溶磷草酸青霉菌筛选及其溶磷效果的初步研究

采集石灰性土壤样品进行了溶磷微生物的筛选 ,获得了具有溶磷作用的草酸青霉菌菌株P8和Pn1。不同培养条件下测定了它们的溶磷能力 ,并与拜莱青霉菌ATCC2 0 85 1和解磷巨大芽孢杆菌ATCC14 5 81进行了比较。在固体培养基上草酸青霉菌P8、Pn1表现较强的溶解Ca3 (PO4) 2 、Ca8H2 (PO4) 65H2 O、CaHPO4、FePO4和骨粉的能力 ;在液体培养条件下 ,能有效的溶解摩洛哥磷矿粉 ,氮源对其溶磷效果有显著影响 ,硝态氮高于铵态氮 ;接种P8能够显著增加灭菌和不灭菌土壤的有效磷含量 ,灭菌土壤增加的有效磷略高于不灭菌土壤。氮源影响草酸青霉菌产生有机酸的种类 ,使用铵态氮时主要分泌苹果酸、乙酸、丙酸、柠檬酸、琥珀酸 ,而硝态氮条件下几乎不再产生这些有机酸。这表明 ,氮源形态影响了它的代谢方向 ,而且它的溶磷机理不只一种 ,其机理尚不清楚 。

鹅源草酸青霉溶磷效果及对鹅磷代谢的影响

本试验以解磷巨大芽孢杆菌为对照,在以骨粉、CaHPO4、Ca3（PO4）2为磷源的培养基中,对青霉菌F17、F67的溶磷效果进行了研究;同时以鹅为试验动物,采用全收粪法进行了代谢试验,研究了日粮中添加不同水平草酸青霉菌液（0.1%、0.3%、0.5%）对Ca、P的消化吸收的影响。结果表明：①在以骨粉、CaHPO4、Ca3（PO4）2为磷源的固体培养基和液体培养基中,青霉菌F67组的溶磷圈直径极显著大于F17和对照菌株组（P〈0.01）,F67组的溶磷量极显著高于F17和对照菌株组的溶磷量（P〈0.01）。②在营养水平一致的条件下,随着草酸青霉菌液添加水平的提高,体内P的表观消化率为49.86%-59.78%,Ca的表观消化率为47.65%-58.25%,Ca、P表观消化率在草酸青霉发酵液添加比例为0.3%时最高,与对照组差异显著（P〈0.05）。

2株蓝莓溶磷内生真菌的筛选、鉴定及溶磷效果评价

从蓝莓植株内生真菌中筛选出具有溶磷、耐盐功能的菌株,为研究和评价其溶磷效果,采用固体溶磷圈法,根据是否产生溶磷圈来筛选蓝莓溶磷内生真菌,选取具有溶磷圈的真菌进行经典形态学和内源转录间隔区(ITS)序列分析和鉴定;采用液体培养法测定发酵液的有效磷含量及pH值;采用超高效液相色谱仪测定有机酸的种类及其含量,分析菌株的溶磷机制;采用固体培养法,设置不同NaCl浓度梯度用于分析蓝莓溶磷内生真菌的耐盐性。经形态学和分子生物学鉴定,菌株G14为烟管菌(Bjerkandera adusta)、菌株FG54为阿达青霉(Penicillium adametzii)。菌株FG54于5 d后有效磷含量最高,达到587.315μg/mL,菌株G14于5 d后有效磷含量最高,达到523.730μg/mL。通过对2株菌株有机酸的测定,发现该菌株的溶磷能力主要通过自身分泌的丙二酸、甲基丙二酸和柠檬酸等有机酸降低菌株发酵液的pH值,从而达到溶解磷的效果。同时,菌株FG54能较好的适应不同含量氯化钠浓度,在较高浓度的氯化钠培养基中也能生长。在氯化钠低浓度情况下,菌株G14生长速度较快,FG54生长较慢。通过筛选得到了2株溶磷性和耐盐性较好的真菌,它们在不同盐环境中差异显著,具有良好的应用前景。

温度对溶磷细菌生长和溶磷效果的影响

研究了温度对15株溶磷细菌生长的影响,选定一株生长情况最好的溶磷磷细菌M-9,以普通型大肠杆菌(E.coli)为阴性对照,模拟南方地区、华北地区和东北地区土壤环境温度(四季平均温度),研究其对溶磷效果的影响。结果表明:大部分溶磷细菌在28℃、37℃和45℃条件下生长较好。在南方地区土壤环境温度模拟条件下,溶磷细菌M-9在28℃时的溶磷效果最明显;在华北地区土壤环境温度模拟条件下,溶磷细菌M-9在26℃时的溶磷效果最明显;在东北地区土壤环境温度模拟条件下,溶磷细菌M-9在22℃时的溶磷效果最明显。

高粱根际高亲和性解磷复合菌系的构建及溶磷、促生效果

[目的]本文旨在构建既可在高粱根际高效定殖,又可显著强化单菌株溶磷、产吲哚⁃3⁃乙酸(IAA)能力的复合菌系,提高土壤中难溶性磷利用率,实现高粱节磷栽培。[方法]采用抗生素标记、Salkowski比色法、田间灌根试验、室内液态发酵试验和响应面CCD设计相结合的方法,对可在高粱根际高效定殖、促生效果明显的解磷细菌进行鉴选,并在此基础上构建复合菌系并测定其对高粱栽培的磷肥减施效果。[结果]菌株gz4⁃1、gz2⁃2、1⁃1和1⁃3可在主推高粱品种(晋杂22号、晋糯3号和晋杂2001号)根际高效定殖,灌根处理20 d后活菌数量均可达4.00×10^(5)cfu·g^(-1),同初始接种浓度1.00×10^(5)cfu·mL^(-1)相比活菌数量呈现增加趋势;4菌株产IAA能力以gz4⁃1、gz2⁃2、1⁃1较优,均高于20 mg·L^(-1);发酵72 h菌株1⁃3发酵液中的IAA浓度虽然低于菌株gz4⁃1、gz2⁃2、1⁃1,但仍达9.12 mg·L^(-1),且促生效果明显;复合菌系中菌株gz4⁃1、gz2⁃2、1⁃1和1⁃3的较优起始发酵浓度配比为8.75×10^(3)、1.33×10^(3)、1.00×10^(3)和9.90×10^(3)cfu·mL^(-1),且发酵72 h的溶磷和产IAA能力同单菌株相比显著提升(P<0.05);相同复合菌系接种浓度下和相同施磷水平下,复合菌系促生效果均随施磷量的增加或接种浓度增加呈现先升高后下降趋势,且高粱地上、地下表型指标普遍以接种量为1.00×10^(8)cfu·mL^(-1)时效果较优。[结论]菌株gz4⁃1、gz2⁃2、1⁃1和1⁃3联合发酵形成的复合菌系在接种浓度为1.00×10^(8)cfu·mL^(-1)时可使高粱栽培当季减磷1/4~1/3,对高粱节磷栽培具有重要意义。

两株根际高效溶磷菌的筛选、鉴定和溶磷特性

为筛选具有高效溶磷效果的菌株,丰富溶磷菌株资源,本研究用Pikovskaya(PVK)和National Botanical Research Institute’s Phosphate(NBRIP)培养基对水稻(Oryza sativa)根际土壤进行溶磷菌筛选纯化,同时对乳酸片球菌1.11(Pediococcus acidilactic)一并进行试验,测试其溶磷可能性。首先对获得菌株进行扫描电子显微镜观察和16S rRNA测序鉴定,然后用钼锑抗比色法考察菌株的溶磷效果。通过鉴定,本研究分离得到2株菌株,分别为绿针假单胞菌1.49(Pseudomonas chlororaphis)和绿针假单胞菌1.209。菌株1.49、菌株1.209和菌株1.11在NBRIP液体培养基条件下培养168 h,溶磷量分别可达到109.3、54.2和137.0 mg·L^−1,具有高效溶磷能力,可为研制微生物菌肥提供依据。

溶磷微生物肥料配方筛选及其效果验证

利用筛选获得的高效溶磷微生物菌株,选择不同的载体和保活材料研制成不同配方的溶磷微生物肥料,并通过盆栽试验验证其效果。结果表明,不同配方的溶磷微生物肥料均可以活化土壤难溶态磷,同时可以协同增加玉米植株的氮、磷、钾累积量,对玉米生长及产量也有积极的促进作用。从玉米单穗粒重分析,以F为载体适宜配方的增产效果为配方3>配方2>配方1>配方4>基质对照,增产幅度分别为25.33%、14.47%、11.05%、9.55%、5.81%;以Y为载体的适宜配方增产顺序为配方3>配方4>基质对照>配方2>配方1,增产幅度分别为25.03%、24.85%、22.55%、12.87%、1.05%。从植株养分积累情况分析,Y2和Y3处理的玉米植株氮、磷和钾含量与单施化肥的处理相比,增幅分别达到75.09%和62.65%;35.08%和32.89%;40.21%和46.47%。综合玉米长势、土壤速效磷含量、植株氮、磷和钾积累量以及收获后产量等指标,以Y为载体配方3(Y3)处理的效果最好。