×19 VSVΔ51病毒均可以在小鼠肝癌细胞H22和Hepa1-6中复制,在2 PFU时裂解细胞的效率接近100%;VSVΔ51和7×19 VSVΔ51病毒均对小鼠肝癌移植瘤的生长产生抑制作用,且7×19 VSVΔ51病毒较VSVΔ51病毒抑制能力更强[瘤质量(232.7±13.72) mg vs.(603.8±20.3) mg,P<0.000 1];7×19 VSVΔ51病毒组治疗后肿瘤组织中IL-7[(673.5±62.6)pg·ml^(-1)vs.(383.1±108.3) pg·ml^(-1),P<0.01]和CCL19[(756.2±41.6)pg·ml^(-1)vs.(356.2±50.2) pg·ml^(-1),P<0.001]的含量较VSVΔ51病毒组显著升高,肿瘤浸润T细胞的数目增多(805±133 vs. 392±21,P<0.05),干细胞样记忆T细胞的比例显著提升[(72.5±9.8)%vs.(49.3±8.5)%,P<0.001)],肿瘤组织中IFN-γ的含量也明显升高[(817±52) pg·ml^(-1)vs.(227±63) pg·ml^(-1),P<0.001)]。结论:7×19 VSVΔ51病毒可在肝癌小鼠模型中激发出强大的抗肿瘤免疫反应并发挥显著的抗肿瘤作用。