溶脲脲原体双相一步法培养基的研制及临床应用

根据生命由水到陆进化的设想,研制出 Uu 双相一步法培养基,并与传统的两步法、生物梅里埃培养基和 PCR 法进行了对照,认为本法具有经济实用,节约时间,提高阳性率等优点,是当前较为理想的 Uu 培养基。并研制了 Uu 运输保养液。将培养基包装改进成安瓿式培养管,方便临床,有防止递送污染和降低成本的优点。笔者进行了10060例的临床应用和万例的推广应用。

溶脲脲原体双相一步培养与PCR技术的临床应用

用溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,Uu)双相一步培养法和PCR方法同时测定50例非淋球菌性尿道炎病人标本。双相一步培养法有24例阳性,阳性率为48%,PCR测定有20例阳性,阳性率40%,两者无显著差异(P>0.05)。24例培养阳性,PCR有5例阴性,26例培养阴性中,PCR有1例阳性。本文说明Uu双相一步培养法具有快速、准确、阳性率高,不易污染等优点,对于Uu的临床检测具有重要意义,PCR方法更快速简便,并直接能从样品中测定Uu的特异核酸片段,亦是Uu鉴定的有效手段,但不能取代培养法。

沙眼衣原体、溶脲脲原体感染致精浆TNF-α、IL-6升高在男女不育发病中的意义

采用聚合酶链反应技术（PCR）检测不育双方生殖道沙眼衣原体（CT）及溶脲脲原体（UU）DNA，酶标双抗体夹心法测定不育患者精浆TNF－α、IL－6含量。发现感染在不育双方呈平行性表达（P＞0．05），并导致不育患者精浆中TNF－α、IL－6明显增高（P＜0．05）。感染致精浆细胞因子的升高可能影响精子的密度、活动率、液化程度，并参与生殖器官的炎性损伤。提示精浆炎性细胞因子及CT、UU感染参与男女不育的发病过程。

溶脲脲原体感染动物模型的建立─对睾丸的形态学影响

本文观察了溶脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，Ｕ．Ｕ．）对ＳＤ雄性大鼠睾丸的形态学影响。结果表明，在４０例膀胱内接种Ｕ．Ｕ．（１０５ＣＣＵ／ｍｌ）的大鼠中，有２５例睾丸中分离出Ｕ．Ｕ，动物睾丸重量减轻。光镜下可见１１例动物呈广泛的曲精小管萎缩，生精细胞严重脱落。部分曲精小管仅见支持细胞和少量精原细胞，有的仅剩下界膜。在曲精小管中发现许多多核巨细胞，有多核巨细胞处，生精上皮破坏更为明显，间质渗出、水肿。电镜观察发现，Ｕ．Ｕ．可吸附或侵入生精细胞内，造成生精细胞胞浆空泡化乃至崩解，部分线粒体基质空泡化或嵴消失。其余１４只大鼠睾丸组织有局灶性破坏。

宁泌泰胶囊联合盐酸多西环素治疗溶脲脲原体阳性慢性前列腺炎的临床研究

目的:观察宁泌泰胶囊联合盐酸多西环素片对溶脲脲原体(Uu)引起的慢性前列腺炎的疗效。方法:采用随机对照研究方法,选取Uu阳性的慢性前列腺炎患者240例,随机分为中药组(35例)、西药组(78例)和联合组(127例),连续用药2周,观察临床疗效。中药组口服宁泌泰胶囊,4粒/次,3次/日;西药组口服盐酸多西环素片,100 mg/次,2次/日;联合组口服宁泌泰胶囊,4粒/次,3次/日,并联用盐酸多西环素片,100 mg/次,2次/日。结果:中药组、西药组和联合组Uu转阴率分别为54.3%(19/35),71.8%(56/78)和89.0%(113/127),联合组明显高于中、西药组(P均<0.05)。联合组、西药组和中药组的治愈率分别为25.2%、20.5%和20.0%,总有效率分别为89.0%、71.8%和54.3%,联合组与中药组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:宁泌泰胶囊联合盐酸多西环素片治疗Uu阳性的慢性前列腺炎比单用宁泌泰胶囊或盐酸多西环素片疗效好。

溶脲脲原体感染对男性不育患者精子质膜完整性的影响

目的:应用荧光染料SYBR-14/碘化丙锭(PI)双标法流式细胞术检测溶脲脲原体(Uu)感染对男性不育患者精子质膜完整性的影响。方法:收集63例男性精液标本,分为Uu感染组(n=32)和正常对照组(n=31)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析,培养法进行Uu检测。精液标本经PBS洗涤处理后用荧光染料SYBR-14/PI双染后上流式细胞仪分析,用发绿色荧光精子百分率(SYBR-14+/PI-%)表示质膜完整精子的比例,检测精子质膜完整性。结果:Uu感染组精子质膜完整性[(45.14±10.69)%versus(72.68±9.91)%]和(a+b)级精子百分率[(23.29±8.81)%versus(46.32±9.54)%]均显著低于正常对照组(P<0.01),两组间精液量、pH值、精子浓度差异无显著性(P>0.05)。结论:Uu感染引起精子质膜完整性下降,可能是导致男性不育的重要原因之一。

溶脲脲原体对小鼠巨噬细胞产生TNF－a的影响

溶脲脲原体（ＵｒｅａｐｌａｓｍａＵｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，Ｕ．Ｕ．）是泌尿生殖道常见的病原体，在Ｕ．Ｕ．上行性感染的动物模型中，已证明睾儿发生明显的病理损伤。本文以对数生长期的Ｕ．Ｕ．及热天活Ｕ．Ｕ．加入培养中的小鼠腹腔Ｍφ（ＰＥＣ－Ｍφ）中，并检测Ｍφ产生ＴＮＦ－α的活性。实验证明对数生长期的活Ｕ．Ｕ．及热灭活Ｕ．Ｕ．可使ＰＥＣ—Ｍφ产生ＴＮＦ—ａ的活性明显高于对照组（Ｐ＜０．０５），且与感染剂量相关．提示Ｕ．Ｕ．感染的动物模型中睾丸的病理损伤可能与局部微环境中细胞因子网络改变有关。

男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染对精液质量影响的研究

目的:了解男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染情况,探讨男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染对精液质量、附属性腺功能的影响及可能机制。方法:本研究对202例确诊的男性不育患者的精液标本进行溶脲脲原体培养,对精液参数及精浆α-葡萄糖苷酶、酸性磷酸酶和果糖进行检测,分析生殖道溶脲脲原体感染对精液参数及精浆生化指标的影响。结果:男性不育患者生殖道溶脲脲原体感染率为33.7%;生殖道溶脲脲原体感染阳性组和阴性组间精液量相差不显著[(2.93±1.32)mlvs(2.86±1.52)ml,P=0.774];阳性组精子密度较阴性组患者明显偏低[(84.37±52.92)×106/mlvs(101.90±43.90)×106/ml,P=0.025];阳性组精子活率较阴性组患者明显偏低[(44.62±22.13)%vs(51.83±19.88)%,P=0.036];阳性组患者精子活力明显低于阴性患者[(38.40±15.61)%vs(44.45±15.47)%,P=0.020];两组精液pH值均在正常值范围内,但阳性组明显高于阴性组(7.32±0.10vs7.19±0.29,P=0.003);阳性组与阴性组除侧摆幅度、向前运动、直线运动和摆动性等4项指标相差不显著外,对曲线运动性、直线速度、平均路径速度、平均移动角度)和鞭打频率等5项指标均有影响;阳性组精浆α-葡萄糖苷酶较阴性组明显降低[(40.0±18.7)U/mlvs(47.9±21.0)U/ml,P=0.026],Uu感染阳性组α-葡萄糖苷酶降低的相对危险性是阴性组的2.12倍;两组间精浆酸性磷酸酶和果糖水平无统计学差异(P均>0.05)。结论:在男性不育患者中,生殖道溶脲脲原体感染是精液质量下降的重要危险因素;生殖道溶脲脲原体感染可导致附睾分泌α-葡萄糖苷酶下降,但对前列腺酸性磷酸酶及果糖无明显影响,而这种感染对前列腺和精囊危害相对有限。

溶脲脲原体感染与中国男性不育关系的Meta分析

目的:探讨溶脲脲原体感染与中国男性不育的关系。方法:根据资料一致性检验结果,采取随机效应模型,对检索到的49篇有关溶脲脲原体感染与中国男性不育的文章利用RevMan4.2.2进行综合定量分析。比较采取不同样本量大小对研究结论的影响,同时分别分析培养检测和PCR检测的灵敏度。结果:溶脲脲原体感染与中国男性不育有明显关系,按不同样本量纳入文献,第1次结论为OR=4.43(95%CI:3.77～5.22);培养变色检测和PCR检测的OR值分别为4.25(95%CI:3.59～5.03)和5.35(95%CI:3.37～8.47);第2次结论OR=4.28(95%CI:3.52～5.20);培养变色检测和PCR检测的OR值分别为4.24(95%CI:3.41～5.28)和4.42(95%CI:2.73～7.17)。结论:溶脲脲原体感染和中国男性不育有明显关系;样本量大小对研究结论有明显影响,应合理设计试验样本量;PCR检测比培养检测具有更高的灵敏度。

溶脲脲原体与人精子膜蛋白交叉反应抗原的研究

目的 :研究溶脲脲原体 ( Ureaplasma urealyticum,UU)与人精子膜之间的交叉反应抗原。方法 :将从不育患者精液中分离、纯化等获取的 UU蛋白质与人精子膜蛋白进行十二烷基硫酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 ( SDS- PAGE) ,再将电泳条带转移到硝酸纤维素膜上 ,用兔抗人精子膜抗血清及羊抗兔 Ig G- HRP进行 Western blot反应。结果 :Western blot证实 UU中 61 k D、5 0 k D和 2 7k D蛋白质组份与精子膜蛋白具有相似抗原性。结论 :UU与人精子膜之间存在交叉反应抗原 ,这可能与临床上 UU感染不育患者血清和 /或精液中抗精子抗体 ( As Ab)

溶脲脲原体、沙眼衣原体感染与男性不育随机对照实验的Meta分析

目的：利用Meta分析法探讨中国人群溶脲脲原体、沙眼衣原体感染与男性不育的关系。方法：制定原始文献的纳入标准、排除标准及检索策略，在中国生物医学文摘（CBMA）、中国学术期刊全文数据库（CNKI）内进行病例对照研究的检索和资料提取。应用RevMan软件对有关溶脲脲原体（Uu）、沙眼衣原体（Ct）感染与男性不育关系的文献进行质量评价及综合定量评价。以优势比（OR）及其95％可信区间（95％CI）为效应尺度，并进行敏感性分析。结果：共检索到相关文献88篇，排除60篇，符合纳入标准28篇进入Meta分析。Uu、Ct感染与男性不育关系的合并OR值分别为ORUu：4．73（95％CI：3．77～5．94）、ORCt：4．59（95％CI：3．24～6．50）。结论：Uu、Ct感染为国人男性不育的重要危险因素。

男性生殖道溶脲脲原体感染与IVF结局的相关性研究

目的:通过回顾性分析IVF-ET治疗前男方生殖道溶脲脲原体(Uu)培养不同结果及其处理与IVFET治疗结局的关系,探讨男性生殖道Uu对IVF结局的影响及其术前进行Uu检查的临床意义。方法:进行IVF-ET的患者,男方通过病史询问、生殖系统超声检查、染色体检查排除遗传等因素,按男方精液Uu培养结果分为阳性和阴性两组。统计两组IVF治疗受精率、卵裂率、临床妊娠率、流产率,探讨Uu阳性对IVF的结局是否存在影响。结果:经选择的973例患者中Uu培养阴性组836例,阳性组137例,阳性组治疗后未转阴7例。Uu感染和无Uu感染者间IVF受精率(79.8%vs 81.6%)、异常受精率(12.4%vs 11.8%)及卵裂率(92.1%vs 92.0%)的差异均无显著性(P=0.13、0.58、0.94),Uu治疗后未转阴者和无Uu感染者间IVF受精率(89.8%vs 81.6%)、异常受精率(13.2%vs 11.8%)及卵裂率(92.5%vs 92.0%)的差异也均无显著性(P=0.10、0.75、0.10)。行胚胎移植患者共747例,Uu感染和无Uu感染者间临床妊娠率(34.7%vs 38.6%)和流产率(22.2%vs 16.5%)差异无显著性(P=0.44、0.39),Uu治疗后未转阴者和无Uu感染者间临床妊娠率(33.3%vs38.6%)和流产率(0 vs16.5%)差异也无显著性(P=0.79、0.53)。结论:男方生殖道Uu培养阳性对IVF的受精率、异常受精率、卵裂率、临床妊娠率及流产率均没有明显影响。Uu是否阳性对IVF的结局无明显影响,但由于Uu治疗后未转阴者数量较少,可能需要更大样本验证。

溶脲脲原体对大环内酯类药物的敏感性分析

目的:检测溶脲脲原体(Uu)对14环(红霉素和罗红霉素)、15环(阿奇霉素)和16环(交沙霉素和吉他霉素)大环内酯类药物的敏感性,为临床合理用药提供参考依据。方法:采用微量肉汤稀释法检测了5种大环内酯类药物对203株Uu的最低抑菌浓度(MIC)。结果:203株Uu对红霉素、罗红霉素、阿奇霉素、交沙霉素和吉他霉素的耐药率分别为:11.8％、7.4％、6.9％、3.9％和3.5％。在5种药物中,交沙霉素和吉他霉素抗Uu活性最强,MIC_(50)分别为0.125mg/L和0.5 mg/L,MIC_(90)分别为0.5mg/L和1mg/L,其次为阿奇霉素,MIC_(50)和MIC_(90)分别为2mg/L和4mg/L,红霉素和罗红霉素抗Uu活性较弱,MIC_(50)均为4mg/L,MIC_(90)均为8mg/L。结论:对Uu对大环内酯类药物存在不同程度的耐药;16环大环内酯类药物交沙霉素和吉他霉素抗Uu活性强于14环和15环大环内酯类药物。

溶脲脲原体感染对大鼠生育及胚胎发育影响的研究

９０只雄性ＳＤ大鼠随机分为三组。Ａ、Ｂ两组每只动物膀胱内接种溶脲脲原体（ＵｒｅａｐｌａｓｍａＵｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，Ｕ．Ｕ．）悬液１ｍｌ（１０５ＣＣＵ／ｍｌ）；Ｂ组接种３个月后，每日口服（灌胃）美满霉素２０～１００ｍｇ／ｋｇ体重，共１４天。Ｃ组为对照。接种５个月后，所有动物进行交配试验。结果表明，接钟后Ａ组动物睾丸组织Ｕ．Ｕ．再分离率为６２．５％，Ｂ组５％，Ｃ组未检出Ｕ．Ｕ．。Ａ组睾丸Ｕ．Ｕ．阳性的动物左右睾丸重量均明显低于Ｂ组和Ｃ组（Ｐ＜０．０２）。Ａ组有１２例动物不育（３０％），Ｂ组有２例动物不育（１０％），Ｃ组全部生育。Ａ组仔鼠（ｎ＝２４０，５．９７±０．６５ｇ）及胚鼠体重（ｎ＝２９３，３．５６±０．９７ｇ）明显低于Ｂ组（分别为ｎ＝１８２，６．９８±０．２６ｇ和ｎ＝１６１，４．４３±０．７２ｇ）和Ｃ组（分别为ｎ＝３２５，６．８９±０．５３ｇ和ｎ＝３４６，４．１７±０．８７ｇ）。Ａ组还发现死胎、畸胎、皮下出血和宫内生长迟缓现象。提示：Ｕ．Ｕ感染可影响大鼠的生育力及胚胎发育，美满霉素可有效抑制Ｕ．Ｕ．生长，并在一定程度上改善生殖状况。

溶脲脲原体感染与精子顶体反应

本实验对精液溶脲脲原体培养阳性的不育男性和其它不明原因不育男性及正常生育男性分别进行了精子明胶膜顶体反应和透射电镜观察。结果发现：在精液溶脲脲原体培养阳性的不育男性组中，严重感染者精子顶体反应率比其它不明原因不育组和正常生育男性组低，经统计学处理有显著意义（Ｐ１＜０．０１，Ｐ２＜０．０１）。电镜观察显示：溶脲脲原体感染者精子膜上有溶脲脲原体颗粒附着，出现精子膜和顶体膜缺损及破坏现象。本实验证实：溶脲脲原体感染可引起精子膜包括顶体膜的破损，精子顶体反应降低或消失。

四种溶脲脲原体对精子穿卵试验的作用比较

分别用血清型４、９、１０、１２四种溶脲脲原体按２０￣４０颜色变化单位（ＣＣＵ）／精子的浓度与正常生育男性精子一同孵育。结果发现，部分感染的精子尾部有绒毛状附着物；血清型４、１２溶脲脲原体与精子共同孵育后，精子活率及活力明显下降，血清型９、１０溶脲脲原体对精子活率及活力无明显影响。血清型４、９、１０、１２溶脲脲原体均使精子穿卵值（ＳＰＡ）明显降低（分别为６．５０％、１０．４５％、９．６０％和６．４０％），对照组为４９．３３％。提示溶脲脲原体不仅可能影响精子的活率与活力，而且可影响精卵相互作用乃至融合过程，溶脲脲原体的致病作用与其血清型有关。

溶脲脲原体生物分型方法的建立及应用

目的: 建立检测溶脲脲原体(Uu)生物型别的方法,研究两种Uu生物型(Parvo型和T960型 )感染与人精液质量之间的关系。 方法: 根据Uu两个生物型在 16S^23SrRNA间隔区基因序列,分别设计了Uu种族特异性引物及Uu两种生物型共 3对引物,检测了 949例生殖门诊男性患者的精液常规和精液Uu。 结果: 精液Uu培养阳性且UuPCR检测也呈阳性者 199例 (感染率 21. 1% ),其中Parvo型 136例 ( 136 /199, 68. 3% ),T960型 54例 ( 54 /199,27. 1% ),Parvo型和T960型同时阳性者 9例(9 /199, 4. 5% )。Uu感染T960型组与Parvo组和阴性组相比,精子活动力则明显下降(P<0. 05)。而精子活动率和精子密度无统计学差异。 结论: Uu感染的生物型与人精液质量有关,T960型Uu感染与精子活动力明显相关。

溶脲脲原体与人精子共同抗原的研究

Shepard首先从非淋球菌性尿道炎患者分离到类似肺炎支原体样的微生物,因培养所形成的菌落微小被称为T株和T支原体。近年来按其能溶解尿素的特性被命名为解脲脲原体或溶脲脲原体(Ureaplasma urealyticum)。随着研究的深入,越来越多的证据表明该支原体对成人泌尿生殖道及对新生儿和胎儿具致病作用,并认为与某些不孕症有关。现将溶脲脲原体的一般特性、分离鉴定和致病作用做一简述。

溶脲脲原体感染对大鼠睾丸Sertoli细胞FasL表达的影响

溶脲脲原体（Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ Ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ，ＵＵ）是泌尿生殖道感染的常见病原体，可导致睾丸明显的病理损伤，且与不育有关。本文以对数生长期的ＵＵ、热灭活ＵＵ和ＵＵ上清液体外感染或作用于大鼠的Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞，观察Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞表面 ＦａｓＬ表达的变化。实验证明，活ＵＵ、热灭活 ＵＵ和 ＵＵ上清感染后，Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞表面 ＦａｓＬ表达均增加，其中以活ＵＵ感染的影响最为明显。提示睾丸组织的免疫豁免与其局部的ＦａｓＬ功能性表达有关；在感染时，Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞通过上调ＦａｓＬ的表达以维持睾丸局部免疫豁免的保护机制。

溶脲脲原体及其两个生物群与非淋菌性尿道炎相关性的研究

目的阐明溶脲脲原体及其2个生物群与非淋菌性尿道炎的关系。方法使用通用引物-PCR-毛细管电泳法对淋菌性尿道炎组,非淋菌性尿道炎组和对照组中的溶脲脲原体的2个生物群进行检测。结果溶脲脲原体生物群2在非淋菌性尿道炎中的检出率高于对照组(P<0.05),溶脲脲原体生物群1在淋菌性尿道炎中的检出率低于对照组(P<0.05),而在非淋菌性尿道炎和对照组中,溶脲脲原体生物群1的检出率差异无显著性(P>0.05)。结论溶脲脲原体生物群2是和非淋菌性尿道炎有一定关系的,溶脲脲原体生物群2可能才是引起非淋菌性尿道炎的病原体之一,而生物群1不引起非淋菌性尿道炎,淋球菌的增殖有可能抑制尿道中的溶脲脲原体生物群1的生长。